| 摘要 | 第6-8页 |
| abstract | 第8-11页 |
| 文献综述 | 第16-34页 |
| 第一章 脂肪组织及其脂肪细胞、基因调控研究进展 | 第16-34页 |
| 1.1 绵羊脂尾及其分类 | 第16页 |
| 1.2 动物脂肪组织及脂肪细胞研究进展 | 第16-26页 |
| 1.2.1 脂肪组织结构、功能及类型 | 第16-17页 |
| 1.2.2 白色和棕色脂肪组织发育 | 第17-18页 |
| 1.2.3 脂肪细胞发生及其分化 | 第18-19页 |
| 1.2.4 脂肪细胞分化的调控基因及信号通路 | 第19-26页 |
| 1.3 动物脂肪研究与高通量测序技术 | 第26-28页 |
| 1.3.1 转录组测序技术及其发展 | 第26-27页 |
| 1.3.2 高通量测序技术在绵羊尾脂沉积研究中的应用进展 | 第27-28页 |
| 1.4 动物脂肪形成与维生素A代谢 | 第28-31页 |
| 1.4.1 动物脂肪组织中维生素A代谢过程 | 第28-30页 |
| 1.4.2 ALDH1As和CYP26s对动物脂肪及发育的调控 | 第30-31页 |
| 1.5 CRISPR/Cas9基因编辑技术在绵羊和山羊中的应用研究 | 第31-32页 |
| 1.6 本研究的目的与意义 | 第32-34页 |
| 试验研究 | 第34-112页 |
| 第二章 脂尾型和瘦尾型绵羊不同部位脂肪组织形态学和脂肪酸组成差异分析 | 第34-44页 |
| 2.1 材料与方法 | 第34-36页 |
| 2.1.1 试验试剂和仪器设备 | 第34页 |
| 2.1.2 试验动物及脂肪样品采集 | 第34-35页 |
| 2.1.3 脂肪细胞体积测定 | 第35页 |
| 2.1.4 脂肪酸组成测定 | 第35页 |
| 2.1.5 脂肪酸相关基因表达变化 | 第35-36页 |
| 2.2 结果与分析 | 第36-41页 |
| 2.2.1 滩羊和藏羊尾部表型差异 | 第36-37页 |
| 2.2.2 不同部位脂肪细胞形态学差异比较 | 第37-38页 |
| 2.2.3 不同部位脂肪组织中脂肪酸组成差异分析 | 第38-40页 |
| 2.2.4 脂肪酸相关基因表达变化 | 第40-41页 |
| 2.3 讨论 | 第41-42页 |
| 2.3.1 尾部发育水平与尾脂沉积 | 第41页 |
| 2.3.2 脂肪酸沉积与基因表达 | 第41-42页 |
| 2.4 小结 | 第42-44页 |
| 第三章 脂尾型和瘦尾型绵羊不同部位脂肪组织转录组差异研究 | 第44-82页 |
| 3.1 材料与方法 | 第44-48页 |
| 3.1.1 试验动物及脂肪采集 | 第44页 |
| 3.1.2 仪器设备及试验耗材 | 第44页 |
| 3.1.3 总RNA提取和质量检测 | 第44-45页 |
| 3.1.4 文库准备和测序 | 第45页 |
| 3.1.5 生物信息分析流程 | 第45-47页 |
| 3.1.6 q-RCR验证测序数据 | 第47-48页 |
| 3.2 结果与分析 | 第48-70页 |
| 3.2.1 总RNA样品质量检测 | 第48-49页 |
| 3.2.2 测序数据质量评估 | 第49-51页 |
| 3.2.3 Reads在参考基因组上的分布 | 第51页 |
| 3.2.4 基因整体表达水平统计 | 第51-52页 |
| 3.2.5 RNA-Seq相关性分析 | 第52-53页 |
| 3.2.6 不同部位脂肪组织间DEGs分析 | 第53-57页 |
| 3.2.7 q-PCR与测序数据之间的相关性分析 | 第57-58页 |
| 3.2.8 DEGs的GO功能注释 | 第58-60页 |
| 3.2.9 DEGs的KEGG通路分析 | 第60-62页 |
| 3.2.10 DEGs表达模式聚类 | 第62-67页 |
