摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
缩略语表 | 第13-14页 |
1 文献综述 | 第14-37页 |
1.1 油菜研究的意义和应用价值 | 第14-15页 |
1.2 油菜株高与其菜籽产量和生物学产量密切相关 | 第15页 |
1.3 作物矮秆突变体的遗传研究和应用现状 | 第15-21页 |
1.3.1 水稻矮秆突变体的遗传研究和应用 | 第16页 |
1.3.2 小麦矮秆突变体的遗传研究和应用 | 第16-17页 |
1.3.3 甘蓝型油菜矮秆突变体的遗传研究以及矮化育种中的探索 | 第17-21页 |
1.4 甘蓝型油菜矮秆基因的定位克隆研究进展 | 第21-23页 |
1.5 甘蓝型油菜及其祖先种与拟南芥基因组的比较研究 | 第23-26页 |
1.6 植物矮秆基因的生物学功能和矮化机理研究 | 第26-36页 |
1.6.1 赤霉素与植物矮化 | 第26-33页 |
1.6.1.1 赤霉素的合成代谢与植物株矮化 | 第26-28页 |
1.6.1.2 赤霉素的信号传递与植物矮化 | 第28-33页 |
1.6.1.2.1 赤霉素信号传导 | 第28-29页 |
1.6.1.2.2 GA受体状态与植物矮化 | 第29-30页 |
1.6.1.2.3 DELLA蛋白状态与植物矮化 | 第30-33页 |
1.6.2 生长素信号转导与植物矮化 | 第33-35页 |
1.6.3 其他与株高相关因子 | 第35-36页 |
1.7 本研究的目的和意义 | 第36-37页 |
2 甘蓝型油菜矮秆基因DS-3 的克隆和功能分析 | 第37-77页 |
2.1 引言 | 第37页 |
2.2 材料与方法 | 第37-51页 |
2.2.1 试验材料及来源 | 第37-38页 |
2.2.2 下胚轴的伸长与测量试验 | 第38页 |
2.2.3 群体构建以及性状调查 | 第38-39页 |
2.2.4 目标基因DS-3 的遗传定位 | 第39-41页 |
2.2.4.1 DNA的提取和基因池的构建 | 第39页 |
2.2.4.2 连锁SSR标记的筛选和开发 | 第39-40页 |
2.2.4.3 连锁图谱的构建以及比较作图 | 第40-41页 |
2.2.5 候选基因的比较测序 | 第41-43页 |
2.2.5.1 编码序列的扩增 | 第41页 |
2.2.5.2 DNA片段的回收与TA克隆 | 第41-42页 |
2.2.5.3 感受态的电击转化 | 第42-43页 |
2.2.5.4 质粒的提取、检测及测序 | 第43页 |
2.2.6 候选基因的转化验证 | 第43-46页 |
2.2.6.1 转化载体的构建 | 第43-45页 |
2.2.6.2 拟南芥的遗传转化 | 第45页 |
2.2.6.3 阳性植株的筛选和鉴定 | 第45-46页 |
2.2.7 RGA基因家族分析 | 第46-48页 |
2.2.7.1 RGA基因序列比对和亲缘关系分析 | 第46页 |
2.2.7.2 总RNA的提取和cDNA的合成 | 第46-47页 |
2.2.7.3 BnaRGAs的表达分析 | 第47-48页 |
2.2.8 位点特异性dCAPS标记的开发及多态性检测 | 第48-49页 |
2.2.9 BnaC07.RGA与BnaA06.RGA位点互作分析 | 第49页 |
2.2.10 酵母双杂交 | 第49-51页 |
2.2.10.1 酵母双杂交载体构建 | 第49-50页 |
2.2.10.2 酿酒酵母感受态细胞的制备(LiAc Method) | 第50页 |
2.2.10.3 酵母菌的转化 | 第50-51页 |
2.3 结果与分析 | 第51-71页 |
2.3.1 甘蓝型油菜矮秆突变体ds-3 矮秆性状的鉴定 | 第51-53页 |
2.3.2 突变体ds-3 矮秆性状的遗传分析 | 第53-55页 |
2.3.3 DS-3 基因的定位 | 第55-58页 |
2.3.3.1 DS-3 连锁标记的筛选 | 第55-56页 |
2.3.3.2 DS-3 目标区间连锁图的构建和比较作图 | 第56-58页 |
2.3.4 DS-3 候选基因的克隆和比较测序 | 第58-61页 |
2.3.4.1 DS-3 候选基因的克隆和测序 | 第58-61页 |
2.3.5 BnaC07.rga-ds转化野生型拟南芥 | 第61-63页 |
2.3.6 白菜、甘蓝及甘蓝型油菜RGA基因家族成员分析 | 第63-69页 |
2.3.6.1 白菜、甘蓝及甘蓝型油菜种RGA基因的拷贝数和亲缘关系 | 第63-67页 |
2.3.6.2 BnaRGAs的表达分析以及其功能发挥与GA的关系 | 第67-69页 |
2.3.7 DS-3 对株高的调控力弱于DS-1 | 第69-71页 |
2.4 讨论 | 第71-77页 |
2.4.1 矮秆突变体ds-3 在油菜杂交育种中的应用价值 | 第71页 |
2.4.2 VHYNP基序中的P残基对于GA介导的DELLA蛋白降解的重要性 | 第71-73页 |
2.4.3 油菜RGA功能的冗余和潜在的分化 | 第73-74页 |
2.4.4 油菜RGA作为创制优良矮秆资源靶点的可操作性 | 第74-77页 |
3 甘蓝型油菜矮秆基因DS-4 的精细定位 | 第77-96页 |
3.1 引言 | 第77页 |
3.2 材料与方法 | 第77-81页 |
3.2.1 试验材料及来源 | 第77-78页 |
3.2.2 群体构建以及性状调查 | 第78页 |
3.2.3 目标基因DS-4 的遗传定位 | 第78-79页 |
3.2.3.1 DNA的提取和基因池的构建 | 第78页 |
3.2.3.2 连锁InDel标记的筛选 | 第78-79页 |
3.2.3.3 目标基因遗传连锁图的构建 | 第79页 |
3.2.4 目标区域InDel标记和SNP标记的开发 | 第79-81页 |
3.2.4.1 重测序样品准备 | 第79-80页 |
3.2.4.2 测序文库的构建 | 第80页 |
3.2.4.3 InDel、SNP变异位点的鉴定,引物设计和基因型分析 | 第80-81页 |
3.3 结果与分析 | 第81-91页 |
3.3.1 甘蓝型油菜矮秆突变体ds-4 表型鉴定 | 第81-83页 |
3.3.2 突变体ds-4 矮秆性状的遗传分析 | 第83-84页 |
3.3.3 DS-4 的初级定位 | 第84-86页 |
3.3.4 DS-4 的精细定位 | 第86-91页 |
3.3.4.1 目标区间SNP2CAPS标记开发及其基因型分析 | 第86-88页 |
3.3.4.2 目标区间SNP位点基因型分析 | 第88-91页 |
3.4 讨论 | 第91-96页 |
3.4.1 ds-4 研究的意义 | 第91页 |
3.4.2 高通量测序加速基因图位克隆的进程 | 第91-92页 |
3.4.3 作图亲本于目标基因图位克隆的重要性 | 第92-93页 |
3.4.4 ds-4 矮化机理的探究 | 第93-96页 |
参考文献 | 第96-114页 |
附录Ⅰ | 第114-116页 |
附录Ⅱ | 第116-119页 |
附录Ⅲ | 第119-120页 |
个人简介 | 第119页 |
发表文章 | 第119-120页 |
致谢 | 第120-122页 |