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鸭疫里氏杆菌sprA基因缺失突变株的构建及其生物学特性研究

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-11页
缩略语表第12-13页
第一章 文献综述第13-26页
    1 鸭疫里氏杆菌病原学研究进展第13-16页
        1.1 病原分类第13页
        1.2 形态结构及生化特性第13-14页
        1.3 培养特性及理化性质第14页
        1.4 血清型第14-15页
        1.5 流行病学第15页
        1.6 临床诊断及防治方法第15-16页
    2 毒力因子的研究进展第16-18页
        2.1 OmpA蛋白家族第16页
        2.2 二肽肽酶Ⅳ(DPPⅣ)第16页
        2.3 明胶水解酶第16-17页
        2.4 基因vapD1和vapD2编码的蛋白第17页
        2.5 基因sspA编码的蛋白第17页
        2.6 基因luxE和AS87_04050 编码的蛋白第17-18页
    3 Por分泌系统研究进展第18-21页
        3.1 约氏黄杆菌第19页
        3.2 牙龈卟啉单胞菌第19-20页
        3.3 福赛坦氏菌第20-21页
        3.4 哈氏噬纤维菌和黄褐二氧化碳噬纤维菌第21页
        3.5 鸭疫里氏杆菌第21页
    4 蛋白质组学第21-26页
        4.1 蛋白质组学概述第21-22页
        4.2 蛋白质组学研究技术第22-25页
        4.3 蛋白质组学在鸭疫里氏杆菌研究中的应用第25-26页
第二章 鸭疫里氏杆菌sprA基因缺失突变株的构建第26-50页
    1 目的和意义第26页
    2 材料第26-29页
        2.1 菌株和质粒第26页
        2.2 细菌培养条件第26页
        2.3 主要分子生物学及生化试剂第26-27页
        2.4 试验动物第27页
        2.5 主要溶液的配制第27-29页
    3 实验方法第29-37页
        3.1 RA-YM基因组的提取第29页
        3.2 RA-YM株sprA基因同源臂的克隆与鉴定第29-30页
        3.3 RA-YM sprA基因抗性表达盒的构建与鉴定第30-33页
        3.4 重组自杀性质粒pRE-LSR构建与鉴定第33页
        3.5 RA-YM sprA基因缺失突变株的构建和鉴定第33-34页
        3.6 RA-YMΔsprA基因缺失突变株生物学特性的研究第34-35页
        3.7 RA-YMΔsprA基因缺失突变株致病性的研究第35-36页
        3.8 RA-YMΔsprA基因缺失突变株明胶酶谱测序分析第36-37页
    4 结果与分析第37-50页
        4.1 壮观霉素抗性基因、sprA基因同源臂的扩增第37页
        4.2 RA-YM sprA基因抗性表达盒的构建第37-38页
        4.3 重组自杀性质粒pRE-LSR的构建与鉴定第38页
        4.4 RA-YM sprA基因缺失突变株的构建与鉴定第38-39页
        4.5 RA-YMΔsprA基因缺失突变株生物学特性的研究第39-41页
        4.6 RA-YMΔsprA基因缺失突变株对雏鸭致病性的研究第41-45页
        4.7 RA-YMΔsprA基因缺失突变株明胶酶谱测序分析第45-50页
第三章 鸭疫里氏杆菌外膜蛋白串联质谱标签(TMT)相对定量蛋白组学分析第50-65页
    1 目的和意义第50页
    2 材料第50-52页
        2.1 菌株第50页
        2.2 主要生化试剂第50页
        2.3 培养基、抗生素及其他生化试剂的配制第50-51页
        2.4 主要仪器设备第51-52页
    3 研究方法第52-54页
        3.1 技术路线第52页
        3.2 实验方法第52-54页
    4 结果与分析第54-65页
        4.1 外膜蛋白SDS-PAGE电泳及预实验质谱分析第54-55页
        4.2 鉴定和质量结果评估第55-57页
        4.3 RA-YM和RA-YMΔsprA外膜蛋白蛋白组学分析第57-65页
讨论第65-69页
    1 RA-YM和 ΔsprA对雏鸭致病性的研究第65-66页
    2 PorSS分泌的蛋白对鸭疫里氏杆菌致病性的研究第66-67页
    3 鸭疫里氏杆菌外膜蛋白组学的研究第67-68页
    4 对鸭疫里氏杆菌与PorSS后续工作的展望第68-69页
结论第69-70页
附录第70-74页
参考文献第74-80页
致谢第80页

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