摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
中英文缩写对照表 | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-22页 |
1 研究问题的由来 | 第13页 |
2 精子发生 | 第13-15页 |
2.1 精子发生过程 | 第13-14页 |
2.2 睾丸支持细胞在精子发生过程中的作用 | 第14-15页 |
3 精子发生相关microRNA的研究进展 | 第15-16页 |
4 miR-638 的研究进展 | 第16-17页 |
5 SPAG1基因的研究进展 | 第17-18页 |
6 磷脂酰肌醇 3-激酶(PI3K)与细胞生长 | 第18-20页 |
6.1 PI3K与细胞凋亡 | 第18-19页 |
6.2 PI3K与细胞周期 | 第19-20页 |
7 miRNA与细胞有丝分裂 | 第20-21页 |
8 研究的目的与意义 | 第21-22页 |
第二章 材料与方法 | 第22-36页 |
1 材料 | 第22-26页 |
1.1 实验材料 | 第22页 |
1.1.1 实验细胞系 | 第22页 |
1.2 主要仪器设备 | 第22-23页 |
1.3 主要试剂与试剂盒 | 第23-24页 |
1.4 常用试剂及配制 | 第24-26页 |
1.4.1 琼脂糖凝胶电泳及检测所需溶液的配制 | 第24页 |
1.4.2 细胞培养所需溶液的配制 | 第24-25页 |
1.4.3 Western Blot所需试剂 | 第25页 |
1.4.4 免疫荧光所需试剂 | 第25-26页 |
1.4.5 生物信息学网站及分析软件 | 第26页 |
2 实验方法 | 第26-36页 |
2.1 miRNA-638 模拟物和抑制物及SPAG1干扰片段的合成 | 第26页 |
2.2 细胞的培养 | 第26-28页 |
2.2.1 细胞培养和传代 | 第26-27页 |
2.2.2 细胞冻存 | 第27页 |
2.2.3 细胞复苏 | 第27页 |
2.2.4 细胞转染 | 第27-28页 |
2.3 实时定量验证 | 第28-31页 |
2.3.1 转染ST细胞 | 第28页 |
2.3.2 细胞总RNA的提取 | 第28-29页 |
2.3.3 cDNA的制备 | 第29-30页 |
2.3.4 实时定量检测mRNA的表达水平 | 第30-31页 |
2.4 Western Blot验证 | 第31-34页 |
2.4.1 细胞总蛋白的提取 | 第31-32页 |
2.4.2 蛋白浓度测定 | 第32页 |
2.4.3 Western Blot | 第32-33页 |
2.4.4 免疫荧光 | 第33-34页 |
2.5 MTT检测细胞增殖 | 第34页 |
2.5.1 MTT细胞实验步骤 | 第34页 |
2.6 流式细胞仪检测细胞周期 | 第34-35页 |
2.7 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第35-36页 |
第三章 结果与分析 | 第36-46页 |
1 结果与分析 | 第36-46页 |
1.1 miR-638 对ST细胞的影响 | 第36-39页 |
1.1.1 miR-638 对ST细胞增殖的影响 | 第36-37页 |
1.1.2 miR-638 对ST细胞周期的影响 | 第37-38页 |
1.1.3 miR-638 对细胞周期调控因子的影响 | 第38-39页 |
1.2 SPAG1对ST细胞生长的影响 | 第39-41页 |
1.3 c-MYC对ST细胞生长的影响 | 第41-43页 |
1.4 miR-638 对PI3K/AKT信号通路的影响 | 第43页 |
1.5 SPAG1对PI3K / AKT信号通路的影响 | 第43-44页 |
1.6 SPAG1对细胞有丝分裂的影响 | 第44-46页 |
第四章 讨论 | 第46-50页 |
1 miR-638 与PI3K/AKT信号通路 | 第46-47页 |
2 miR-638 与细胞凋亡 | 第47-48页 |
3 miR-638 与有丝分裂 | 第48-49页 |
4 miR-638 与精子发生 | 第49-50页 |
第五章 结语 | 第50-51页 |
1 主要结论 | 第50页 |
2 下一步工作 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-59页 |
致谢 | 第59页 |