中文摘要 | 第10-12页 |
Abstract | 第12-13页 |
1 前言 | 第14-33页 |
1.1 卵母细胞成熟 | 第15-21页 |
1.1.1 核成熟 | 第15-16页 |
1.1.2 胞质成熟 | 第16-21页 |
1.2 卵丘细胞和卵母细胞的葡萄糖代谢 | 第21-27页 |
1.2.1 COCs与DOs的比较 | 第21-22页 |
1.2.2 葡萄糖浓度对卵母细胞成熟和发育能力的影响 | 第22-23页 |
1.2.3 卵母细胞分泌因子及其对葡萄糖代谢的影响 | 第23页 |
1.2.4 葡萄糖代谢途径及其对卵母细胞成熟的作用 | 第23-27页 |
1.3 线粒体丙酮酸载体和线粒体呼吸链及其对卵母细胞的作用 | 第27-29页 |
1.3.1 线粒体丙酮酸载体 | 第27-29页 |
1.3.2 线粒体呼吸链 | 第29页 |
1.4 siRNA | 第29-32页 |
1.4.1 siRNA的概念 | 第29页 |
1.4.2 RISC组装 | 第29-30页 |
1.4.3 siRNA介导的转录后沉默 | 第30页 |
1.4.4 siRNA扩增 | 第30-31页 |
1.4.5 siRNA沉默小鼠糖代谢途径相关基因的研究进展 | 第31-32页 |
1.5 本文的主要研究内容 | 第32-33页 |
2 材料与方法 | 第33-42页 |
2.1 主要试剂及配制 | 第33-35页 |
2.2 实验动物 | 第35-36页 |
2.3 小鼠COCs的收集和DOs制备 | 第36页 |
2.4 DOs单独培养 | 第36页 |
2.5 siRNA显微注射及注射后DOs的抑制和成熟培养 | 第36-37页 |
2.6 卵丘细胞单层的制备和siRNA转染 | 第37页 |
2.7 DOs与卵丘细胞单层共培养 | 第37-38页 |
2.8 卵母细胞孤雌激活 | 第38页 |
2.9 胚胎培养 | 第38页 |
2.10 蛋白质电泳 | 第38-39页 |
2.11 卵母细胞内GSH、ROS、ATP和NADPH的检测 | 第39-41页 |
2.12 数据分析 | 第41-42页 |
3 结果 | 第42-60页 |
3.1 CCM通过代谢葡萄糖促进小鼠卵母细胞核成熟 | 第42页 |
3.2 抑制剂作用CCM中G6PD或GAPDH对共培养小鼠DOs核成熟的影响 | 第42-45页 |
3.3 siRNA下调卵丘细胞中G6PD或GAPDH的表达对共培养DOs成熟的影响 | 第45-54页 |
3.4 抑制剂作用MPC或线粒体呼吸链对小鼠卵母细胞核成熟的影响 | 第54-56页 |
3.5 siRNA下调DOs中MPC1或NDUFV1的表达对核成熟的影响 | 第56-58页 |
3.6 抑制剂作用LDH对小鼠卵母细胞核成熟的影响 | 第58-60页 |
4 讨论 | 第60-65页 |
4.1 小鼠卵母细胞成熟培养系统的建立 | 第60-61页 |
4.2 糖代谢途径与卵母细胞核成熟 | 第61-62页 |
4.3 卵丘细胞中PPP和糖酵解途径与卵母细胞胞质成熟 | 第62-63页 |
4.4 DOs成熟过程中利用葡萄糖、乳酸及丙酮酸的能力 | 第63-65页 |
5 结论 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-84页 |
致谢 | 第84-85页 |
攻读期间论文发表情况 | 第85页 |