| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第13-19页 |
| 1.1 麻类纤维的优良特征 | 第13页 |
| 1.2 脱胶是麻类产业发展的关键技术 | 第13页 |
| 1.3 麻纤维伴生物的组成与结构 | 第13-14页 |
| 1.3.1 麻纤维伴生物组成 | 第13-14页 |
| 1.3.2 麻纤维伴生物的结构 | 第14页 |
| 1.4 麻类脱胶的关键酶 | 第14-15页 |
| 1.4.1 果胶酶 | 第14-15页 |
| 1.4.2 木聚糖酶 | 第15页 |
| 1.4.3 甘露聚糖酶 | 第15页 |
| 1.5 麻类生物脱胶的技术原理 | 第15-16页 |
| 1.6 DCE-01菌株具有广谱性和高效性特点 | 第16页 |
| 1.7 DCE-01菌株脱胶关键酶基因的研究进展 | 第16-17页 |
| 1.8 多基因共表达 | 第17页 |
| 1.9 本研究的目的和意义 | 第17-19页 |
| 第二章 DCE-01菌株关键脱胶酶基因的克隆与分析 | 第19-28页 |
| 2.1 材料 | 第19-20页 |
| 2.1.1 菌株与载体 | 第19页 |
| 2.1.2 试剂 | 第19-20页 |
| 2.1.3 仪器设备 | 第20页 |
| 2.1.4 实验培养基 | 第20页 |
| 2.2 方法 | 第20-23页 |
| 2.2.1 菌株DCE-01的活化 | 第20-21页 |
| 2.2.2 菌株DCE-01的基因组DNA提取 | 第21页 |
| 2.2.3 引物设计 | 第21页 |
| 2.2.4 PCR扩增DCE-01关键脱胶酶基因 | 第21-22页 |
| 2.2.5 目的片段回收 | 第22页 |
| 2.2.6 平末端PCR克隆基因片段加尾 | 第22页 |
| 2.2.7 目的片段的TA连接 | 第22-23页 |
| 2.2.8 重组质粒构建与转化 | 第23页 |
| 2.2.9 筛选与鉴定重组子 | 第23页 |
| 2.2.10 生物信息学分析克隆基因 | 第23页 |
| 2.3 结果与分析 | 第23-27页 |
| 2.3.1 DCE-01菌株基因组DNA提取 | 第23-24页 |
| 2.3.2 扩增关键酶基因 | 第24页 |
| 2.3.3 筛选与鉴定重组子 | 第24-25页 |
| 2.3.4 关键脱胶酶基因的生物信息学分析 | 第25-27页 |
| 2.4 小结与讨论 | 第27-28页 |
| 第三章 关键脱胶酶的多基因共表达 | 第28-40页 |
| 3.1 材料与方法 | 第28-29页 |
| 3.1.1 菌株与载体 | 第28页 |
| 3.1.2 试剂 | 第28页 |
| 3.1.3 仪器设备 | 第28页 |
| 3.1.4 主要培养基 | 第28-29页 |
| 3.2 方法 | 第29-34页 |
| 3.2.1 引物设计 | 第29页 |
| 3.2.2 关键脱胶酶基因克隆与载体构建 | 第29-31页 |
| 3.2.3 共表达质粒的构建 | 第31页 |
| 3.2.4 重组子的鉴定及筛选 | 第31页 |
| 3.2.5 酶的诱导表达 | 第31-33页 |
| 3.2.6 SDS-PAGE电泳分析 | 第33-34页 |
| 3.2.7 测定酶活力 | 第34页 |
| 3.3 结果与分析 | 第34-39页 |
| 3.3.1 脱胶关键酶基因克隆及载体构建 | 第34-35页 |
| 3.3.2 重组质粒的筛选与鉴定 | 第35-36页 |
| 3.3.3 重组菌株表达产物SDS-PAGE电泳分析 | 第36页 |
| 3.3.4 酶活性测定 | 第36-37页 |
| 3.3.5 重组菌株酶活性测定 | 第37-39页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第39-40页 |
| 第四章 重组质粒在DCE-01菌株中的表达 | 第40-48页 |
| 4.1 材料和仪器 | 第40页 |
| 4.1.1 菌株和质粒 | 第40页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第40页 |
| 4.1.3 仪器设备 | 第40页 |
| 4.2 方法 | 第40-42页 |
| 4.2.1 DCE-01菌株活化提纯 | 第40页 |
| 4.2.2 制备DCE-01的感受态细胞 | 第40-41页 |
| 4.2.3 重组质粒的转化 | 第41页 |
| 4.2.4 重组菌株的酶切验证 | 第41页 |
| 4.2.5 菌悬液培养 | 第41页 |
| 4.2.6 酶活力的测定 | 第41页 |
| 4.2.7 脱胶实验 | 第41-42页 |
| 4.2.8 高效液相色谱测定单糖浓度 | 第42页 |
| 4.3 结果与分析 | 第42-47页 |
| 4.3.1 DCE-01重组质粒检验 | 第42页 |
| 4.3.2 不同时间点酶活性测定 | 第42-47页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第47-48页 |
| 第五章 全文结论 | 第48-50页 |
| 5.1 研究结果 | 第48-49页 |
| 5.2 创新点 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 作者简历 | 第57页 |