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拟南芥CRY2调控光形态建成的分子遗传学与生化分析

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-9页
英文缩写词第10-14页
第1章 绪论第14-39页
    1.1 隐花色素第14-26页
        1.1.1 隐花色素及光裂解酶家族第14页
        1.1.2 拟南芥隐花色素的主要功能第14-17页
            1.1.2.1 对光周期控制的开花时间的调节第15页
            1.1.2.2 抑制下胚轴的伸长第15-16页
            1.1.2.3 对生物钟的调控作用第16-17页
        1.1.3 拟南芥隐花色素的结构第17-20页
        1.1.4 隐花色素的作用机理第20-26页
            1.1.4.1 隐花色素的光激活第20-21页
            1.1.4.2 隐花色素的光生物化学活性第21-23页
            1.1.4.3 隐花色素的信号转导第23-26页
    1.2 植物线粒体 NADH 脱氢酶复合体的碳酸酐酶亚复合体第26-34页
        1.2.1 植物线粒体的呼吸链第26-27页
        1.2.2 碳酸酐酶第27页
        1.2.3 植物中复合物 I 的γCA 亚基第27-34页
            1.2.3.1 植物中γCA 亚基的发现第27-28页
            1.2.3.2 CAγ亚基的亚细胞定位第28-29页
            1.2.3.3 拟南芥γCA 突变体的特征分析第29-30页
            1.2.3.4 γCA 亚基的活性第30-31页
            1.2.3.5 植物线粒体γCAs 的功能推测第31-34页
    1.3 光敏色素信号传递与植物其它信号传递间的相互关系第34-37页
    1.4 本论文的工作设想第37-39页
第2章 隐花素蓝光受体 CRY2 相互作用蛋白的研究第39-77页
    2.1 实验材料与方法第40-46页
        2.1.1 实验材料第40页
            2.1.1.1 质粒载体第40页
            2.1.1.2 植物材料第40页
            2.1.1.3 试剂第40页
        2.1.2 实验方法第40-46页
            2.1.2.1 植物的生长条件第40页
            2.1.2.2 开花时间的统计第40-41页
            2.1.2.3 植物胚胎的透明观察第41页
            2.1.2.4 RNA 的提取及反转录第41-42页
            2.1.2.5 定量 PCR第42页
            2.1.2.6 GST 融合蛋白的表达与纯化第42-43页
            2.1.2.7 原生质体的提取第43页
            2.1.2.8 酵母双杂交及β-半乳糖苷酶实验第43-45页
            2.1.2.9 免疫共沉淀(Co-IP)实验第45页
            2.1.2.10 拟南芥 AvrPto 的瞬时转化第45-46页
    2.2 实验结果分析第46-77页
        2.2.1 线粒体复合体 I 的γ碳酸酐酶亚复合体的亚基γCAL 在拟南芥光形态建成中的作用第46-67页
            2.2.1.1 γCAL1 与γCAL2 是线粒体蛋白第47-49页
            2.2.1.2 γCAL1 与γCAL2 的功能是冗余的第49-56页
            2.2.1.3 降低γCAL1 和γCAL2 的表达量会改变植物的光反应第56-63页
            2.2.1.4 讨论第63-67页
        2.2.2 蓝光特异的 CRY2-相互作用蛋白 CIU1 的生物化学研究第67-77页
            2.2.2.1 CIU1 的 N 端与 UFD1 家族蛋白高度同源第69页
            2.2.2.2 CIU1 与 CRY2 的互作是蓝光特异的第69-72页
            2.2.2.3 CIU1 的过表达植物推迟开花第72-74页
            2.2.2.4 CIU1 定位在细胞核内第74-75页
            2.2.2.5 讨论第75-77页
第3章 隐花色素 CRY2 蓝光依赖型降解机制的生物化学分析第77-96页
    3.1 实验材料与方法第77-78页
        3.1.1 实验材料第77-78页
            3.1.1.1 植物材料第77页
            3.1.1.2 试剂第77-78页
        3.1.2 实验方法第78页
            3.1.2.1 植物的生长条件第78页
            3.1.2.2 蛋白免疫印迹第78页
    3.2 实验结果分析第78-93页
        3.2.1 隐花色素 CRY2 在蓝光下降解的动力学第78-85页
            3.2.1.1 野生型体内 CRY2 在蓝光下的降解第78-79页
            3.2.1.2 CRY2 色氨酸三联体突变体在蓝光下的降解第79-82页
            3.2.1.3 其它光信号传递分子对蓝光依赖型 CRY2 降解的影响第82-85页
        3.2.2 隐花色素 CRY2 在蓝光下降解机制的初步研究结果第85-91页
            3.2.2.1 CRY2 的多泛素化链是通过泛素赖氨酸残基 48 (lys48) 形成的第86-88页
            3.2.2.2 CRY2 的降解依赖于 Cullin E3 连接酶第88-91页
        3.2.3 负责降解 CRY2 的 E3 泛素连接酶的筛选第91-93页
    3.3 讨论第93-96页
结论第96-98页
参考文献第98-110页
附录 A 攻读学位期间所发表的学术论文目录第110-111页
致谢第111页

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