| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-24页 |
| 1.0 研究背景和意义 | 第12-13页 |
| 1.1 国内外研究进展 | 第13-15页 |
| 1.1.1 化学合成方法 | 第14-15页 |
| 1.1.1.1 苯甲醛法 | 第14页 |
| 1.1.1.2 对羟基扁桃酸氨解法 | 第14页 |
| 1.1.1.3 乙醛酸、苯酚、氨基磺酸法 | 第14-15页 |
| 1.1.2 生物酶法 | 第15页 |
| 1.2 脂肪酶水解酰胺键反应研究机理 | 第15-18页 |
| 1.3 脂肪酶固定化方法及其其固定化载体介绍 | 第18-20页 |
| 1.4 酶催化反应体系类型 | 第20-22页 |
| 1.4.1 有机溶剂体系 | 第20页 |
| 1.4.2 含水体系 | 第20-21页 |
| 1.4.3 离子液体系 | 第21-22页 |
| 1.4.4 超临界体系 | 第22页 |
| 1.5 猪胰脂肪酶催化酰胺键水解的意义 | 第22页 |
| 1.6 本研究的主要内容 | 第22-24页 |
| 第二章 脂肪酶催化对羟基苯海因酰胺键水解探索及猪胰脂肪酶固定化工艺研究 | 第24-45页 |
| 2.1 前言 | 第24页 |
| 2.2 实验材料及实验方法 | 第24-28页 |
| 2.2.1 实验材料及实验仪器 | 第24-25页 |
| 2.2.2 实验方法 | 第25-27页 |
| 2.2.2.1 水解反应方法 | 第25页 |
| 2.2.2.2 树脂固定化酶方法 | 第25页 |
| 2.2.2.3 壳聚糖溶液固定化酶方法 | 第25页 |
| 2.2.2.4 橄榄油乳化法测定脂肪酶酶活方法 | 第25-26页 |
| 2.2.2.5 反应产物定性及定量方法 | 第26-27页 |
| 2.2.3 实验所用试剂的配置 | 第27-28页 |
| 2.2.4 酶蛋白吸附率和酶活保留率的计算方法 | 第28页 |
| 2.3 实验结果及分析 | 第28-44页 |
| 第一节 脂肪酶催化对羟基苯海因酰胺键水解实验探究 | 第28-32页 |
| 2.3.1. 脂肪酶的筛选 | 第28-29页 |
| 2.3.2 产物结构分析 | 第29-32页 |
| 第二节 猪胰脂肪酶的固定化研究 | 第32-44页 |
| 2.3.3. 脂肪酶的浓度与吸光值的线性关系 | 第33-34页 |
| 2.3.4 固定化载体的选择 | 第34-36页 |
| 2.3.4.1 离子交换树脂固定化脂肪酶 | 第34-35页 |
| 2.3.4.2 大孔树脂固定化脂肪酶 | 第35页 |
| 2.3.4.3 壳聚糖溶液固定化猪胰脂肪酶 | 第35-36页 |
| 2.3.5 壳聚糖溶液固定化猪胰脂肪酶 | 第36-44页 |
| 2.3.5.1 猪胰脂肪酶溶解性实验 | 第37页 |
| 2.3.5.2 不同壳聚糖溶液pH值对猪胰脂肪酶最适酶活的影响 | 第37-39页 |
| 2.3.5.3 最适给酶浓度的确定 | 第39-40页 |
| 2.3.5.4 搅拌速度对固定化效果的影响 | 第40页 |
| 2.3.5.5 吸附时间的确定 | 第40-41页 |
| 2.3.5.6 固定化酶交联剂TPP使用量的确定 | 第41-42页 |
| 2.3.5.7 固定化酶酶学性质考察 | 第42-44页 |
| 2.4 本章小结 | 第44-45页 |
| 第三章 水有机溶剂两相体系固定化猪胰脂肪酶催化对羟基苯海因酰胺键水解研究及响应面优化设计 | 第45-69页 |
| 3.1 引言 | 第45-46页 |
| 3.2 材料与方法 | 第46-47页 |
| 3.2.1 试剂及仪器 | 第46-47页 |
| 3.2.2 对羟基苯海因酰胺键水解实验方法 | 第47页 |
| 3.2.3 产物定性分析和定量分析方法 | 第47页 |
| 3.3 固定化猪胰脂肪酶催化对羟基苯海因酰胺键水解 | 第47-60页 |
| 3.3.1 对羟基苯甘氨酸标准曲线的绘制 | 第47-48页 |
| 3.3.2 有机溶剂对酰胺键水解率的影响 | 第48-50页 |
| 3.3.3 水/有机溶剂两相体系的选择对酰胺键水解率的影响 | 第50-51页 |
| 3.3.4 底物和固定化酶质量比对酰胺键水解率的影响 | 第51-52页 |
| 3.3.5 缓冲液初始pH对酰胺键水解率的影响 | 第52-53页 |
| 3.3.6 缓冲液的种类对酰胺键水解率的影响 | 第53-54页 |
| 3.3.7 有机溶剂混合比对酰胺键水解率的影响 | 第54-56页 |
| 3.3.8 反应温度对酰胺键水解率的影响 | 第56页 |
| 3.3.9 反应时间对酰胺键水解率的影响 | 第56-57页 |
| 3.3.10 产物高效液相和液质连用分析结果 | 第57-59页 |
| 3.3.11 固定化猪胰脂肪酶与游离猪胰脂肪酶催化酰胺键水解比较 | 第59-60页 |
| 3.4 响应面设计 | 第60-68页 |
| 3.4.1 PB实验设计及结果处理 | 第61-63页 |
| 3.4.2 响应面分析法(RSM)优化实验条件 | 第63-67页 |
| 3.4.3 最佳优化条件的确定 | 第67页 |
| 3.4.4 方程的验证 | 第67页 |
| 3.4.5 实验液相图谱 | 第67-68页 |
| 3.5 本章小结 | 第68-69页 |
| 第四章 国产猪胰脂肪酶的固定化及水解对羟基苯海因酰胺键研究 | 第69-79页 |
| 4.1 前言 | 第69页 |
| 4.2 实验材料及实验方法 | 第69-70页 |
| 4.2.1 实验材料及实验仪器 | 第69页 |
| 4.2.2 国产猪胰脂肪酶固定化方法 | 第69页 |
| 4.2.3 对羟基苯海因酰胺键水解实验方法 | 第69-70页 |
| 4.3 实验结果和讨论 | 第70-78页 |
| 4.3.1 国产猪胰脂肪酶固定化工艺研究 | 第70-74页 |
| 4.3.1.1 国产猪胰脂肪酶溶解性实验 | 第70-71页 |
| 4.3.1.2 壳聚糖溶液pH值对固定化效果的影响 | 第71-72页 |
| 4.3.1.3 酶浓度对固定化效果的影响 | 第72-73页 |
| 4.3.1.4 吸附时间对蛋白质吸附率的影响 | 第73-74页 |
| 4.3.2 固定化酶水解对羟基苯海因酰胺键工艺研究 | 第74-78页 |
| 4.3.2.1 有机溶剂对水解反应的影响 | 第74-75页 |
| 4.3.2.2 缓冲液pH值对水解反应的影响 | 第75-76页 |
| 4.3.2.3 反应时间对水解反应的影响 | 第76-78页 |
| 4.4 本章小结 | 第78-79页 |
| 第五章 结论与展望 | 第79-81页 |
| 5.1 结论 | 第79页 |
| 5.2 展望 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
| 硕士期间发表论文 | 第89页 |
