摘要 | 第6-7页 |
abstract | 第7-8页 |
英文缩略表 | 第13-15页 |
第一章 引言 | 第15-21页 |
1.1 口蹄疫 | 第15页 |
1.2 口蹄疫病毒 | 第15-19页 |
1.2.1 口蹄疫病毒基因组 | 第15-16页 |
1.2.2 口蹄疫病毒粒子结构 | 第16页 |
1.2.3 口蹄疫病毒的抗原表位 | 第16-18页 |
1.2.3.1 VP4 | 第17页 |
1.2.3.2 VP2 | 第17页 |
1.2.3.3 VP3 | 第17-18页 |
1.2.3.4 VP1 | 第18页 |
1.2.4 口蹄疫病毒的入侵 | 第18-19页 |
1.3 口蹄疫疫苗 | 第19-20页 |
1.3.1 口蹄疫病毒灭活疫苗 | 第19-20页 |
1.3.1.1 常规灭活疫苗 | 第19页 |
1.3.1.2 标记疫苗 | 第19-20页 |
1.3.2 合成肽疫苗 | 第20页 |
1.4 研究内容 | 第20-21页 |
第二章 口蹄疫病毒VP3定点突变体的构建 | 第21-32页 |
2.1 材料 | 第22页 |
2.1.1 质粒和细胞 | 第22页 |
2.1.2 主要试剂 | 第22页 |
2.1.3 主要仪器 | 第22页 |
2.2 方法 | 第22-27页 |
2.2.1 引物合成 | 第22-23页 |
2.2.2 FMDVVP3基因的改造 | 第23-25页 |
2.2.3 FMDV基因组修饰型全长cDNA分子克隆的构建 | 第25页 |
2.2.4 FMDV基因组修饰型全长cDNA分子克隆的鉴定 | 第25页 |
2.2.5 基因工程毒的拯救 | 第25-26页 |
2.2.5.1 质粒线化 | 第25-26页 |
2.2.5.2 质粒转染 | 第26页 |
2.2.5.3 传代 | 第26页 |
2.2.6 基因工程毒的鉴定 | 第26-27页 |
2.2.6.1 RT-PCR | 第26页 |
2.2.6.2 间接免疫荧光试验(Indirect Immunofluorescence Assay, IIFA) | 第26-27页 |
2.3 结果 | 第27-30页 |
2.3.1 FMDV基因组修饰型全长cDNA质粒的鉴定结果 | 第27-28页 |
2.3.2 细胞转染与传代结果 | 第28页 |
2.3.3 基因工程毒的鉴定结果 | 第28-30页 |
2.3.3.1 RT-PCR扩增结果 | 第28-29页 |
2.3.3.2 间接免疫荧光检测结果 | 第29-30页 |
2.4 讨论 | 第30-32页 |
第三章 口蹄疫病毒VP3定点突变体的生物学特性鉴定 | 第32-43页 |
3.1 材料 | 第33页 |
3.1.1 细胞、病毒和实(试)验动物 | 第33页 |
3.1.2 引物 | 第33页 |
3.1.3 主要试剂和耗材 | 第33页 |
3.1.4 仪器 | 第33页 |
3.2 方法 | 第33-35页 |
3.2.1 基因工程毒P1基因的扩增与测序 | 第33-34页 |
3.2.2 蚀斑形成试验 | 第34页 |
3.2.3 一步生长曲线的绘制 | 第34页 |
3.2.4 基因工程毒的致病力试验 | 第34-35页 |
3.2.4.1 TCID_(50)的测定 | 第34-35页 |
3.2.4.2 LD_(50)的测定 | 第35页 |
3.2.4.3 本动物感染试验 | 第35页 |
3.3 结果 | 第35-40页 |
3.3.1 FMDVVP3定点突变体的遗传稳定性分析结果 | 第35-36页 |
3.3.2 FMDVVP3定点突变体的蚀斑表型鉴定结果 | 第36-38页 |
3.3.3 FMDVVP3定点突变体的复制动力学结果 | 第38-39页 |
3.3.4 FMDVVP3定点突变体的致病力试验结果 | 第39-40页 |
3.3.4.1 TCID_(50)的测定结果 | 第39页 |
3.3.4.2 LD_(50)的测定结果 | 第39-40页 |
3.3.4.3 本动物(猪)感染试验结果 | 第40页 |
3.4 讨论 | 第40-43页 |
第四章 口蹄疫病毒VP3定点突变体的免疫血清学比较分析 | 第43-51页 |
4.1 材料 | 第44-45页 |
4.1.1 细胞 | 第44页 |
4.1.2 FMDV代表株 | 第44页 |
4.1.3 免疫阳性血清 | 第44-45页 |
4.1.4 实(试)验动物 | 第45页 |
4.1.5 主要试剂和耗材 | 第45页 |
4.1.6 仪器 | 第45页 |
4.2 方法 | 第45-47页 |
4.2.1 FMDV抗原的制备及安全性检验 | 第45-46页 |
4.2.2 FMDV灭活疫苗的配制 | 第46页 |
4.2.3 动物免疫试验 | 第46页 |
4.2.4 O型FMDV液相阻断ELISA抗体检测 | 第46页 |
4.2.5 病毒中和实验 | 第46-47页 |
4.3 结果 | 第47-49页 |
4.3.1 O型FMDV液相阻断ELISA抗体检测结果 | 第47-48页 |
4.3.2 病毒中和实验结果 | 第48-49页 |
4.4 讨论 | 第49-51页 |
第五章 全文结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
作者简历 | 第63页 |