摘要 | 第7-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
1.引言 | 第10-21页 |
1.1 动物呼吸蛋白的研究概况 | 第10-11页 |
1.2 昆虫呼吸蛋白的研究进展 | 第11-13页 |
1.2.1 昆虫中的血蓝蛋白 | 第11-12页 |
1.2.2 昆虫中的血红蛋白 | 第12-13页 |
1.3 血蓝蛋白分子的结构及分类 | 第13-14页 |
1.4 飞蝗血蓝蛋白亚基的基因组结构特征 | 第14-15页 |
1.5 血蓝蛋白功能研究进展 | 第15-18页 |
1.5.1 血蓝蛋白的载氧功能 | 第16页 |
1.5.2 血蓝蛋白的免疫学功能 | 第16-18页 |
1.6 RNAi 技术在昆虫功能基因研究中的应用进展 | 第18-20页 |
1.6.1 昆虫 RNAi 的导入方法 | 第18-19页 |
1.6.2 RNAi 在昆虫中的应用 | 第19-20页 |
1.7 本研究的目的与意义 | 第20-21页 |
2.材料与方法 | 第21-30页 |
2.1 材料 | 第21-22页 |
2.1.1 飞蝗种群的选择与饲养 | 第21页 |
2.1.2 飞蝗卵的孵化与保存 | 第21页 |
2.1.3 主要试剂药品 | 第21-22页 |
2.1.4 主要仪器 | 第22页 |
2.2 实验方法 | 第22-30页 |
2.2.1 飞蝗卵 RNA 的提取 | 第22-23页 |
2.2.2 cDNA 的制备 | 第23-24页 |
2.2.3 PCR 扩增 | 第24页 |
2.2.4 PCR 产物的回收与纯化 | 第24-25页 |
2.2.5 质粒载体的连接转化 | 第25-26页 |
2.2.6 阳性克隆检测及测序 | 第26页 |
2.2.7 双链 RNA(dsRNA)合成 | 第26-28页 |
2.2.8 蝗卵 dsRNA 的注射 | 第28-29页 |
2.2.9 蝗卵低氧条件处理 | 第29-30页 |
2.2.10 飞蝗胚胎的观察方法 | 第30页 |
2.2.11 实时荧光定量 PCR 反应(RT-PCR) | 第30页 |
3.结果与分析 | 第30-42页 |
3.1 dsRNA 的合成与显微注射 | 第31-33页 |
3.1.1 dsRNA 的合成 | 第31页 |
3.1.2 dsRNA 的显微注射 | 第31-33页 |
3.2 胚胎 RNAi 的方法优化 | 第33-36页 |
3.2.1 RNAi 方法的选择 | 第33页 |
3.2.2 显微注射方法改进 | 第33-34页 |
3.2.3 HC1dsRNA 不同注射浓度的优化 | 第34-36页 |
3.3 飞蝗血蓝蛋白(HC1)基因的干扰情况 | 第36-38页 |
3.3.1 飞蝗卵 HC1 RNAi 的干扰效果 | 第36页 |
3.3.2 飞蝗 HC1 RNAi 的基因表达 | 第36-38页 |
3.4 飞蝗 HC1 RNAi 对其胚胎发育的影响 | 第38-42页 |
3.4.1 飞蝗胚胎发育特征描述 | 第38-39页 |
3.4.2 HC1 RNAi 使飞蝗胚胎发育变缓 | 第39-40页 |
3.4.3 HC1 RNAi 使飞蝗胚胎畸形比例增加 | 第40-41页 |
3.4.4 HC1 RNAi 使飞蝗胚胎孵化率减少 | 第41-42页 |
4.讨论 | 第42-44页 |
5.结论 | 第44页 |
6.创新点 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-51页 |
附录 | 第51-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
学术成果 | 第57页 |