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陕北白绒山羊次级毛囊周期循环关键基因的筛选及LHX2与miR-144的功能验证

摘要第6-8页
ABSTRACT第8-10页
文献综述第14-26页
    第一章 绒山羊毛囊结构及毛囊周期循环研究进展第14-26页
        1.1 绒山羊毛囊结构第14-16页
        1.2 毛囊发生与毛囊周期第16-22页
            1.2.1 毛囊发生第16-18页
            1.2.2 毛囊周期循环第18-22页
        1.3 LHX2在毛囊周期循环中的功能研究第22页
        1.4 非编码基因在毛囊周期循环中功能研究第22-23页
        1.5 毛囊研究技术及方法进展第23-24页
            1.5.1 毛囊细胞分离培养第23页
            1.5.2 高通量测序技术在毛囊研究中的应用进展第23-24页
            1.5.3 Crispr/Cas9技术在毛囊周期循环研究中的应用第24页
        1.6 研究目的与意义第24-26页
试验研究第26-84页
    第二章 陕北白绒山羊次级毛囊在皮肤中的长度及其毛球部宽度变化规律研究第26-32页
        2.1 材料方法第26-27页
            2.1.1 主要试剂与仪器第26页
            2.1.2 试验动物皮肤组织采集第26页
            2.1.3 皮肤切片制作与染色第26-27页
        2.2 结果与分析第27-30页
            2.2.1 SHF毛球部全年形态变化规律第27-28页
            2.2.2 全年不同月份SHF长度及其毛球部宽度分析第28-29页
            2.2.3 不同月份SHF毛囊活性观察第29-30页
        2.3 讨论第30-31页
            2.3.1 不同品种绒山羊毛囊循环周期差异性第30页
            2.3.2 SACPIC染色法判断毛囊周期的可靠性第30-31页
        2.4 小结第31-32页
    第三章 陕北白绒山羊次级毛囊生长期、退行期和休止期差异mi RNAs和m RNAs的联合分析第32-42页
        3.1 材料与方法第32-33页
            3.1.1 试验样品与数据来源第32页
            3.1.2 m RNA和mi RNA分析方案第32-33页
        3.2 结果与分析第33-39页
            3.2.1 生长期、退行期和休止期差异mi RNA和m RNA分析第33-34页
            3.2.2 mi RNA靶基因的GO分析第34-35页
            3.2.3 mi RNA靶基因的KEGG分析第35-36页
            3.2.4 影响毛发生长的重要信号通路基因第36-37页
            3.2.5 差异的mi RNA与m RNA网络调控关系构建第37-38页
            3.2.6 候选mi RNAs网络调控图谱第38-39页
        3.3 讨论第39-41页
            3.3.1 mi RNA-m RNA联合分析的可靠性第39-40页
            3.3.2 皮肤中脂肪细胞与SHF周期循环的关系第40页
            3.3.3 候选mi RNAs和m RNAs的选取第40-41页
        3.4 小结第41-42页
    第四章 陕北白绒山羊SHF生长期和退行期皮肤全转录组研究第42-68页
        4.1 材料与方法第42-46页
            4.1.1 试验动物及样品采集第42页
            4.1.2 总RNA提取与鉴定第42-43页
            4.1.3 文库制备及测序第43页
            4.1.4 测序数据质控和注释第43-44页
            4.1.5 非编码基因(nc RNA)的靶基因预测第44-45页
            4.1.6 lnc RNA和mi RNA的靶基因整合第45页
            4.1.7 靶基因GO和KEGG分析第45页
            4.1.8 实时定量PCR验证RNA-seq数据的可靠性第45-46页
        4.2 结果与分析第46-64页
            4.2.1 皮肤样品总RNA质量检测第46-48页
            4.2.2 测序数据的质量评估及其与基因组比对情况第48-52页
            4.2.3 新基因预测及差异基因筛选第52-55页
            4.2.4 靶基因GO和KEGG分析第55-58页
            4.2.5 lnc RNA-mi RNA-m RNA网络图谱绘制第58-63页
            4.2.6 实时定量PCR验证RNA-seq数据第63-64页
        4.3 讨论第64-66页
            4.3.1 全转录组必要性第64-65页
            4.3.2 皮肤微环境对SHF退行的影响第65页
            4.3.3 非编码基因对SHF退行的调控第65-66页
        4.4 小结第66-68页
    第五章 LHX2与MIR-144 的关系研究及其在SDP中的功能验证第68-84页
        5.1 试验材料与方法第68-73页
            5.1.1 试验材料第68页
            5.1.2 主要试剂与仪器第68-69页
            5.1.3 SHF的DP分离培养第69页
            5.1.4 免疫印迹及免疫荧光第69-70页
            5.1.5 感受态细胞制备及其转化第70页
            5.1.6 靶基因与靶位点的验证第70页
            5.1.7 mi R-144 腺病毒包装第70-71页
            5.1.8 DP细胞中Lhx2基因敲除第71页
            5.1.9 DNA/RNA提取第71页
            5.1.10 q PCR、PCR和T7E1酶切分析第71-73页
        5.2 结果与分析第73-82页
            5.2.1 DP细胞分离培养及鉴定第73-75页
            5.2.2 LHX2与mi R1443p组织表达谱分析第75页
            5.2.3 mi R1443p与LHX2靶向关系分析第75-76页
            5.2.4 Ad-mi R-144 腺病毒包装效果分析第76-77页
            5.2.5 Ad-mi R-144 感染DPs分析第77-79页
            5.2.6 LHX2基因缺陷型DP细胞模型构建及LHX2突变类型分析第79-80页
            5.2.7 LHX2敲除对SHF相关基因表达的影响第80-81页
            5.2.8 LHX2-/-细胞株中mi R-144 与LHX2的互作第81-82页
        5.3 讨论第82-83页
            5.3.1 SDP细胞的分离培养第82页
            5.3.2 LHX2与mi R1443p在组织中的时空表达特性第82页
            5.3.3 LHX2与mi R1443p在DP细胞中的作用第82-83页
        5.4 小结第83-84页
结论第84-85页
创新点第85-86页
还需进一步深入研究的问题第86-87页
参考文献第87-97页
附录第97-149页
缩略词表第149-150页
致谢第150-151页
作者简介第151-153页

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