摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7页 |
第一章 文献综述 | 第8-16页 |
1 核盘菌概况 | 第8-10页 |
1.1 核盘菌的特性及危害 | 第8页 |
1.2 核盘菌的致病与菌核病的防治 | 第8-10页 |
1.2.1 核盘菌的致病机理 | 第8-9页 |
1.2.2 菌核病的防治 | 第9-10页 |
2 生防菌盾壳霉概况 | 第10-12页 |
2.1 盾壳霉和核盘菌的互作 | 第11-12页 |
2.1.1 寄生作用 | 第11页 |
2.1.2 抗生作用 | 第11-12页 |
3 产生抗真菌物质研究概况 | 第12-13页 |
4 基因功能的研究方法 | 第13-15页 |
5 研究目的与意义 | 第15-16页 |
第二章 盾壳霉产抗真菌物质突变株ZS-1T8512相关生物学和分子生物学研究 | 第16-45页 |
1 材料与方法 | 第16-29页 |
1.1 材料 | 第16-19页 |
1.1.1 菌株 | 第16-17页 |
1.1.2 培养基、载体及抗生素 | 第17-18页 |
1.1.3 质粒抽提用溶液 | 第18页 |
1.1.4 Southern杂交用溶液及试剂 | 第18-19页 |
1.1.5 其它溶液及试剂 | 第19页 |
1.1.6 限制性内切酶及其它酶类、试剂盒及其它试剂 | 第19页 |
1.2 方法 | 第19-29页 |
1.2.1 ZS-1T8512的形态特征观察 | 第19-20页 |
1.2.2 ZS-1T8512产抗细菌物质能力测定 | 第20页 |
1.2.3 ZS-1T8512产抗真菌物质能力测定 | 第20页 |
1.2.4 环境pH值对盾壳霉产抗真菌物质的影响 | 第20-22页 |
1.2.5 基因组DNA的提取 | 第22页 |
1.2.6 反向PCR克隆T-DNA侧端序列 | 第22-24页 |
1.2.7 回收产物与克隆载体连接 | 第24页 |
1.2.8 利用大肠杆菌感受态细胞转化连接产物 | 第24页 |
1.2.9 重组质粒的提取及鉴定 | 第24-25页 |
1.2.10 克隆序列分析 | 第25页 |
1.2.11 Southern杂交分析突变体中T-DNA的插入位点数 | 第25-26页 |
1.2.12 目的基因在ZS-1T8512中的表达情况 | 第26-27页 |
1.2.13 盾壳霉目的基因沉默载体的构建 | 第27-28页 |
1.2.14 含重组质粒农杆菌的获取 | 第28页 |
1.2.15 农杆菌介导转化盾壳霉 | 第28-29页 |
1.2.16 盾壳霉目的基因沉默转化子基本生物学性状的测定 | 第29页 |
2 结果与分析 | 第29-43页 |
2.1 ZS-1T8512的形态特征观察 | 第29-30页 |
2.2 ZS-1T8512的菌丝生长速度 | 第30页 |
2.3 ZS-1T8512产抗细菌物质能力测定 | 第30-31页 |
2.4 ZS-1T8512产抗真菌物质能力的测定 | 第31页 |
2.5 环境pH值对ZS-1T8512产生抗真菌物质的影响 | 第31-35页 |
2.5.1 ZS-1产生抗真菌物质动态情况 | 第31-32页 |
2.5.2 发酵后ZS-1T8512的生物产量 | 第32页 |
2.5.3 ZS-1T8512发酵液对Ep-1PNA367菌丝生长的抑制作用 | 第32-35页 |
2.6 反向PCR方法获得T-DNA插入位点侧端基因组DNA序列 | 第35-36页 |
2.7 反向PCR扩增片段测序列分析 | 第36-37页 |
2.8 目的基因全长序列的获得和T-DNA插入位点示意图 | 第37-38页 |
2.9 目的基因同源性比对 | 第38-40页 |
2.10 ZS-1T8512中T-DNA插入位点数 | 第40页 |
2.11 ZS-1T8512中CMAT-1基因的表达情况 | 第40页 |
2.12 盾壳霉CMAT-1沉默载体的构建及鉴定 | 第40-41页 |
2.13 农杆菌介导盾壳霉的转化 | 第41-43页 |
2.14 沉默转化子产抗真菌物质能力的检测 | 第43页 |
3 结论与讨论 | 第43-45页 |
3.1 结论 | 第43-44页 |
3.2 讨论 | 第44-45页 |
第三章 盾壳霉产抗真菌物质突变体ZS-1T20440相关研究 | 第45-60页 |
1 材料与方法 | 第46页 |
1.1 材料 | 第46页 |
1.2 方法 | 第46页 |
2 结果与分析 | 第46-58页 |
2.1 ZS-1T20440的形态特征观察 | 第46-47页 |
2.2 ZS-1T20440产抗细菌物质能力测定 | 第47页 |
2.3 ZS-1T20440产抗真菌物质能力的测定 | 第47-48页 |
2.4 环境pH值对ZS-1T20440产生抗真菌物质的影响 | 第48-54页 |
2.6 CMGPI-like1在出发菌株ZS-1中的表达动态 | 第54-55页 |
2.7 盾壳霉CMGPI-like1沉默载体的构建及鉴定 | 第55-56页 |
2.8 农杆菌介导盾壳霉转化 | 第56-57页 |
2.9 沉默转化子产抗真菌物质能力的检测 | 第57-58页 |
3 结论与讨论 | 第58-60页 |
3.1 结论 | 第58-59页 |
3.2 讨论 | 第59-60页 |
展望 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-69页 |
附录1 | 第69-70页 |
附录2 | 第70-71页 |
致谢 | 第71页 |