摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
前言 | 第12-13页 |
第一篇 文献综述 | 第13-29页 |
第一章 巨型艾美耳球虫研究进展 | 第13-21页 |
1 巨型艾美耳球虫( Eimeria maxima)的流行情况 | 第13页 |
2 鸡球虫病的防治状况 | 第13-14页 |
3 E.maxima保护性抗原基因的研究现状 | 第14-15页 |
4 cDNA文库在鸡球虫研究中的应用 | 第15-17页 |
参考文献 | 第17-21页 |
第二章 Gateway技术和表达文库免疫技术 | 第21-29页 |
1 Gateway技术简介 | 第21-22页 |
2 Gateway技术在cDNA文库构建中的应用 | 第22-23页 |
3 表达文库免疫技术简介 | 第23-24页 |
4 选择表达文库免疫的因素 | 第24-25页 |
5 表达文库免疫方法的分类及应用 | 第25-27页 |
参考文献 | 第27-29页 |
第二篇 试验研究 | 第29-95页 |
第一章 利用Gateway技术构建巨型艾美耳球虫孢子化卵囊cDNA表达文库 | 第29-47页 |
1 材料与方法 | 第30-35页 |
1.1 材料 | 第30-31页 |
1.2 方法 | 第31-35页 |
2 结果 | 第35-41页 |
2.1 卵囊分离及其种类鉴定 | 第35-36页 |
2.2 总RNA的提取及mRNA的分离 | 第36-37页 |
2.3 初级文库的质量评价 | 第37-39页 |
2.4 表达文库的质量评价 | 第39-40页 |
2.5 文库中已知基因的扩增 | 第40-41页 |
3 讨论 | 第41-43页 |
参考文献 | 第43-47页 |
第二章 巨型艾美耳球虫cDNA表达文库免疫筛选 | 第47-79页 |
1 材料与方法 | 第47-50页 |
1.1 材料 | 第47-48页 |
1.2 方法 | 第48-50页 |
2 结果 | 第50-75页 |
2.1 第一轮免疫筛选 | 第50-53页 |
2.2 第二轮免疫筛选 | 第53-55页 |
2.3 第三轮免疫筛选 | 第55-58页 |
2.4 第四轮免疫筛选 | 第58-61页 |
2.5 序列分析 | 第61-75页 |
3 讨论 | 第75-76页 |
参考文献 | 第76-79页 |
第三章 EmRP基因的克隆与表达 | 第79-95页 |
1 材料与方法 | 第79-85页 |
1.1 材料 | 第79-80页 |
1.2 方法 | 第80-85页 |
2 结果 | 第85-91页 |
2.1 EmRP基因PCR扩增结果 | 第85-86页 |
2.2 EmRP基因pMD-19T重组质粒酶切鉴定 | 第86-87页 |
2.3 表达载体的构建和鉴定 | 第87-88页 |
2.4 pClod TF-EmRP重组质粒的表达 | 第88-89页 |
2.5 pClod TF-EmRP重组蛋白表达与纯化 | 第89-90页 |
2.6 Western blot 分析 | 第90-91页 |
3 讨论 | 第91-92页 |
参考文献 | 第92-95页 |
全文总结 | 第95-97页 |
致谢 | 第97-99页 |
论文发表情况 | 第99页 |