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miR-638通过SPAG1介导调控猪睾丸支持细胞生长的研究

摘要第8-10页
Abstract第10-11页
中英文缩写对照表第12-13页
第一章 文献综述第13-22页
    1 研究问题的由来第13页
    2 精子发生第13-15页
        2.1 精子发生过程第13-14页
        2.2 睾丸支持细胞在精子发生过程中的作用第14-15页
    3 精子发生相关microRNA的研究进展第15-16页
    4 miR-638 的研究进展第16-17页
    5 SPAG1基因的研究进展第17-18页
    6 磷脂酰肌醇 3-激酶(PI3K)与细胞生长第18-20页
        6.1 PI3K与细胞凋亡第18-19页
        6.2 PI3K与细胞周期第19-20页
    7 miRNA与细胞有丝分裂第20-21页
    8 研究的目的与意义第21-22页
第二章 材料与方法第22-36页
    1 材料第22-26页
        1.1 实验材料第22页
            1.1.1 实验细胞系第22页
        1.2 主要仪器设备第22-23页
        1.3 主要试剂与试剂盒第23-24页
        1.4 常用试剂及配制第24-26页
            1.4.1 琼脂糖凝胶电泳及检测所需溶液的配制第24页
            1.4.2 细胞培养所需溶液的配制第24-25页
            1.4.3 Western Blot所需试剂第25页
            1.4.4 免疫荧光所需试剂第25-26页
            1.4.5 生物信息学网站及分析软件第26页
    2 实验方法第26-36页
        2.1 miRNA-638 模拟物和抑制物及SPAG1干扰片段的合成第26页
        2.2 细胞的培养第26-28页
            2.2.1 细胞培养和传代第26-27页
            2.2.2 细胞冻存第27页
            2.2.3 细胞复苏第27页
            2.2.4 细胞转染第27-28页
        2.3 实时定量验证第28-31页
            2.3.1 转染ST细胞第28页
            2.3.2 细胞总RNA的提取第28-29页
            2.3.3 cDNA的制备第29-30页
            2.3.4 实时定量检测mRNA的表达水平第30-31页
        2.4 Western Blot验证第31-34页
            2.4.1 细胞总蛋白的提取第31-32页
            2.4.2 蛋白浓度测定第32页
            2.4.3 Western Blot第32-33页
            2.4.4 免疫荧光第33-34页
        2.5 MTT检测细胞增殖第34页
            2.5.1 MTT细胞实验步骤第34页
        2.6 流式细胞仪检测细胞周期第34-35页
        2.7 流式细胞仪检测细胞凋亡第35-36页
第三章 结果与分析第36-46页
    1 结果与分析第36-46页
        1.1 miR-638 对ST细胞的影响第36-39页
            1.1.1 miR-638 对ST细胞增殖的影响第36-37页
            1.1.2 miR-638 对ST细胞周期的影响第37-38页
            1.1.3 miR-638 对细胞周期调控因子的影响第38-39页
        1.2 SPAG1对ST细胞生长的影响第39-41页
        1.3 c-MYC对ST细胞生长的影响第41-43页
        1.4 miR-638 对PI3K/AKT信号通路的影响第43页
        1.5 SPAG1对PI3K / AKT信号通路的影响第43-44页
        1.6 SPAG1对细胞有丝分裂的影响第44-46页
第四章 讨论第46-50页
    1 miR-638 与PI3K/AKT信号通路第46-47页
    2 miR-638 与细胞凋亡第47-48页
    3 miR-638 与有丝分裂第48-49页
    4 miR-638 与精子发生第49-50页
第五章 结语第50-51页
    1 主要结论第50页
    2 下一步工作第50-51页
参考文献第51-59页
致谢第59页

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