摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
缩略语表 | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-26页 |
1 鸭疫里氏杆菌病原学研究进展 | 第13-16页 |
1.1 病原分类 | 第13页 |
1.2 形态结构及生化特性 | 第13-14页 |
1.3 培养特性及理化性质 | 第14页 |
1.4 血清型 | 第14-15页 |
1.5 流行病学 | 第15页 |
1.6 临床诊断及防治方法 | 第15-16页 |
2 毒力因子的研究进展 | 第16-18页 |
2.1 OmpA蛋白家族 | 第16页 |
2.2 二肽肽酶Ⅳ(DPPⅣ) | 第16页 |
2.3 明胶水解酶 | 第16-17页 |
2.4 基因vapD1和vapD2编码的蛋白 | 第17页 |
2.5 基因sspA编码的蛋白 | 第17页 |
2.6 基因luxE和AS87_04050 编码的蛋白 | 第17-18页 |
3 Por分泌系统研究进展 | 第18-21页 |
3.1 约氏黄杆菌 | 第19页 |
3.2 牙龈卟啉单胞菌 | 第19-20页 |
3.3 福赛坦氏菌 | 第20-21页 |
3.4 哈氏噬纤维菌和黄褐二氧化碳噬纤维菌 | 第21页 |
3.5 鸭疫里氏杆菌 | 第21页 |
4 蛋白质组学 | 第21-26页 |
4.1 蛋白质组学概述 | 第21-22页 |
4.2 蛋白质组学研究技术 | 第22-25页 |
4.3 蛋白质组学在鸭疫里氏杆菌研究中的应用 | 第25-26页 |
第二章 鸭疫里氏杆菌sprA基因缺失突变株的构建 | 第26-50页 |
1 目的和意义 | 第26页 |
2 材料 | 第26-29页 |
2.1 菌株和质粒 | 第26页 |
2.2 细菌培养条件 | 第26页 |
2.3 主要分子生物学及生化试剂 | 第26-27页 |
2.4 试验动物 | 第27页 |
2.5 主要溶液的配制 | 第27-29页 |
3 实验方法 | 第29-37页 |
3.1 RA-YM基因组的提取 | 第29页 |
3.2 RA-YM株sprA基因同源臂的克隆与鉴定 | 第29-30页 |
3.3 RA-YM sprA基因抗性表达盒的构建与鉴定 | 第30-33页 |
3.4 重组自杀性质粒pRE-LSR构建与鉴定 | 第33页 |
3.5 RA-YM sprA基因缺失突变株的构建和鉴定 | 第33-34页 |
3.6 RA-YMΔsprA基因缺失突变株生物学特性的研究 | 第34-35页 |
3.7 RA-YMΔsprA基因缺失突变株致病性的研究 | 第35-36页 |
3.8 RA-YMΔsprA基因缺失突变株明胶酶谱测序分析 | 第36-37页 |
4 结果与分析 | 第37-50页 |
4.1 壮观霉素抗性基因、sprA基因同源臂的扩增 | 第37页 |
4.2 RA-YM sprA基因抗性表达盒的构建 | 第37-38页 |
4.3 重组自杀性质粒pRE-LSR的构建与鉴定 | 第38页 |
4.4 RA-YM sprA基因缺失突变株的构建与鉴定 | 第38-39页 |
4.5 RA-YMΔsprA基因缺失突变株生物学特性的研究 | 第39-41页 |
4.6 RA-YMΔsprA基因缺失突变株对雏鸭致病性的研究 | 第41-45页 |
4.7 RA-YMΔsprA基因缺失突变株明胶酶谱测序分析 | 第45-50页 |
第三章 鸭疫里氏杆菌外膜蛋白串联质谱标签(TMT)相对定量蛋白组学分析 | 第50-65页 |
1 目的和意义 | 第50页 |
2 材料 | 第50-52页 |
2.1 菌株 | 第50页 |
2.2 主要生化试剂 | 第50页 |
2.3 培养基、抗生素及其他生化试剂的配制 | 第50-51页 |
2.4 主要仪器设备 | 第51-52页 |
3 研究方法 | 第52-54页 |
3.1 技术路线 | 第52页 |
3.2 实验方法 | 第52-54页 |
4 结果与分析 | 第54-65页 |
4.1 外膜蛋白SDS-PAGE电泳及预实验质谱分析 | 第54-55页 |
4.2 鉴定和质量结果评估 | 第55-57页 |
4.3 RA-YM和RA-YMΔsprA外膜蛋白蛋白组学分析 | 第57-65页 |
讨论 | 第65-69页 |
1 RA-YM和 ΔsprA对雏鸭致病性的研究 | 第65-66页 |
2 PorSS分泌的蛋白对鸭疫里氏杆菌致病性的研究 | 第66-67页 |
3 鸭疫里氏杆菌外膜蛋白组学的研究 | 第67-68页 |
4 对鸭疫里氏杆菌与PorSS后续工作的展望 | 第68-69页 |
结论 | 第69-70页 |
附录 | 第70-74页 |
参考文献 | 第74-80页 |
致谢 | 第80页 |