| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 前言 | 第11-21页 |
| 1.1 番木瓜的营养价值 | 第11-12页 |
| 1.2 异硫氰酸酯类化合物(Isothiocyanates,ITCs)研究进展 | 第12-16页 |
| 1.2.1 ITCs来源与结构 | 第12页 |
| 1.2.2 ITCs对动物模型致癌作用的保护效应 | 第12-14页 |
| 1.2.3 ITCs诱导肿瘤细胞周期阻滞和凋亡的机制 | 第14-15页 |
| 1.2.4 ITCs抑制肿瘤细胞侵袭和转移 | 第15-16页 |
| 1.3 异硫氰酸苄酯(Benzyl isothiocyanate,BITC)生物学功能 | 第16-19页 |
| 1.3.0 BITC对代谢酶的作用 | 第16-17页 |
| 1.3.1 BITC诱导肿瘤细胞周期阻滞、细胞凋亡 | 第17-18页 |
| 1.3.2 BITC抑制肿瘤细胞侵袭和转移 | 第18-19页 |
| 1.4 肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)的预防和治疗现状 | 第19-20页 |
| 1.5 甲胎蛋白(α-fetoprotein,AFP)在HCC发生发展及耐药中的作用 | 第20页 |
| 1.6 研究目的及意义 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-35页 |
| 2.1 材料 | 第21-26页 |
| 2.1.1 主要仪器设备与耗材 | 第21-22页 |
| 2.1.2 细胞株 | 第22页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第22-25页 |
| 2.1.4 实验用药物 | 第25-26页 |
| 2.2 方法 | 第26-35页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第26页 |
| 2.2.2 质粒提取 | 第26-27页 |
| 2.2.3 细胞转染 | 第27页 |
| 2.2.4 MTT法测定BITC对肝癌细胞增殖的影响 | 第27页 |
| 2.2.5 光学显微镜观察BITC对肝癌细胞形态的影响 | 第27-28页 |
| 2.2.6 DAPI染色检测BITC诱导肝癌细胞凋亡小体的形成 | 第28页 |
| 2.2.7 Caspase-3酶活性检测试剂盒检测BITC对肝癌细胞caspase-3酶活性的影响 | 第28-29页 |
| 2.2.8 Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒检测BITC对肝癌细胞凋亡的影响 | 第29-30页 |
| 2.2.9 PI单染法检测BITC对肝癌细胞周期的影响 | 第30页 |
| 2.2.10 划痕修复实验检测BITC对肝癌细胞运动的影响 | 第30页 |
| 2.2.11 transwell实验检测BITC对肝癌细胞迁移和侵袭的影响 | 第30-31页 |
| 2.2.12 明胶酶谱分析检测BITC对肝癌细胞中基质金属蛋白酶MMP2和MMP | 第31-32页 |
| 2.2.13 蛋白免疫印迹(Western Blot)检测BITC对肝癌细胞中相关蛋白表达的影响 | 第32-34页 |
| 2.2.14 统计学分析 | 第34-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-65页 |
| 第一部分 BITC对肝癌细胞Bel 7402和HLE恶性行为的影响 | 第35-49页 |
| 3.1 不同剂量BITC对肝癌细胞及人正常肝细胞生长的影响 | 第35-36页 |
| 3.1.1 MTT法检测不同剂量BITC对肝癌细胞生长的影响 | 第35页 |
| 3.1.2 光学显微镜观察不同剂量BITC对肝癌细胞形态的影响 | 第35-36页 |
| 3.2 不同剂量BITC对肝癌细胞凋亡的影响 | 第36-41页 |
| 3.2.1 DAPI染色检测BITC对肝癌细胞凋亡形态的影响 | 第36-37页 |
