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稳定表达荧光素酶的MDA-MB-231乳腺癌细胞系的构建及其活性表征

摘要第4-5页
英文摘要第5页
第一部分 研究背景第8-13页
    一、荧光素酶Luciferase的发现和应用第8-9页
        (一)Luciferase的发现第8页
        (二)Luciferase的应用第8-9页
    二、三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231第9-10页
        (一)乳腺癌研究进展第9页
        (二)乳腺癌分类第9-10页
        (三)三阴性乳腺癌第10页
    三、慢病毒载体第10-11页
        (一)慢病毒载体的结构第10-11页
        (二)慢病毒载体的优点第11页
        (三)慢病毒载体的应用第11页
    四、研究乳腺癌的裸鼠模型第11-12页
    五、本论文的研究内容和意义第12-13页
        (一)立题依据第12页
        (二)本论文的研究内容和意义第12-13页
第二部分 实验材料与方法第13-19页
    一、实验材料第13页
        (一)质粒及载体第13页
        (二)哺乳动物细胞系第13页
        (三)试剂第13页
        (四)实验仪器第13页
    二、实验方法第13-19页
        I. 分子生物学实验方法第13-15页
            (一)基因组的提取第13-14页
            (二)RNA提取及RT-PCR第14-15页
            (三)DNA琼脂糖凝胶电泳第15页
        II. 细胞生物学实验方法第15-19页
            (一)哺乳动物细胞系的培养第15页
            (二)慢病毒包装第15-16页
            (三)荧光素酶报告基因检测第16页
            (四)挑细胞单克隆第16页
            (五)显微镜下细胞形态的观察第16页
            (六)MTT第16-17页
            (七)流式细胞术第17页
            (八)裸鼠移植瘤模型建立第17-19页
第三部分 实验结果与分析第19-25页
    一、稳定表达萤火虫荧光素酶的MDA-MB231Fluc细胞系的构建第19-20页
    二、MDA-MB231Fluc细胞系荧光素酶的基因整合验证第20-21页
    三、MDA-MB231Fluc细胞系荧光素酶的mRNA表达水平分析第21-22页
    四、MDA-MB231Fluc细胞系的细胞学活性分析第22-23页
    五、MDA-MB231Fluc细胞系在乳腺癌裸鼠成瘤模型的应用研究第23-25页
第四部分 讨论第25-26页
第五部分 结论与创新点第26-27页
参考文献第27-32页
致谢第32页

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