| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩略语表 | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第10-22页 |
| 1.1 单子叶植物高效稳定表达外源蛋白的策略 | 第10-16页 |
| 1.1.1 选择表达效率高的启动子 | 第10-12页 |
| 1.1.1.1 启动子的类型 | 第10页 |
| 1.1.1.2 单子叶植物组织特异性启动子 | 第10-12页 |
| 1.1.2 使用表达调控元件 | 第12-13页 |
| 1.1.2.1 5'非翻译区 | 第12页 |
| 1.1.2.2 内含子 | 第12-13页 |
| 1.1.2.3 信号肽 | 第13页 |
| 1.1.3 利用基质结合区 | 第13-15页 |
| 1.1.4 优化外源基因密码子 | 第15页 |
| 1.1.5 避免RNA沉默 | 第15-16页 |
| 1.2 转基因植物中标记基因的剔除方法 | 第16-19页 |
| 1.2.1 共转化 | 第16-18页 |
| 1.2.2 位点特性重组 | 第18页 |
| 1.2.3 植物基因组自身成分做为选择标记基因 | 第18-19页 |
| 1.2.4 无选择标记基因的转化体系探索 | 第19页 |
| 1.3 本研究使用的抗赤霉病相关基因 | 第19-21页 |
| 1.3.1 玉米鸟苷酸环化酶 | 第19-20页 |
| 1.3.2 几丁质酶 | 第20页 |
| 1.3.3 抗菌肽 | 第20-21页 |
| 1.3.4 Lp4-2A介导的多基因共表达 | 第21页 |
| 1.4 研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-25页 |
| 2.1 实验材料 | 第22页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第22页 |
| 2.1.2 酶、试剂、培养基 | 第22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-25页 |
| 2.2.1 PCR扩增 | 第22-23页 |
| 2.2.2 煮沸法提取质粒DNA | 第23页 |
| 2.2.3 大肠杆菌DH5α热激感受态细胞制备和转化 | 第23页 |
| 2.2.4 农杆菌GV3101电击感受态细胞制备和转化 | 第23-25页 |
| 3 结果与分析 | 第25-42页 |
| 3.1 抗赤霉病相关基因的克隆 | 第25-30页 |
| 3.1.1 玉米鸟苷酸环化酶 | 第25-26页 |
| 3.1.2 大麦几丁质酶 | 第26页 |
| 3.1.3 ECH42 | 第26-27页 |
| 3.1.4 ACE | 第27-28页 |
| 3.1.5 Lp4-2A介导的多基因共表达 | 第28-29页 |
| 3.1.6 抗菌肽-抗体融合基因 | 第29-30页 |
| 3.2 外源基因克隆至单子叶植物组成型表达载体 | 第30-32页 |
| 3.3 单子叶植物组织特异型表达载体的构建 | 第32-38页 |
| 3.3.1 单子叶植物胚乳特异性表达载体的构建 | 第32-36页 |
| 3.3.1.1 单子叶植物胚乳特异性表达载体的构建 | 第32-34页 |
| 3.3.1.2 外源基因的克隆 | 第34-35页 |
| 3.3.1.3 外源基因连入单子叶植物胚乳特异型表达载体 | 第35-36页 |
| 3.3.2 单子叶植物外稃特异型表达载体的构建 | 第36-38页 |
| 3.3.2.1 单子叶植物外稃特异性表达载体的构建 | 第36-37页 |
| 3.3.2.2 外源基因克隆至单子叶植物外稃特异性表达载体 | 第37-38页 |
| 3.4 单子叶植物双边界表达载体的构建 | 第38-41页 |
| 3.4.1 单子叶植物双边界表达载体的构建 | 第38-41页 |
| 3.4.2 外源基因克隆至单子叶植物双边界表达载体 | 第41页 |
| 3.5 单子叶植物表达载体转入根癌农杆菌 | 第41-42页 |
| 4 讨论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 附录 | 第52-55页 |
