| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 前言 | 第11-29页 |
| 1 肿瘤的发生机制 | 第11-13页 |
| 1.1 细胞周期检验点与肿瘤发生的关系 | 第11-12页 |
| 1.2 细胞凋亡与肿瘤发生的关系 | 第12-13页 |
| 1.3 自噬与肿瘤发生的关系 | 第13页 |
| 2 细胞凋亡机制 | 第13-17页 |
| 2.1 细胞表面凋亡受体 Fas 介导的细胞凋亡 | 第14-15页 |
| 2.2 线粒体途径介导的细胞凋亡 | 第15-16页 |
| 2.3 细胞凋亡相关因子 | 第16-17页 |
| 3 anisomycin 的抗肿瘤作用 | 第17-18页 |
| 4 qPCR 基因芯片技术 | 第18-19页 |
| 5 细胞凋亡相关基因 | 第19-27页 |
| 5.1 CD226 | 第19-20页 |
| 5.2 CD24 | 第20页 |
| 5.3 E2F2 | 第20-21页 |
| 5.4 TNFRSF10A | 第21-22页 |
| 5.5 Endonuclease G | 第22页 |
| 5.6 AKT 家族 | 第22-23页 |
| 5.7 Caspase 家族 | 第23-24页 |
| 5.8 FADD | 第24-25页 |
| 5.9 FASLG | 第25-26页 |
| 5.10 IKBKB | 第26页 |
| 5.11 PIK3R2 | 第26-27页 |
| 6 研究思路与目的 | 第27-29页 |
| 材料与方法 | 第29-50页 |
| 1 细胞株 | 第29页 |
| 2 试剂 | 第29-31页 |
| 3 主要仪器 | 第31-32页 |
| 4 主要溶液的配制 | 第32-35页 |
| 5 细胞培养 | 第35页 |
| 6 集落的观察 | 第35页 |
| 7 Hoechst 染色 | 第35-36页 |
| 8 Annexin V / PI 双染色 | 第36页 |
| 9 PCR Array | 第36-42页 |
| 9.1 提取细胞总 RNA | 第36-37页 |
| 9.2 RNA 样品的完整性、浓度和纯度的检测 | 第37页 |
| 9.3 逆转录 | 第37-38页 |
| 9.4 PCR Array 实时定量 PCR 检测 | 第38-39页 |
| 9.5 RT-PCR | 第39-42页 |
| 9.5.1 细胞总 RNA 的提取 | 第39页 |
| 9.5.2 RT | 第39-40页 |
| 9.5.3 PCR | 第40-42页 |
| 9.6 实时定量 PCR | 第42页 |
| 10 Western Blot | 第42-44页 |
| 10.1 细胞胞浆蛋白的提取 | 第42-43页 |
| 10.2 电泳 | 第43页 |
| 10.3 转膜 | 第43页 |
| 10.4 封闭、抗体结合与显色 | 第43-44页 |
| 11 miRNA let-7c 的应用 | 第44-47页 |
| 11.1 细胞处理及转染 | 第44-45页 |
| 11.2 Annexin V/PI 双染色 | 第45页 |
| 11.3 qPCR | 第45页 |
| 11.4 Western Blot | 第45-46页 |
| 11.5 ELISA | 第46-47页 |
| 12 E2F2 siRNA 的应用 | 第47-49页 |
| 12.1 细胞处理及转染 | 第47页 |
| 12.2 Annexin V/PI 双染色 | 第47-48页 |
| 12.3 qPCR | 第48页 |
| 12.4 Western Blot | 第48-49页 |
| 12.4.1 细胞内核蛋白的提取 | 第48-49页 |
| 12.5 ELISA | 第49页 |
| 13 统计学分析 | 第49-50页 |
| 结果 | 第50-72页 |
| 1 anisomycin 抑制 Jurat T 细胞集落形成的影响 | 第50页 |
| 2 anisomycin 对 Jurkat T 细胞核边集的影响 | 第50-51页 |
| 3 anisomycin 诱导 Jurkat T 细胞凋亡 | 第51-52页 |
| 4 anisomycin 诱导 Jurkat T 细胞凋亡相关基因差异表达的筛选 | 第52-57页 |
| 5 anisomycin 诱导 Jurkat T 细胞凋亡基因差异表达的鉴定 | 第57-62页 |
| 6 miRNA let-7c 在 anisomycin 诱导 Jurkat T 细胞凋亡中的作用 | 第62页 |
| 7 miRNA let-7c 对 Jurkat T 细胞内 E2F2 的影响 | 第62-66页 |
| 7.1 miRNA let-7c 对 Jurkat T 细胞 E2F2 mRNA 水平的影响 | 第62-65页 |
| 7.2 miRNA let-7c 对 Jurkat T 细胞 E2F2 蛋白水平的影响 | 第65-66页 |
| 8 miRNA let-7c 对 Jurkat T 细胞分泌细胞因子的影响 | 第66-67页 |
| 9 E2F2 siRNA 在 anisomycin 诱导 Jurkat T 细胞凋亡中的作用 | 第67-69页 |
| 9.1 E2F2 siRNA 对 Jurkat T 细胞 E2F2 蛋白水平的影响 | 第67页 |
| 9.2 E2F2 siRNA 对 Jurkat T 细胞凋亡的影响 | 第67-69页 |
| 10 E2F2 siRNA 对 Jurkat T 细胞内 miRNA let-7c 的影响 | 第69-71页 |
| 10.1 Jurkat T 细胞中 miRNA let-7c 在基因水平的半定量变化 | 第69页 |
| 10.2 E2F2 siRNA 对 Jurkat T 细胞 miRNA let-7c mRNA 的定量影响 | 第69-71页 |
| 11 anisomycin 对 Jurkat T 细胞分泌细胞因子的影响 | 第71-72页 |
| 讨论 | 第72-78页 |
| 1 凋亡相关基因差异表达谱的分析 | 第72-74页 |
| 2 miRNA let-7c 在 anisomycin 诱导 Jurkat T 细胞凋亡中的作用 | 第74-75页 |
| 3 E2F2 在 anisomycin 诱导 Jurkat T 细胞凋亡中的作用 | 第75-76页 |
| 4 miRNA let-7c 与 E2F2 之间存在的可能关系 | 第76-78页 |
| 小结 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-86页 |
| 发表论文 | 第86-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 英文缩略词表 | 第88页 |
