| 致谢 | 第4-5页 |
| 摘要 | 第5-8页 |
| 第一部分 文献综述 | 第8-18页 |
| 1 口蹄疫概述 | 第8页 |
| 1.1 口蹄疫简介 | 第8页 |
| 1.2 FMD的流行情况 | 第8页 |
| 2 FMDV的分子生物学特性 | 第8-11页 |
| 2.1 FMDV病原学特征 | 第9页 |
| 2.2 FMDV基因组特征 | 第9页 |
| 2.3 FMDV结构蛋白和功能 | 第9页 |
| 2.4 FMDV VP1的意义 | 第9-10页 |
| 2.5 FMDV非结构蛋白及其功能 | 第10-11页 |
| 2.6 FMDV的感染机制 | 第11页 |
| 3 FMD诊断技术研究进展 | 第11-18页 |
| 3.1 FMDV分离鉴定 | 第12页 |
| 3.2 血清学检测技术 | 第12-13页 |
| 3.3 分子生物学检测技术 | 第13-14页 |
| 3.4 ELISA在FMD中的应用 | 第14-18页 |
| 第二部分 A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1原核表达 | 第18-34页 |
| 1 引言 | 第18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-25页 |
| 2.1 菌株、血清 | 第18页 |
| 2.2 主要试剂 | 第18-19页 |
| 2.3 主要仪器和设备 | 第19页 |
| 2.4 主要试剂的配制 | 第19-21页 |
| 2.5 重组表达载体的构建与建立 | 第21-23页 |
| 2.6 诱导表达 | 第23-24页 |
| 2.7 可溶性分析 | 第24页 |
| 2.8 重组A-VP1蛋白的纯化 | 第24-25页 |
| 2.9 ELISA检测纯化A-VP1蛋白的活性 | 第25页 |
| 3 结果与分析 | 第25-32页 |
| 3.1 A-vp1基因的PCR扩增结果 | 第25-26页 |
| 3.2 重组质粒的构建与鉴定结果 | 第26-27页 |
| 3.3 表达产物SDS-PAGE鉴定 | 第27页 |
| 3.4 表达产物Western-Blot鉴定 | 第27-28页 |
| 3.5 重组蛋白的诱导表达优化结果 | 第28-29页 |
| 3.6 重组蛋白的可溶性分析结果 | 第29-31页 |
| 3.7 重组蛋白的纯化及复性结果 | 第31页 |
| 3.8 ELISA检测复性蛋白的活性 | 第31-32页 |
| 4 讨论 | 第32-34页 |
| 第三部分 A型口蹄疫病毒VP1蛋白间接ELISA检测试剂盒的开发 | 第34-45页 |
| 1 引言 | 第34页 |
| 2 材料与方法 | 第34-37页 |
| 2.1 试剂及血清 | 第34-35页 |
| 2.2 A-VP1蛋白临床检测应用初步鉴定 | 第35页 |
| 2.3 间接ELISA试剂盒的研制及初步应用 | 第35-37页 |
| 3 结果 | 第37-43页 |
| 3.1 A-VP1蛋白鉴定结果 | 第37页 |
| 3.2 抗原最佳包被量的确定 | 第37-38页 |
| 3.3 血清和酶标抗体的工作浓度 | 第38页 |
| 3.4 最佳抗原包被液的确定 | 第38-39页 |
| 3.5 最佳封闭时间的确定 | 第39页 |
| 3.6 最佳血清作用时间的确定 | 第39-40页 |
| 3.7 最佳酶标二抗作用时间的确定 | 第40页 |
| 3.8 底物作用时间确定 | 第40-41页 |
| 3.9 判定标准确定 | 第41页 |
| 3.10 特异性和敏感性 | 第41-42页 |
| 3.11 重复性试验 | 第42页 |
| 3.12 对比试验 | 第42-43页 |
| 3.13 保质期试验 | 第43页 |
| 3.14 试剂盒的组成及说明书 | 第43页 |
| 4 讨论 | 第43-45页 |
| 第四部分 全文总结 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-53页 |
| Abstract | 第53-54页 |