| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-47页 |
| 1 微藻生物柴油 | 第13-16页 |
| 1.1 生物柴油的介绍和发展前景 | 第13-14页 |
| 1.2 微藻生物柴油的优势和发展现状 | 第14-16页 |
| 2 提高微藻油脂含量的策略 | 第16-29页 |
| 2.1 生化工程法 | 第17-18页 |
| 2.2 基因工程法 | 第18-26页 |
| 2.3 转录因子工程法 | 第26-29页 |
| 3 微藻与 PUFA | 第29-38页 |
| 3.1 PUFA 的简介 | 第29-33页 |
| 3.2 脂肪酸去饱和酶和延伸酶 | 第33-36页 |
| 3.3 PUFA 的生物合成 | 第36-38页 |
| 4 微藻绿色细胞工厂 | 第38-47页 |
| 4.1 微藻转基因研究现状 | 第39-41页 |
| 4.2 微藻转基因方法概述 | 第41-43页 |
| 4.3 影响蛋白表达量的因素 | 第43-44页 |
| 4.4 同源重组方法在微藻中的尝试 | 第44-47页 |
| 第二章 脂类代谢途径中关键酶的初步信息学分析 | 第47-60页 |
| 1 材料与方法 | 第47-48页 |
| 2 结果与讨论 | 第48-59页 |
| 2.1 微拟球藻脂肪酸去饱和酶基因 | 第48-50页 |
| 2.2 微拟球藻酯酰辅酶 A 合成酶基因 | 第50-54页 |
| 2.3 微拟球藻苹果酸酶基因 | 第54-56页 |
| 2.4 微拟球藻二酰甘油酰基转移酶基因 | 第56-58页 |
| 2.5 微拟球藻乙酰辅酶 A 合酶基因 | 第58-59页 |
| 3 小结 | 第59-60页 |
| 第三章 同源重组在微拟球藻大洋种中的初步探索 | 第60-83页 |
| 1 用于敲除 ACS6 基因的核酸片段的准备 | 第61-70页 |
| 1.1 材料和试剂 | 第61页 |
| 1.2 方法流程 | 第61-68页 |
| 1.3 结果与讨论 | 第68-70页 |
| 1.3.1 基因组 DNA 提取的结果 | 第68-69页 |
| 1.3.2 三个片段的扩增结果 | 第69页 |
| 1.3.3 “融合片段”的回收结果 | 第69-70页 |
| 1.3.4 DpnⅠ消化“融合片段”之后的检测结果 | 第70页 |
| 2 微拟球藻电击转化与后续培养 | 第70-72页 |
| 2.1 材料和试剂 | 第70-71页 |
| 2.2 方法流程 | 第71-72页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第72页 |
| 3 微拟球藻转基因藻株的筛选与鉴定 | 第72-76页 |
| 3.1 材料和试剂 | 第72页 |
| 3.2 方法流程 | 第72-74页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第74-76页 |
| 3.3.1 转基因藻株基因组 DNA 提取结果 | 第74-75页 |
| 3.3.2 PCR 扩增转基因藻株基因组内 ble 基因的情况 | 第75-76页 |
| 4 确定外源 DNA 片段在转基因藻株基因组中的整合位置 | 第76-81页 |
| 4.1 材料和试剂 | 第77页 |
| 4.2 方法流程 | 第77-80页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第80-81页 |
| 5 小结 | 第81-83页 |
| 第四章 在微拟球藻中过表达关键酶基因 | 第83-115页 |
| 1 重组质粒的构建 | 第83-93页 |
| 1.1 材料和试剂 | 第83-84页 |
| 1.2 方法流程 | 第84-90页 |
| 1.3 结果与讨论 | 第90-93页 |
| 2 电穿孔法将 9 种重组质粒分别转入微拟球藻 | 第93-95页 |
| 2.1 材料和试剂 | 第93页 |
| 2.2 方法流程 | 第93-95页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第95页 |
| 3 转基因藻株的初步筛选鉴定 | 第95-98页 |
| 3.1 材料和试剂 | 第95-96页 |
| 3.2 方法流程 | 第96-97页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第97-98页 |
| 4 转基因藻株的特性研究 | 第98-112页 |
| 4.1 材料和试剂 | 第98页 |
| 4.2 方法流程 | 第98-103页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第103-112页 |
| 5 小结 | 第112-115页 |
| 工作总结与展望 | 第115-118页 |
| 参考文献 | 第118-138页 |
| 附录Ⅰ常见的脂肪酸 | 第138-139页 |
| 附录Ⅱ EPA 和 DHA 的重要生理功能* | 第139-140页 |
| 个人简历 | 第140页 |
| 发表的学术论文 | 第140-141页 |
| 致谢 | 第141-143页 |
