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淡色库蚊氯菊酯抗性相关基因XND-P450全长cDNA克隆及序列分析

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-11页
第一章 文献综述第11-21页
   ·引言第11-12页
   ·抗性机理第12-14页
     ·代谢抗性第12-13页
     ·靶标抗性第13-14页
   ·差异表达基因克隆技术第14-18页
     ·差减杂交(Substractive hybridization)第14页
     ·mRNA差异显示(mRNA differential displayreverse transcription PCR,DDRT-PCR)技术第14页
     ·代表性差异分析(Representative differential analysis,RDA)第14-15页
     ·扩增的片段长度多态性(Amplified fragment length polymorphisms,AFLP)技术第15页
     ·基因表达系列分析(Serial analysis of geneexp ression,SAGE)技术第15-16页
     ·cDNA阵列杂交(Hybridization analysis of arrayed cDNA library)技术第16页
     ·表达序列标签(Expressed sequence tag,EST)法第16页
     ·抑制性差减杂交(Suppression subtractive hybridization,SSH)技术第16-18页
   ·淡色库蚊抗药性基因研究进展第18-19页
     ·丝氨酸蛋白酶家族的研究第18页
     ·视蛋白基因的研究第18-19页
     ·肌球蛋白轻链2基因的研究第19页
     ·糖原分支酶基因的研究第19页
     ·蚊核糖体蛋白基因的研究第19页
     ·淡色库蚊β-actin的克隆与序列分析第19页
     ·乙酰胆碱酯酶基因的研究第19页
     ·细胞色素P450家族的研究第19页
   ·研究内容和意义第19-21页
第二章 淡色库蚊与致倦库蚊抗性相关EST片段同源性分析第21-33页
   ·材料第22页
     ·实验蚊第22页
     ·试剂和酶第22页
     ·仪器设备第22页
   ·方法第22-26页
     ·引物设计第22-23页
     ·淡色库蚊总RNA提取第23-24页
     ·cDNA第一链的合成第24页
     ·PCR反应第24页
     ·PCR产物的纯化第24-25页
     ·T/A克隆第25页
     ·转化反应第25页
     ·阳性克隆测序第25页
     ·序列比对第25-26页
   ·结果第26-31页
     ·淡色库蚊总RNA提取及检测第26页
     ·淡色库蚊氯菊酯抗性相关EST序列的扩增第26-27页
     ·序列比对第27-31页
   ·讨论第31-33页
第三章 淡色库蚊氯菊酯抗性相关基因XND-P450全长CDNA克隆与生物信息学分析第33-50页
   ·材料第33-34页
     ·实验蚊第33-34页
     ·试剂和酶第34页
     ·仪器设备第34页
   ·方法第34-37页
     ·淡色库蚊总RNA提取第34页
     ·RACE克隆全长基因第34-36页
     ·RACE产物纯化第36-37页
     ·T/A克隆第37页
     ·转化反应第37页
     ·阳性克隆测序第37页
     ·基因序列分析第37页
   ·结果第37-47页
     ·总RNA的提取第37-38页
     ·RACE扩增全长基因第38页
     ·淡色库蚊CYP450基因序列分析第38-47页
   ·讨论第47-50页
第四章 XND-P450基因在抗性和敏感型淡色库蚊中表达水平分析第50-57页
   ·材料第50页
     ·实验蚊第50页
     ·试剂和酶第50页
     ·仪器设备第50页
   ·方法第50-51页
     ·引物设计第50页
     ·基因组DNA提取及XND-P450在基因组中的扩增第50-51页
     ·RNA提取及cDNA第一链的合成第51页
     ·RT-PCR循环数的确定第51页
   ·结果第51-54页
     ·基因组DNA提取及XND-P450在基因组中的扩增第51-52页
     ·RNA提取结果第52页
     ·XND-P450和β-ACTIN基因的扩增第52-53页
     ·半定量RT-PCR循环数的确定第53-54页
     ·XND-P450基因在抗性蚊和敏感型蚊中的半定量RT-PCR结果第54页
   ·讨论第54-57页
第五章 结论第57-58页
参考文献第58-65页
致谢第65-66页
作者简介第66页

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