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口蹄疫病毒VP3定点突变体的构建及其生物学特性和免疫血清学研究

摘要第6-7页
abstract第7-8页
英文缩略表第13-15页
第一章 引言第15-21页
    1.1 口蹄疫第15页
    1.2 口蹄疫病毒第15-19页
        1.2.1 口蹄疫病毒基因组第15-16页
        1.2.2 口蹄疫病毒粒子结构第16页
        1.2.3 口蹄疫病毒的抗原表位第16-18页
            1.2.3.1 VP4第17页
            1.2.3.2 VP2第17页
            1.2.3.3 VP3第17-18页
            1.2.3.4 VP1第18页
        1.2.4 口蹄疫病毒的入侵第18-19页
    1.3 口蹄疫疫苗第19-20页
        1.3.1 口蹄疫病毒灭活疫苗第19-20页
            1.3.1.1 常规灭活疫苗第19页
            1.3.1.2 标记疫苗第19-20页
        1.3.2 合成肽疫苗第20页
    1.4 研究内容第20-21页
第二章 口蹄疫病毒VP3定点突变体的构建第21-32页
    2.1 材料第22页
        2.1.1 质粒和细胞第22页
        2.1.2 主要试剂第22页
        2.1.3 主要仪器第22页
    2.2 方法第22-27页
        2.2.1 引物合成第22-23页
        2.2.2 FMDVVP3基因的改造第23-25页
        2.2.3 FMDV基因组修饰型全长cDNA分子克隆的构建第25页
        2.2.4 FMDV基因组修饰型全长cDNA分子克隆的鉴定第25页
        2.2.5 基因工程毒的拯救第25-26页
            2.2.5.1 质粒线化第25-26页
            2.2.5.2 质粒转染第26页
            2.2.5.3 传代第26页
        2.2.6 基因工程毒的鉴定第26-27页
            2.2.6.1 RT-PCR第26页
            2.2.6.2 间接免疫荧光试验(Indirect Immunofluorescence Assay, IIFA)第26-27页
    2.3 结果第27-30页
        2.3.1 FMDV基因组修饰型全长cDNA质粒的鉴定结果第27-28页
        2.3.2 细胞转染与传代结果第28页
        2.3.3 基因工程毒的鉴定结果第28-30页
            2.3.3.1 RT-PCR扩增结果第28-29页
            2.3.3.2 间接免疫荧光检测结果第29-30页
    2.4 讨论第30-32页
第三章 口蹄疫病毒VP3定点突变体的生物学特性鉴定第32-43页
    3.1 材料第33页
        3.1.1 细胞、病毒和实(试)验动物第33页
        3.1.2 引物第33页
        3.1.3 主要试剂和耗材第33页
        3.1.4 仪器第33页
    3.2 方法第33-35页
        3.2.1 基因工程毒P1基因的扩增与测序第33-34页
        3.2.2 蚀斑形成试验第34页
        3.2.3 一步生长曲线的绘制第34页
        3.2.4 基因工程毒的致病力试验第34-35页
            3.2.4.1 TCID_(50)的测定第34-35页
            3.2.4.2 LD_(50)的测定第35页
            3.2.4.3 本动物感染试验第35页
    3.3 结果第35-40页
        3.3.1 FMDVVP3定点突变体的遗传稳定性分析结果第35-36页
        3.3.2 FMDVVP3定点突变体的蚀斑表型鉴定结果第36-38页
        3.3.3 FMDVVP3定点突变体的复制动力学结果第38-39页
        3.3.4 FMDVVP3定点突变体的致病力试验结果第39-40页
            3.3.4.1 TCID_(50)的测定结果第39页
            3.3.4.2 LD_(50)的测定结果第39-40页
            3.3.4.3 本动物(猪)感染试验结果第40页
    3.4 讨论第40-43页
第四章 口蹄疫病毒VP3定点突变体的免疫血清学比较分析第43-51页
    4.1 材料第44-45页
        4.1.1 细胞第44页
        4.1.2 FMDV代表株第44页
        4.1.3 免疫阳性血清第44-45页
        4.1.4 实(试)验动物第45页
        4.1.5 主要试剂和耗材第45页
        4.1.6 仪器第45页
    4.2 方法第45-47页
        4.2.1 FMDV抗原的制备及安全性检验第45-46页
        4.2.2 FMDV灭活疫苗的配制第46页
        4.2.3 动物免疫试验第46页
        4.2.4 O型FMDV液相阻断ELISA抗体检测第46页
        4.2.5 病毒中和实验第46-47页
    4.3 结果第47-49页
        4.3.1 O型FMDV液相阻断ELISA抗体检测结果第47-48页
        4.3.2 病毒中和实验结果第48-49页
    4.4 讨论第49-51页
第五章 全文结论第51-52页
参考文献第52-62页
致谢第62-63页
作者简历第63页

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