摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-21页 |
·引言 | 第11-12页 |
·抗性机理 | 第12-14页 |
·代谢抗性 | 第12-13页 |
·靶标抗性 | 第13-14页 |
·差异表达基因克隆技术 | 第14-18页 |
·差减杂交(Substractive hybridization) | 第14页 |
·mRNA差异显示(mRNA differential displayreverse transcription PCR,DDRT-PCR)技术 | 第14页 |
·代表性差异分析(Representative differential analysis,RDA) | 第14-15页 |
·扩增的片段长度多态性(Amplified fragment length polymorphisms,AFLP)技术 | 第15页 |
·基因表达系列分析(Serial analysis of geneexp ression,SAGE)技术 | 第15-16页 |
·cDNA阵列杂交(Hybridization analysis of arrayed cDNA library)技术 | 第16页 |
·表达序列标签(Expressed sequence tag,EST)法 | 第16页 |
·抑制性差减杂交(Suppression subtractive hybridization,SSH)技术 | 第16-18页 |
·淡色库蚊抗药性基因研究进展 | 第18-19页 |
·丝氨酸蛋白酶家族的研究 | 第18页 |
·视蛋白基因的研究 | 第18-19页 |
·肌球蛋白轻链2基因的研究 | 第19页 |
·糖原分支酶基因的研究 | 第19页 |
·蚊核糖体蛋白基因的研究 | 第19页 |
·淡色库蚊β-actin的克隆与序列分析 | 第19页 |
·乙酰胆碱酯酶基因的研究 | 第19页 |
·细胞色素P450家族的研究 | 第19页 |
·研究内容和意义 | 第19-21页 |
第二章 淡色库蚊与致倦库蚊抗性相关EST片段同源性分析 | 第21-33页 |
·材料 | 第22页 |
·实验蚊 | 第22页 |
·试剂和酶 | 第22页 |
·仪器设备 | 第22页 |
·方法 | 第22-26页 |
·引物设计 | 第22-23页 |
·淡色库蚊总RNA提取 | 第23-24页 |
·cDNA第一链的合成 | 第24页 |
·PCR反应 | 第24页 |
·PCR产物的纯化 | 第24-25页 |
·T/A克隆 | 第25页 |
·转化反应 | 第25页 |
·阳性克隆测序 | 第25页 |
·序列比对 | 第25-26页 |
·结果 | 第26-31页 |
·淡色库蚊总RNA提取及检测 | 第26页 |
·淡色库蚊氯菊酯抗性相关EST序列的扩增 | 第26-27页 |
·序列比对 | 第27-31页 |
·讨论 | 第31-33页 |
第三章 淡色库蚊氯菊酯抗性相关基因XND-P450全长CDNA克隆与生物信息学分析 | 第33-50页 |
·材料 | 第33-34页 |
·实验蚊 | 第33-34页 |
·试剂和酶 | 第34页 |
·仪器设备 | 第34页 |
·方法 | 第34-37页 |
·淡色库蚊总RNA提取 | 第34页 |
·RACE克隆全长基因 | 第34-36页 |
·RACE产物纯化 | 第36-37页 |
·T/A克隆 | 第37页 |
·转化反应 | 第37页 |
·阳性克隆测序 | 第37页 |
·基因序列分析 | 第37页 |
·结果 | 第37-47页 |
·总RNA的提取 | 第37-38页 |
·RACE扩增全长基因 | 第38页 |
·淡色库蚊CYP450基因序列分析 | 第38-47页 |
·讨论 | 第47-50页 |
第四章 XND-P450基因在抗性和敏感型淡色库蚊中表达水平分析 | 第50-57页 |
·材料 | 第50页 |
·实验蚊 | 第50页 |
·试剂和酶 | 第50页 |
·仪器设备 | 第50页 |
·方法 | 第50-51页 |
·引物设计 | 第50页 |
·基因组DNA提取及XND-P450在基因组中的扩增 | 第50-51页 |
·RNA提取及cDNA第一链的合成 | 第51页 |
·RT-PCR循环数的确定 | 第51页 |
·结果 | 第51-54页 |
·基因组DNA提取及XND-P450在基因组中的扩增 | 第51-52页 |
·RNA提取结果 | 第52页 |
·XND-P450和β-ACTIN基因的扩增 | 第52-53页 |
·半定量RT-PCR循环数的确定 | 第53-54页 |
·XND-P450基因在抗性蚊和敏感型蚊中的半定量RT-PCR结果 | 第54页 |
·讨论 | 第54-57页 |
第五章 结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-65页 |
致谢 | 第65-66页 |
作者简介 | 第66页 |