摘要 | 第4-8页 |
abstract | 第8-11页 |
第一章 引言 | 第15-19页 |
1.1 活性氧簇及NADPH氧化酶 | 第15-16页 |
1.1.1 活性氧簇 | 第15页 |
1.1.2 NADPH氧化酶 | 第15-16页 |
1.2 NOX4型NADPH氧化酶 | 第16-17页 |
1.2.1 NOX4 | 第16页 |
1.2.2 NOX4与肿瘤的关系 | 第16-17页 |
1.3 谷氨酰胺代谢与肿瘤的关系 | 第17-18页 |
1.4 NOX4与谷氨酰胺代谢的关系 | 第18页 |
1.5 课题的提出及意义 | 第18-19页 |
第二章 NOX4对NSCLC谷氨酰胺代谢的影响 | 第19-37页 |
2.1 引言 | 第19页 |
2.2 材料与仪器 | 第19-21页 |
2.2.1 仪器 | 第19-20页 |
2.2.2 主要试剂和耗材 | 第20-21页 |
2.3 实验方法 | 第21-30页 |
2.3.1 细胞培养 | 第21-23页 |
2.3.2 细胞转染 | 第23-24页 |
2.3.3 免疫印记 | 第24-26页 |
2.3.4 实时荧光定量PCR检测MRNA的表达水平 | 第26-28页 |
2.3.5 谷氨酰胺检测 | 第28-29页 |
2.3.6 谷氨酸检测 | 第29页 |
2.3.7 免疫组织化学 | 第29-30页 |
2.3.8 统计学方法 | 第30页 |
2.4 实验结果 | 第30-36页 |
2.4.1 抑制NOX4对NSCLC谷氨酰胺代谢的影响 | 第30-34页 |
2.4.2 过表达NOX4对NSCLC谷氨酰胺代谢的影响 | 第34-35页 |
2.4.3 临床标本水平NOX4与谷氨酰胺代谢关键酶相关性分析 | 第35-36页 |
2.5 小结与讨论 | 第36-37页 |
第三章 NOX4对谷氨酰胺代谢介导的GSH及NADPH的影响 | 第37-42页 |
3.1 引言 | 第37页 |
3.2 仪器与材料 | 第37-38页 |
3.2.1 主要仪器 | 第37页 |
3.2.2 主要试剂与材料 | 第37-38页 |
3.3 实验方法 | 第38-39页 |
3.3.1 细胞外H_2O_2 | 第38页 |
3.3.2 细胞凋亡检测 | 第38页 |
3.3.3 GSH和GSSG检测试剂盒 | 第38-39页 |
3.3.4 NADPH含量检测 | 第39页 |
3.3.5 统计学方法 | 第39页 |
3.4 实验结果 | 第39-41页 |
3.4.1 在NSCLC细胞中NOX4对NADPH的影响 | 第39-40页 |
3.4.2 在NSCLC细胞中NOX4对GSH的影响 | 第40-41页 |
3.5 小结与讨论 | 第41-42页 |
第四章 NOX4调控的谷氨酰胺代谢对NSCLC细胞增殖的影响 | 第42-51页 |
4.1 引言 | 第42页 |
4.2 仪器与材料 | 第42-43页 |
4.2.1 主要仪器 | 第42页 |
4.2.2 主要试剂和材料 | 第42-43页 |
4.3 实验方法 | 第43-45页 |
4.3.1 细胞集落形成实验 | 第43-44页 |
4.3.2 MTT法检测细胞增殖 | 第44页 |
4.3.3 成瘤实验 | 第44页 |
4.3.4 TUNEL试验 | 第44-45页 |
4.3.5 统计学方法 | 第45页 |
4.4 实验结果 | 第45-49页 |
4.4.1 NOX4调控的谷氨酰胺代谢对NSCLC增殖的影响 | 第45-46页 |
4.4.2 NOX4调控的GSH赋予NSCLC细胞凋亡抗性 | 第46-48页 |
4.4.3 GSH介导的氧化还原适应能够调控过表达NOX4的A549细胞的增殖 | 第48-49页 |
4.5 小结与讨论 | 第49-51页 |
第五章 探究NOX4调控NSCLC谷氨酰胺代谢的机制 | 第51-58页 |
5.1 引言 | 第51-52页 |
5.2 仪器与试药 | 第52页 |
5.2.1 主要仪器 | 第52页 |
5.2.2 主要试剂和材料 | 第52页 |
5.3 实验方法 | 第52-53页 |
5.3.1 细胞外H2O2的测定 | 第52页 |
5.3.2 免疫印记 | 第52页 |
5.3.3 实时荧光定量PCR | 第52页 |
5.3.4 统计学方法 | 第52-53页 |
5.4 实验结果 | 第53-57页 |
5.4.1 NOX4来源的H_2O_2调控NSCLC的谷氨酰胺代谢 | 第53-54页 |
5.4.2 NOX4通过C-MYC的表达促进NSCLC谷氨酰胺代谢 | 第54-57页 |
5.5 小结与讨论 | 第57-58页 |
第六章 结论与展望 | 第58-60页 |
6.1 结论 | 第58-59页 |
6.2 展望 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-66页 |
附录 | 第66-72页 |
主要英文缩略语索引 | 第72-75页 |
致谢 | 第75-76页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第76页 |