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禾谷镰刀菌拮抗菌的筛选与鉴定

摘要第7-8页
ABSTRACT第8-9页
1 前言第11-19页
    1.1 小麦赤霉病危害及赤霉病菌生物防治研究进展第11-12页
        1.1.1 小麦赤霉病的危害第11页
        1.1.2 小麦赤霉病菌生物防治研究进展及存在问题第11-12页
    1.2 小麦赤霉病生物防治机制及产生抗性物质的研究第12-18页
        1.2.1 拮抗微生物的主要种类第12-14页
            1.2.1.1 拮抗细菌第12-13页
            1.2.1.2 假单胞杆菌第13页
            1.2.1.3 放射性土壤农杆菌第13页
            1.2.1.4 生防放线菌第13-14页
        1.2.2 拮抗细菌的防病机理第14-15页
            1.2.2.1 抗生作用第14页
            1.2.2.2 营养竞争第14-15页
        1.2.3 拮抗细菌产生的主要拮抗物质第15-18页
    1.3 解淀粉芽孢杆菌在生物防治方面的应用第18-19页
2 材料与方法第19-27页
    2.1 材料第19页
        2.1.1 供试菌株第19页
        2.1.2 供试小麦品种第19页
        2.1.3 培养基第19页
    2.2 拮抗菌的分离第19-20页
    2.3 拮抗菌的筛选第20页
    2.4 菌株S76-3、X-42的鉴定第20-23页
        2.4.1 形态学鉴定第20-21页
            2.4.1.1 形态特征鉴定第20-21页
                2.4.1.1.1 菌落形态特征鉴定第20页
                2.4.1.1.2 菌体形态特征鉴定第20-21页
            2.4.1.2 鉴定染色反应第21页
        2.4.2 16SrDNA序列分析第21-22页
            2.4.2.1 DNA提取和纯化第21页
            2.4.2.2 PCR鉴定第21-22页
            2.4.2.3 16S rDNA的回收及测序第22页
        2.4.3 特异引物鉴定第22-23页
            2.4.3.1 特异引物鉴定S76-3、X-42菌株第22页
            2.4.3.2 系统发育树的构建第22-23页
    2.5 拮抗菌发酵条件的优化第23页
        2.5.1 培养基第23页
        2.5.2 培养基的pH值第23页
        2.5.3 发酵培养时间第23页
    2.6 拮抗菌抑菌活性测定第23-24页
        2.6.1 活菌体的拮抗性检测第23页
        2.6.2 抑菌谱的测定第23-24页
    2.7 拮抗菌代谢物的抗生性测定第24页
        2.7.1 无菌发酵液的制备第24页
        2.7.2 抑菌物质的分离第24页
        2.7.3 抑菌物质对禾谷镰刀菌菌丝生长的影响第24页
        2.7.4 抑菌物质对禾谷镰刀菌分生孢子萌发的影响第24页
    2.8 抑菌物质的特性分析第24-25页
        2.8.1 温度敏感性测定第24-25页
        2.8.2 蛋白酶K处理第25页
    2.9 抑菌物质相关基因的鉴定第25页
        2.9.1 Inrurin基因扩增第25页
        2.9.2 surfactin扩增鉴定第25页
    2.10 发酵液对小麦种子萌发的影响第25页
    2.11 田间防治实验第25-27页
        2.11.1 禾谷镰刀菌分生孢子液的培养及收集第25-26页
        2.11.2 拮抗菌发酵菌悬液的培养第26-27页
3 结果与分析第27-41页
    3.1 拮抗菌的分离与筛选第27页
    3.2 拮抗菌的鉴定第27-29页
        3.2.1 形态特征第27-28页
        3.2.2 16S rDNA序列分析第28-29页
    3.3 拮抗菌发酵条件的优化第29-31页
        3.3.1 培养基的优化第29-30页
        3.3.2 培养基的pH值的确定第30页
        3.3.3 培养时间的优化第30-31页
    3.4 拮抗菌的抑菌活性测定第31-33页
        3.4.1 拮抗菌对禾谷镰刀菌生长的影响第31页
        3.4.2 拮抗菌的抑菌谱测定第31-33页
    3.5 拮抗菌代谢物的拮抗作用分析第33-35页
        3.5.1 抑菌物质对禾谷镰刀菌菌丝生长的影响第33页
        3.5.2 脂肤粗提液对禾谷镰刀菌菌丝生长的影响第33-34页
        3.5.3 脂肽粗提液对禾谷镰刀菌分生孢子萌发的影响第34-35页
    3.6 抑菌物质的稳定性第35-36页
        3.6.1 温度对抑菌物质活性的影响第35-36页
        3.6.2 蛋白酶K处理第36页
    3.7 抑菌物质形成相关基因的鉴定第36-37页
    3.8 发酵液对小麦种子萌发的影响第37-38页
    3.9 田间防治试验结果第38-41页
4 讨论第41-43页
    4.1 拮抗菌的分离第41页
    4.2 拮抗菌及其发酵液的拮抗活性第41页
    4.3 解淀粉芽孢杆菌产生的拮抗物质第41-42页
    4.4 解淀粉芽孢杆菌在植物病害防治中的应用第42-43页
参考文献第43-51页
致谢第51页

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