| 摘要 | 第4-6页 |
| Summary | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-19页 |
| 1. 兰州鲇概述 | 第11-12页 |
| 2 鱼类分子育种技术研究进展 | 第12-13页 |
| 2.1 分子标记辅助育种 | 第12-13页 |
| 2.2 转基因育种 | 第13页 |
| 3 本试验候选基因研究现状 | 第13-16页 |
| 3.1 MyoD基因研究现状 | 第13-15页 |
| 3.1.1 MRFs家族基因 | 第13-14页 |
| 3.1.2 MyoD基因简介 | 第14-15页 |
| 3.2 MyoG基因研究现状 | 第15页 |
| 3.3 MSTN基因研究概述 | 第15-16页 |
| 4 实时荧光定量PCR技术 | 第16-17页 |
| 4.1 Real-time FQ-PCR简介 | 第16页 |
| 4.2 Real-time FQ-PCR原理 | 第16-17页 |
| 4.3 Real-time PCR定量分析方法 | 第17页 |
| 5 本研究的目的及意义 | 第17-19页 |
| 第二章 兰州鲇MyoD基因的分离、序列特征与表达分析 | 第19-37页 |
| 1 引言 | 第19页 |
| 2 试验材料 | 第19-21页 |
| 2.1 试验动物 | 第19页 |
| 2.2 主要试剂及材料 | 第19-20页 |
| 2.3 溶液、试剂配制 | 第20-21页 |
| 2.4 主要仪器设备 | 第21页 |
| 3 试验方法 | 第21-27页 |
| 3.1 MyoD基因克隆与生物信息学分析 | 第21-26页 |
| 3.1.1 基因组DNA的提取与检测 | 第21-22页 |
| 3.1.2 RNA的提取方法及检测 | 第22-23页 |
| 3.1.3 cDNA第一条链合成 | 第23页 |
| 3.1.4 MyoD基因引物的设计与合成 | 第23-24页 |
| 3.1.5 普通PCR反应 | 第24页 |
| 3.1.6 MyoD基因克隆与鉴定 | 第24-25页 |
| 3.1.7 MyoD基因生物信息学分析 | 第25-26页 |
| 3.2 MyoD基因实时荧光定量PCR | 第26-27页 |
| 3.2.1 实时定量PCR引物设计与合成 | 第26页 |
| 3.2.2 普通PCR扩增与验证测序 | 第26页 |
| 3.2.3 Real-time FQ-PCR | 第26-27页 |
| 3.2.4 数据统计处理 | 第27页 |
| 4 结果与分析 | 第27-34页 |
| 4.1 MyoD基因克隆与序列分析结果 | 第27-31页 |
| 4.1.1 基因组DNA、RNA提取与检测结果 | 第27-28页 |
| 4.1.2 MyoD基因PCR扩增与TA克隆结果 | 第28页 |
| 4.1.3 兰州鲇MyoD核苷酸序列及编码氨基酸序列分析 | 第28-29页 |
| 4.1.4 兰州鲇MyoD蛋白理化性质分析 | 第29-30页 |
| 4.1.5 兰州鲇MyoD蛋白二级结构预测分析 | 第30页 |
| 4.1.6 兰州鲇MyoD基因同源性及系统发育分析 | 第30-31页 |
| 4.2 MyoD基因荧光定量结果 | 第31-34页 |
| 4.2.1 兰州鲇八个组织总RNA提取结果 | 第31-32页 |
| 4.2.2 MyoD普通PCR及验证测序结果 | 第32页 |
| 4.2.3 Real-time FQ-PCR动力学曲线 | 第32页 |
| 4.2.4 Real-time FQ-PCR融解曲线 | 第32-33页 |
| 4.2.5 MyoD mRNA组织表达差异 | 第33-34页 |
| 5 讨论 | 第34-37页 |
| 5.1 MyoD基因序列分析 | 第34-36页 |
| 5.2 MyoD基因组织表达分析 | 第36-37页 |
| 第三章 兰州鲇MyoG基因的分离、序列特征与表达分析 | 第37-47页 |
| 1 引言 | 第37页 |
| 2 试验材料 | 第37页 |
| 3 试验方法 | 第37-39页 |
| 3.1 MyoG基因克隆与生物信息学分析 | 第37-38页 |
| 3.1.1 基因组DNA的提取与检测 | 第37页 |
| 3.1.2 总RNA的提取与检测 | 第37页 |
| 3.1.3 cDNA第一条链的合成 | 第37页 |
| 3.1.4 MyoG基因引物的设计与合成 | 第37-38页 |
| 3.1.5 普通PCR反应 | 第38页 |
