| 摘要 | 第6-8页 |
| abstract | 第8-10页 |
| 文献综述 | 第14-19页 |
| 第一章 猪圆环病毒2型感染对IL-12p40表达的影响 | 第14-19页 |
| 1.1 IL-12的分子生物学特征 | 第14-15页 |
| 1.2 IL-12的生物学功能 | 第15页 |
| 1.3 IL-12在微生物感染中的作用 | 第15-16页 |
| 1.4 PCV2影响IL-12p40表达 | 第16-17页 |
| 1.4.1 PCV2的病原特征 | 第16-17页 |
| 1.4.2 PCV2对IL-12p40分泌的影响 | 第17页 |
| 1.5 病原相关分子模式在研究中的应用 | 第17-18页 |
| 1.6 研究的目的意义 | 第18-19页 |
| 试验研究 | 第19-60页 |
| 第二章 PCV突变毒株的构建 | 第19-34页 |
| 2.1 材料 | 第19-20页 |
| 2.1.1 毒株、质粒与细胞 | 第19页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第19页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第19页 |
| 2.1.4 主要试剂配制 | 第19-20页 |
| 2.2 方法 | 第20-27页 |
| 2.2.1 PCV1、PCV2突变毒株构建示意图 | 第20-22页 |
| 2.2.2 引物设计 | 第22-23页 |
| 2.2.3 PCV1-Rep2和PCV2-Rep1嵌合感染性DNA克隆的构建 | 第23-26页 |
| 2.2.4 PCV1-Cap2和PCV2-Cap1嵌合感染性DNA克隆的构建 | 第26-27页 |
| 2.2.5 PCV1-Rep2、PCV2-Rep1、PCV1-Cap2和PCV2-Cap1突变毒株的获得 | 第27页 |
| 2.2.6 PCV1-Rep2、PCV1-Cap2、PCV2-Rep1、PCV2-Cap1突变毒株的鉴定 | 第27页 |
| 2.3 结果 | 第27-32页 |
| 2.3.1 PCR扩增结果 | 第27-29页 |
| 2.3.2 酶切鉴定 | 第29-30页 |
| 2.3.3 测序鉴定 | 第30-32页 |
| 2.4 讨论 | 第32-33页 |
| 2.5 小结 | 第33-34页 |
| 第三章 PCV2感染对病原相关分子模式诱导猪肺泡巨噬细胞表达IL-12p40的影响 | 第34-60页 |
| 3.1 材料 | 第34-35页 |
| 3.1.1 细胞、质粒与毒株 | 第34页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第34页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第34-35页 |
| 3.1.4 主要试剂配制 | 第35页 |
| 3.2 方法 | 第35-43页 |
| 3.2.1 病毒扩增 | 第35页 |
| 3.2.2 猪肺泡巨噬细胞的分离 | 第35页 |
| 3.2.3 猪肺泡巨噬细胞的体外刺激 | 第35页 |
| 3.2.4 酶联免疫检测(Enzyme-linkedImmunosorbentAssay,ELISA) | 第35-36页 |
| 3.2.5 定量PCR检测 | 第36-39页 |
| 3.2.6 流式细胞术检测 | 第39-40页 |
| 3.2.7 相关信号途径的抑制 | 第40页 |
| 3.2.8 双荧光素报告基因检测 | 第40-41页 |
| 3.2.9 细胞总蛋白的提取 | 第41页 |
| 3.2.10 BCA法检测蛋白浓度 | 第41页 |
| 3.2.11 westernblotting | 第41-43页 |
| 3.2.12 染色质免疫共沉淀(ChIP)试验 | 第43页 |
| 3.2.13 数据分析 | 第43页 |
| 3.3 结果 | 第43-57页 |
| 3.3.1 PCV1和PCV2感染猪肺泡巨噬细胞中LPS/IFN-γ或LPS/R848诱导IL-12p40的表达水平 | 第43-44页 |
| 3.3.2 PCV2Cap是抑制LPS/IFN-γ或LPS/R848诱导IL-12p40表达的关键组分 | 第44-46页 |
| 3.3.3 宿主蛋白gC1qR是PCV2Cap蛋白抑制LPS/IFN-γ或LPS/R848诱导IL-12p40表达的关键互作蛋白 | 第46-48页 |
| 3.3.4 PI3K/Akt1和p38MAPK信号通路参与PCV2抑制LPS/IFN-γ诱导的IL-12p40表达 | 第48-50页 |
| 3.3.5 PCV2Cap上调PAMs中miR-23a、miR-23b、miR-29a和miR-29b的表达 | 第50-52页 |
| 3.3.6 gC1qR,Akt1和p38MAPK参与了PCV2感染PAMs中miR-23a、miR-23b、miR-29a和miR-29b的表达调控 | 第52-53页 |
| 3.3.7 miR-23a、miR-23b、miR-29a和miR-29b均可在转录后水平抑制IL-12p40表达 | 第53-55页 |
| 3.3.8 miR-23a和miR-29b在PCV2抑制IL-12p40表达中发挥关键作用 | 第55-57页 |
| 3.4 讨论 | 第57-59页 |
| 3.5 小结 | 第59-60页 |
| 全文结论与创新点 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-68页 |
| 主要缩略词和中英文对照表(AbbreviationIndex) | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 作者简介 | 第70页 |
