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血红素加氧酶1对猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的调控作用

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-8页
第一章 文献综述第12-20页
    1.1 猪繁殖与呼吸综合征病毒及其病原的研究进展第12-18页
        1.1.1 PRRSV 的分类第12页
        1.1.2 PRRSV 的遗传变异性第12-13页
        1.1.3 PRRSV 的传播第13页
        1.1.4 PRRSV 的复制第13-14页
        1.1.5 PRRSV 的非结构蛋白第14-15页
        1.1.6 PRRSV 的结构蛋白第15-16页
        1.1.7 PRRSV 的致病机制第16-17页
        1.1.8 PRRS 的临床症状第17页
        1.1.9 PRRS 的疫苗防控第17-18页
    1.2 血红素加氧酶 1 的研究进展第18-19页
        1.2.1 血红素加氧酶 1 介绍第18页
        1.2.2 HO-1 在病原感染过程中的作用的研究进展第18-19页
    1.3 本研究的目的与意义第19-20页
第二章 PRRSV感染对 MARC145 及 PK-15CD163中血红素加氧酶 1表达的影响第20-29页
    2.1 材料第20-22页
        2.1.1 细胞、PRRSV 毒株及抗体第20页
        2.1.2 主要设备和仪器第20页
        2.1.3 实验用主要试剂第20页
        2.1.4 细胞用试剂及其配制第20-21页
        2.1.5 分子实验用主要试剂及其配制第21-22页
    2.2 实验方法第22-26页
        2.2.1 Marc145 及 PK-15CD163细胞的复苏与传代培养第22页
        2.2.2 PRRS 病毒的增殖与纯化第22页
        2.2.3 细胞样品总 RNA 的提取第22-23页
        2.2.4 实时荧光定量 PCR 反转录(Real time RT-PCR)的方法与步骤第23页
        2.2.5 Real time PCR 检测引物及检测方法第23-24页
        2.2.6 Western blot 检测蛋白表达水平第24-26页
        2.2.7 PRRSV 感染对 Marc145 细胞中 HO-1 表达的影响第26页
        2.2.8 PRRSV 感染对 PK-15CD163细胞中 HO-1 表达的影响第26页
    2.3 实验结果第26-28页
    2.4 分析及讨论第28-29页
第三章 诱导 HO-1 表达对 PRRSV感染对 MARC145及 PK-15CD163的影响第29-42页
    3.1 材料第29-31页
        3.1.1 细胞、PRRSV 毒株及抗体第29页
        3.1.2 主要设备和仪器第29页
        3.1.3 实验用主要试剂第29页
        3.1.4 细胞用主要试剂及其配制第29-30页
        3.1.5 分子实验用主要试剂及其配制第30-31页
    3.2 实验方法第31-34页
        3.2.1 CoPP 最佳作用条件的确定第31页
        3.2.2 CoPP 对 Marc145 及 PK-15CD163细胞活性的影响第31页
        3.2.3 CoPP 对 Marc145 及 PK-15CD163细胞中 HO-1 的表达的影响第31-32页
        3.2.4 CoPP 诱导 HO-1 表达对 PRRSV 感染 Marc145 及 PK-15CD163细胞的影响第32页
        3.2.5 CoPP 诱导 HO-1 表达对不同 PRRSV 毒株感染 Marc145 细胞的影响第32-33页
        3.2.6 细胞培养上清子代病毒滴度(TCID50)测定第33页
        3.2.7 CoPP 诱导 HO-1 表达对 PRRSV/SD16/GFP 及 PRRSV/CH1a/DsRed 感染Marc145 细胞的影响第33-34页
    3.3 实验结果第34-41页
        3.3.1 HO-1 特异性诱导剂 CoPP 的作用条件的确定第34-35页
        3.3.2 CoPP 对 Marc145 及 PK-15CD163细胞的毒性作用检测第35-36页
        3.3.3 CoPP 浓度梯度依赖性诱导 Marc145 及 PK-15CD163细胞中 HO-1 的表达第36-37页
        3.3.4 CoPP 诱导 HO-1 表达抑制 PRRSV 对易感细胞系的感染第37-39页
        3.3.5 CoPP 诱导 HO-1 上调表达显著抑制不同毒株的 PRRSV 对 Marc145 细胞的感染第39-41页
    3.4 分析及讨论第41-42页
第四章 过表达 HO-1 对 PRRSV感染 MARC145 及 PK-15CD163细胞的影响第42-47页
    4.1 材料第42-43页
        4.1.1 细胞、PRRSV 毒株及抗体第42页
        4.1.2 主要设备和仪器第42页
        4.1.3 细胞用试剂及其配制第42-43页
        4.1.4 分子实验用主要试剂及其配制第43页
    4.2 实验方法第43-44页
        4.2.1 腺病毒过表达 HO-1 的条件的选择第43页
        4.2.2 腺病毒过表达 HO-1 对 PRRSV 感染 Marc145 细胞的影响第43-44页
        4.2.3 腺病毒过表达 HO-1 对 PRRSV 感染 PK-15CD163细胞的影响第44页
    4.3 实验结果第44-46页
        4.3.1 腺病毒感染条件的优化第44-45页
        4.3.2 过表达 HO-1 抑制 PRRSV 对 Marc145 细胞的感染第45-46页
        4.3.3 过表达 HO-1 抑制 PRRSV 对 PK-15CD163细胞的感染第46页
    4.4 分析及讨论第46-47页
第五章 敲低 HO-1 表达对 PRRSV感染 PK-15CD163细胞的影响第47-55页
    5.1 材料第47-48页
        5.1.1 细胞、PRRSV 毒株及抗体第47页
        5.1.2 主要设备和仪器第47页
        5.1.3 细胞用试剂及其配制第47-48页
        5.1.4 分子实验用主要试剂及其配制第48页
    5.2 实验方法第48-50页
        5.2.1 敲低基础水平 HO-1 表达对 PRRSV 感染 PK-15CD163细胞的影响第48-49页
        5.2.2 siRNA 敲低 HO-1 表达对 CoPP 诱导 HO-1 表达抑制 PRRSV 感染 PK-15CD163的影响第49-50页
        5.2.3 siRNA 敲低 HO-1 表达对腺病毒过表达 HO-1 抑制 PRRSV 感染 PK-15CD163细胞的影响第50页
    5.3 实验结果第50-54页
        5.3.1 siRNA 敲低正常 PK-15CD163细胞 HO-1 表达促进 PRRSV 对 PK-15CD163细胞的感染第50-52页
        5.3.2 敲低 HO-1 表达部分逆转了 HO-1 对 PRRSV 感染的抑制作用第52-54页
    5.4 分析及讨论第54-55页
结论第55-56页
参考文献第56-66页
缩略词第66-67页
致谢第67-68页
作者简介第68页

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