| 3.1.6 MyoG基因克隆与鉴定 | 第38页 |
| 3.1.7 MyoG基因生物信息学分析 | 第38页 |
| 3.2 MyoG基因实时荧光定量PCR | 第38-39页 |
| 3.2.1 实时定量PCR引物设计与合成 | 第38页 |
| 3.2.2 普通PCR及验证测序 | 第38页 |
| 3.2.3 Real-time FQ-PCR | 第38页 |
| 3.2.4 数据处理与分析 | 第38-39页 |
| 4 实验结果 | 第39-45页 |
| 4.1 MyoG基因克隆与序列分析结果 | 第39-42页 |
| 4.1.1 基因组DNA提取与检测结果 | 第39页 |
| 4.1.2 MyoG基因PCR扩增与TA克隆结果 | 第39页 |
| 4.1.3 兰州鲇MyoG核苷酸序列及编码氨基酸序列分析 | 第39-40页 |
| 4.1.4 兰州鲇MyoG蛋白理化性质分析 | 第40-41页 |
| 4.1.5 兰州鲇MyoG蛋白二级结构预测分析 | 第41页 |
| 4.1.6 兰州鲇MyoG基因同源性及系统发育分析 | 第41-42页 |
| 4.2 MyoG基因荧光定量结果 | 第42-45页 |
| 4.2.1 兰州鲇八个组织总RNA提取检测结果 | 第42-43页 |
| 4.2.2 MyoG普通PCR及验证测序结果 | 第43页 |
| 4.2.3 Real-time FQ-PCR动力学曲线 | 第43页 |
| 4.2.4 Real-time FQ-PCR融解曲线 | 第43-44页 |
| 4.2.5 MyoG mRNA组织表达差异 | 第44-45页 |
| 5 讨论 | 第45-47页 |
| 5.1MyoG基因序列分析 | 第45-46页 |
| 5.2 MyoG基因组织表达分析 | 第46-47页 |
| 第四章 兰州鲇MSTN基因的分离、序列特征与表达分析 | 第47-59页 |
| 1 引言 | 第47页 |
| 2 试验材料 | 第47页 |
| 3 试验方法 | 第47-49页 |
| 3.1 MSTN基因克隆与生物信息学分析 | 第47-48页 |
| 3.1.1 基因组DNA的提取与检测 | 第47页 |
| 3.1.2 总RNA的提取与检测 | 第47页 |
| 3.1.3 cDNA第一条链的合成 | 第47页 |
| 3.1.4 MSTN基因引物的设计与合成 | 第47-48页 |
| 3.1.5 普通PCR反应 | 第48页 |
| 3.1.6 MSTN基因克隆与鉴定 | 第48页 |
| 3.1.7 MSTN基因生物信息学分析 | 第48页 |
| 3.2 MSTN基因实时荧光定量PCR | 第48-49页 |
| 3.2.1 实时定量PCR引物设计与合成 | 第48-49页 |
| 3.2.2 普通PCR及验证测序 | 第49页 |
| 3.2.3 Real-time FQ-PCR | 第49页 |
| 3.2.4 数据处理与分析 | 第49页 |
| 4 实验结果 | 第49-56页 |
| 4.1 MSTN基因克隆与序列分析结果 | 第49-54页 |
| 4.1.1 基因组DNA提取与检测结果 | 第49页 |
| 4.1.2 MSTN基因PCR扩增与TA克隆结果 | 第49-50页 |
| 4.1.3 兰州鲇MSTN核苷酸序列及编码氨基酸序列分析 | 第50页 |
| 4.1.4 兰州鲇MSTN蛋白理化性质分析 | 第50-51页 |
| 4.1.5 兰州鲇MSTN蛋白二级结构预测分析 | 第51-53页 |
| 4.1.6 兰州鲇MSTN基因同源性及系统发育分析 | 第53-54页 |
| 4.2 MSTN基因荧光定量结果 | 第54-56页 |
| 4.2.1 兰州鲇八个组织总RNA提取检测结果 | 第54页 |
| 4.2.2 MSTN普通PCR及验证测序结果 | 第54页 |
| 4.2.3 Real-time FQ-PCR动力学曲线 | 第54-55页 |
| 4.2.4 Real-time FQ-PCR融解曲线 | 第55页 |
| 4.2.5 MSTN mRNA组织表达差异 | 第55-56页 |
| 5 讨论 | 第56-59页 |
| 5.1 MSTN基因克隆与序列分析 | 第56-57页 |
| 5.2 MSTN基因组织表达分析 | 第57-59页 |
| 第五章 结论 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 作者简介 | 第67-68页 |
| 导师简介 | 第68-69页 |