| 3.2.2 Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒检测不同剂量BITC对肝癌细胞凋亡的影响 | 第37-39页 |
| 3.2.3 Western Blot检测BITC对肝癌细胞凋亡相关蛋白表达的影响 | 第39-40页 |
| 3.2.4 Caspase-3酶活性检测试剂盒检测BITC对肝癌细胞caspase-3酶活性的影响 | 第40-41页 |
| 3.3 不同剂量BITC对肝癌细胞周期的影响 | 第41-43页 |
| 3.3.1 PI单染法测定不同剂量BITC作用后肝癌细胞周期变化 | 第41-43页 |
| 3.3.2 Western Blot检测BITC对肝癌细胞周期相关蛋白表达的影响 | 第43页 |
| 3.4 BITC对肝癌细胞迁移和侵袭的影响 | 第43-49页 |
| 3.4.1 划痕修复实验检测BITC对肝癌细胞运动的影响 | 第43-44页 |
| 3.4.2 transwell迁移实验检测BITC对肝癌细胞迁移能力的影响 | 第44-45页 |
| 3.4.3 transwell侵袭实验检测BITC对肝癌细胞侵袭能力的影响 | 第45-46页 |
| 3.4.4 明胶酶谱分析BITC对肝癌细胞基质金属蛋白酶MMP-2和MMP-9活性的影响 | 第46-48页 |
| 3.4.5 BITC对肝癌细胞迁移和侵袭相关蛋白表达的影响 | 第48-49页 |
| 第二部分 AFP在BITC对肝癌细胞Bel 7402和HLE恶性行为的影响中的作用及机制 | 第49-65页 |
| 3.5 AFP在BITC对肝癌细胞生长抑制作用中的影响 | 第49-52页 |
| 3.5.1 肝癌细胞Bel 7402干扰AFP表达和HLE中AFP过表达的效果检测 | 第49页 |
| 3.5.2 干扰或过表达AFP后BITC对肝癌细胞生长的影响 | 第49-51页 |
| 3.5.3 干扰或过表达AFP后BITC对肝癌细胞生长形态的影响 | 第51-52页 |
| 3.6 AFP在BITC对肝癌细胞凋亡诱导中的作用 | 第52-56页 |
| 3.6.1 干扰或过表达AFP后BITC对肝癌细胞凋亡形态的影响 | 第52-53页 |
| 3.6.2 干扰或过表达AFP后BITC对肝癌细胞凋亡的影响 | 第53-55页 |
| 3.6.3 干扰或过表达AFP后BITC对凋亡相关蛋白表达的影响 | 第55页 |
| 3.6.4 干扰或过表达AFP后BITC对肝癌细胞caspase-3酶活性的影响 | 第55-56页 |
| 3.7 AFP在BITC对肝癌细胞周期的影响中的作用 | 第56-59页 |
| 3.7.1 干扰或过表达AFP后BITC对肝癌细胞周期的影响 | 第56-58页 |
| 3.7.2 干扰或过表达AFP后BITC对肝癌细胞周期相关蛋白表达的影响 | 第58-59页 |
| 3.8 AFP在BITC对肝癌细胞迁移和侵袭能力的影响中的作用 | 第59-65页 |
| 3.8.1 干扰或过表达AFP后BITC对肝癌细胞划痕修复能力的影响 | 第59-60页 |
| 3.8.2 干扰或过表达AFP后BITC对肝癌细胞迁移能力的影响 | 第60-61页 |
| 3.8.3 干扰或过表达AFP后BITC对肝癌细胞侵袭能力的影响 | 第61-62页 |
| 3.8.4 干扰或过表达AFP后BITC对肝癌细胞MMP-2和MMP-9酶活性的影响 | 第62-63页 |
| 3.8.5 干扰或过表达AFP后BITC对肝癌细胞迁移和侵袭相关蛋白表达的影响 | 第63-64页 |
| 3.8.6 干扰或过表达AFP对肝癌细胞恶性相关蛋白表达的影响 | 第64-65页 |
| 4 讨论 | 第65-69页 |
| 4.1 BITC诱导肝癌细胞凋亡的可能机制 | 第65-66页 |
| 4.2 BITC诱导肝癌细胞周期阻滞的可能机制 | 第66-67页 |
| 4.3 BITC抑制肝癌细胞侵袭和转移的可能机制 | 第67页 |
| 4.4 AFP在BITC对肝癌细胞恶性行为的影响中的作用及机制 | 第67-69页 |
| 5 结论 | 第69-70页 |
| 6 参考文献 | 第70-80页 |
| 7 缩略语表 | 第80-81页 |
| 8 附录 | 第81-83页 |
| 9 致谢 | 第83页 |
