| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 符号和缩略语 | 第12-13页 |
| 前言 | 第13-15页 |
| 第一篇 文献综述 | 第15-35页 |
| 第一章 围产期奶牛营养障碍性疾病 | 第15-23页 |
| 1 奶牛酮病的发病原因 | 第15-16页 |
| 1.1 奶牛饲养管理不当 | 第15页 |
| 1.2 高产 | 第15页 |
| 1.3 奶牛产前过渡肥胖 | 第15页 |
| 1.4 饲料因素 | 第15-16页 |
| 1.5 继发因素 | 第16页 |
| 2 发病机理 | 第16-17页 |
| 2.1 体内糖来源不平衡导致奶牛体内生成多量的酮体 | 第16页 |
| 2.2 机体内糖缺乏,导致糖、脂肪代谢过程酮体生成量增多 | 第16-17页 |
| 2.3 酮体代谢障碍 | 第17页 |
| 2.4 激素调节作用与酮体生成 | 第17页 |
| 2.5 脂肪肝影响脂肪的代谢 | 第17页 |
| 3 临床病理学 | 第17-19页 |
| 3.1 临床生化指标 | 第18页 |
| 3.2 血浆游离脂肪酸及肝糖原浓度变化 | 第18页 |
| 3.3 酶活性改变 | 第18页 |
| 3.4 血液学检查 | 第18-19页 |
| 4 诊断方法 | 第19页 |
| 5 酮病的防控 | 第19-20页 |
| 5.1 使用生糖先质或促生糖物质 | 第19页 |
| 5.2 使用激素或调节剂 | 第19-20页 |
| 参考文献 | 第20-23页 |
| 第二章 生物发酵法生产甘油研究进展 | 第23-29页 |
| 1 发酵法产甘油研究现状 | 第23-24页 |
| 2 甘油代谢研究 | 第24-27页 |
| 2.1 酵母细胞甘油合成代谢 | 第24-25页 |
| 2.2 酿酒酵母GPD基因的研究进展 | 第25-26页 |
| 2.3 甘油的异化 | 第26-27页 |
| 参考文献 | 第27-29页 |
| 第三章 Cre/loxP介导的基因重组及其在酵母的应用 | 第29-35页 |
| 1 Cre重组酶 | 第29-30页 |
| 2 Cre重组酶识别位点—loxP位点 | 第30-31页 |
| 3 loxP位点的方向性 | 第31页 |
| 4 Cre/loxP重组系统作用机制 | 第31-32页 |
| 5 Cre/loxP重组系统在酵母中的应用 | 第32-33页 |
| 5.1 特定基因的敲除 | 第32页 |
| 5.2 整合表达载体中选择性标记的切除 | 第32-33页 |
| 6 Cre/loxP重组系统存在的问题 | 第33-34页 |
| 参考文献 | 第34-35页 |
| 第二篇 试验研究 | 第35-77页 |
| 第四章 酵母整合载体PGC的构建 | 第35-57页 |
| 1 材料与方法 | 第35-42页 |
| 1.1 材料 | 第35-37页 |
| 1.2 试验方法 | 第37-42页 |
| 2 结果 | 第42-52页 |
| 2.1 质粒pUG6和pSH65的酶切鉴定 | 第42-45页 |
| 2.2 PCR扩增GPD1基因及其启动子片段 | 第45-47页 |
| 2.3 CYC1终止子的扩增 | 第47-48页 |
| 2.4 载体PGC的构建 | 第48-52页 |
| 3 讨论 | 第52-54页 |
| 3.1 关于选择超表达GPD1基因 | 第53页 |
| 3.2 利用Cre/loxP构建整合表达载体 | 第53页 |
| 3.3 高效构建表达载体PGC | 第53-54页 |
| 4 小结 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-57页 |
| 第五章 产甘油酿酒酵母GPD1基因超表达突变株的构建 | 第57-69页 |
| 1 材料与方法 | 第57-63页 |
| 1.1 材料 | 第57-59页 |
| 1.2 试验方法 | 第59-63页 |
| 2 结果 | 第63-65页 |
| 2.1 载体PGC的线性化 | 第63-64页 |
| 2.2 重组子PCR鉴定 | 第64页 |
| 2.3 抗性基因的敲除 | 第64-65页 |
| 3 讨论 | 第65-67页 |
| 3.1 酵母生长状态对转化率的影响 | 第65页 |
| 3.2 还原剂预处理对转化率的影响 | 第65-66页 |
| 3.3 电场强度对转化率的影响 | 第66页 |
| 3.4 外源DNA浓度对转化率的影响 | 第66页 |
| 3.5 质粒线性化对转化率的影响 | 第66页 |
| 3.6 同源臂的长短对转化率的影响 | 第66页 |
| 3.7 电击后酵母细胞的复苏培养有利于提高转化率 | 第66-67页 |
| 4 小结 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-69页 |
| 第六章 突变株生物学特性研究 | 第69-77页 |
| 1 材料与方法 | 第69-73页 |
| 1.1 材料 | 第69-70页 |
| 1.2 方法 | 第70-73页 |
| 2 结果 | 第73-74页 |
| 2.1 菌株生长曲线 | 第73页 |
| 2.2 突变菌株摇瓶发酵结果 | 第73-74页 |
| 3 讨论 | 第74-75页 |
| 4 小结 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-77页 |
| 全文结论 | 第77-79页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术性论文及著作 | 第79-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
