| 摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5页 |
| 前言 | 第9-10页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-20页 |
| 1.1 虾青素概述 | 第10-13页 |
| 1.1.1 虾青素的功能及应用 | 第10-11页 |
| 1.1.2 虾青素的生物合成 | 第11-13页 |
| 1.2 体外基因重排系统概述 | 第13-15页 |
| 1.2.1 合成型染色体重排简介 | 第13-14页 |
| 1.2.2 体外基因重排技术 | 第14页 |
| 1.2.3 体外基因重排原理 | 第14-15页 |
| 1.3 诱变育种及全基因组重测序概述 | 第15-18页 |
| 1.3.1 诱变方法的种类 | 第15页 |
| 1.3.2 ARTP诱变育种原理 | 第15-16页 |
| 1.3.3 ARTP诱变育种的应用 | 第16页 |
| 1.3.4 全基因组重测序技术 | 第16-17页 |
| 1.3.5 全基因组重测序的应用 | 第17-18页 |
| 1.4 本研究的意义和内容 | 第18-20页 |
| 第2章 材料与方法 | 第20-38页 |
| 2.1 菌株 | 第20-22页 |
| 2.1.1 酿酒酵母 | 第20-21页 |
| 2.1.2 大肠杆菌 | 第21-22页 |
| 2.2 仪器 | 第22页 |
| 2.3 试剂及配置 | 第22-25页 |
| 2.3.1 实验试剂 | 第22-24页 |
| 2.3.2 常用试剂配制 | 第24-25页 |
| 2.4 培养基配置 | 第25-27页 |
| 2.5 基因操作方法 | 第27-35页 |
| 2.5.1 目的片段的扩增 | 第27-29页 |
| 2.5.2 PCR产物的回收 | 第29页 |
| 2.5.3 酶切与纯化 | 第29-30页 |
| 2.5.4 DNA片段的连接 | 第30-31页 |
| 2.5.5 大肠杆菌转化 | 第31页 |
| 2.5.6 转化子的筛选 | 第31-32页 |
| 2.5.7 大肠质粒提取 | 第32-33页 |
| 2.5.8 酿酒酵母转化 | 第33-34页 |
| 2.5.9 酿酒酵母菌落PCR验证 | 第34-35页 |
| 2.5.10 酿酒酵母基因组提取 | 第35页 |
| 2.6 体外基因重排反应体系 | 第35-36页 |
| 2.7 发酵培养与产物提取 | 第36-38页 |
| 2.7.1 摇瓶发酵 | 第36页 |
| 2.7.2 虾青素提取 | 第36页 |
| 2.7.3 产物检测 | 第36-38页 |
| 第3章 羟化酶和酮化酶的底物偏好性 | 第38-46页 |
| 3.1 引言 | 第38-39页 |
| 3.2 不同来源羟化酶和酮化酶共表达酿酒酵母菌株的发酵 | 第39-40页 |
| 3.3 羟化酶和酮化酶单表达盒的构建 | 第40-42页 |
| 3.3.1 crtW和crtZ大肠杆菌基因表达盒的构建 | 第40-41页 |
| 3.3.2 crtW和crtZ单表达酵母菌株的构建 | 第41-42页 |
| 3.4 含羟化酶或酮化酶酿酒酵母菌株的发酵 | 第42-43页 |
| 3.5 小结 | 第43-46页 |
| 第4章 体外基因重排提高虾青素产量 | 第46-56页 |
| 4.1 引言 | 第46页 |
| 4.2 体外SCRaMbLE基因大片段的获取 | 第46-49页 |
| 4.2.1 供体质粒和受体质粒 | 第46-48页 |
| 4.2.2 目的基因与供体质粒的连接 | 第48页 |
| 4.2.3 基因大片段的获取 | 第48-49页 |
| 4.3 体外SCRaMbLE重组质粒酵母菌株的构建 | 第49-52页 |
| 4.3.1 底盘菌株的构建 | 第49-50页 |
| 4.3.2 SCRaMbLE质粒的构建 | 第50-52页 |
| 4.4 体外SCRaMbLE重组质粒酵母菌株的发酵 | 第52-54页 |
| 4.5 小结 | 第54-56页 |
| 第5章 常压室温等离子体诱变提高虾青素产量 | 第56-78页 |
| 5.1 引言 | 第56页 |
| 5.2 常压室温等离子体诱变 | 第56-60页 |
| 5.2.1 ARTP诱变条件的确定 | 第56-57页 |
| 5.2.2 高产虾青素突变株的筛选 | 第57-59页 |
| 5.2.3 高产虾青素突变株的遗传稳定性 | 第59-60页 |
| 5.3 突变株基因组重测序 | 第60-76页 |
| 5.3.1 基因变异的基本信息 | 第60-63页 |
| 5.3.2 结构变异分析 | 第63-68页 |
| 5.3.3 KEGG通路分析 | 第68-70页 |
| 5.3.4 编码区SNP变异分析 | 第70-73页 |
| 5.3.5 编码区InDel变异分析 | 第73-76页 |
| 5.4 小结 | 第76-78页 |
| 第6章 结论与展望 | 第78-80页 |
| 6.1 结论 | 第78-79页 |
| 6.2 展望 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-88页 |
| 附录 | 第88-94页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第94-96页 |
| 致谢 | 第96-97页 |