| 3.2.11 影响脂肪分布和沉积的DEGs筛选 | 第67-70页 |
| 3.3 讨论 | 第70-80页 |
| 3.3.1 脂尾型与瘦尾型绵羊选择 | 第70页 |
| 3.3.2 RNA-Seq数据及结果的可靠性 | 第70-71页 |
| 3.3.3 HOX发育基因与脂肪调控 | 第71-72页 |
| 3.3.4 脂肪酸调控基因及信号通路 | 第72-76页 |
| 3.3.5 脂肪分布与沉积候选基因筛选 | 第76-77页 |
| 3.3.6 细胞因子互作与脂肪组织内环境 | 第77-80页 |
| 3.4 小结 | 第80-82页 |
| 第四章 ALDH1AS在绵羊不同组织及脂肪细胞分化中的表达研究 | 第82-94页 |
| 4.1 材料与方法 | 第82-84页 |
| 4.1.1 试验材料 | 第82-83页 |
| 4.1.2 试验方法 | 第83-84页 |
| 4.2 结果与分析 | 第84-91页 |
| 4.2.1 ALDH1A1、ALDH1A2和ALDH1A3组织表达谱 | 第84-86页 |
| 4.2.2 原代前体脂肪细胞增殖过程中的形态变化 | 第86页 |
| 4.2.3 传代前体脂肪细胞生长活力 | 第86-87页 |
| 4.2.4 绵羊前脂肪细胞诱导分化及油红O鉴定 | 第87页 |
| 4.2.5 前脂肪细胞因子Pref-1/DLK1的时序表达及免疫荧光鉴定 | 第87-88页 |
| 4.2.6 ALDH1As在绵羊尾部前体脂肪细胞中的免疫荧光定位 | 第88-89页 |
| 4.2.7 绵羊尾部前体脂肪细胞分化过程中ALDH1As的表达规律 | 第89-90页 |
| 4.2.8 绵羊尾部前体脂肪细胞分化过程中CYP26s的表达变化 | 第90-91页 |
| 4.3 讨论 | 第91-93页 |
| 4.4 小结 | 第93-94页 |
| 第五章 ALDH1A1基因敲除对绵羊尾部前体脂肪细胞分化的影响 | 第94-112页 |
| 5.1 材料与方法 | 第94-100页 |
| 5.1.1 试验材料 | 第94页 |
| 5.1.2 试验方法 | 第94-100页 |
| 5.2 结果与分析 | 第100-109页 |
| 5.2.1 ALDH1A1敲除细胞模型构建 | 第100页 |
| 5.2.2 T7E1检测阳性细胞敲除效率 | 第100-101页 |
| 5.2.3 不同sgRNA所导致的突变类型 | 第101-103页 |
| 5.2.4 ALDH1A1缺陷型单克隆细胞筛选及基因型确定 | 第103-104页 |
| 5.2.5 ALDH1A1-/-细胞中ALDH1A1敲除效果 | 第104-105页 |
| 5.2.6 WT和ALDH1A1-/-细胞中脂肪相关基因表达变化 | 第105-106页 |
| 5.2.8 ALDH1A1敲除对发育相关基因表达的影响 | 第106页 |
| 5.2.9 ALDH1A1在脂肪细胞分化过程中的功能研究 | 第106-109页 |
| 5.3 讨论 | 第109-111页 |
| 5.3.1 阳性细胞选择 | 第109-110页 |
| 5.3.2 ALDH1家族3个亚型在脂肪细胞中的功能关系 | 第110页 |
| 5.3.3 ALDH1A1表达影响HOX发育基因 | 第110页 |
| 5.3.4 ALDH1A1对脂肪细胞分化的调控作用 | 第110-111页 |
| 5.4 小结 | 第111-112页 |
| 结论 | 第112-113页 |
| 创新点 | 第113-114页 |
| 还需进一步研究的内容 | 第114-115页 |
| 参考文献 | 第115-128页 |
| 附录 | 第128-151页 |
| 缩略词(ABBREVIATION) | 第151-153页 |
| 致谢 | 第153-154页 |
| 作者简介 | 第154页 |
