摘要 | 第4-5页 |
英文摘要 | 第5页 |
第一部分 研究背景 | 第8-13页 |
一、荧光素酶Luciferase的发现和应用 | 第8-9页 |
(一)Luciferase的发现 | 第8页 |
(二)Luciferase的应用 | 第8-9页 |
二、三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231 | 第9-10页 |
(一)乳腺癌研究进展 | 第9页 |
(二)乳腺癌分类 | 第9-10页 |
(三)三阴性乳腺癌 | 第10页 |
三、慢病毒载体 | 第10-11页 |
(一)慢病毒载体的结构 | 第10-11页 |
(二)慢病毒载体的优点 | 第11页 |
(三)慢病毒载体的应用 | 第11页 |
四、研究乳腺癌的裸鼠模型 | 第11-12页 |
五、本论文的研究内容和意义 | 第12-13页 |
(一)立题依据 | 第12页 |
(二)本论文的研究内容和意义 | 第12-13页 |
第二部分 实验材料与方法 | 第13-19页 |
一、实验材料 | 第13页 |
(一)质粒及载体 | 第13页 |
(二)哺乳动物细胞系 | 第13页 |
(三)试剂 | 第13页 |
(四)实验仪器 | 第13页 |
二、实验方法 | 第13-19页 |
I. 分子生物学实验方法 | 第13-15页 |
(一)基因组的提取 | 第13-14页 |
(二)RNA提取及RT-PCR | 第14-15页 |
(三)DNA琼脂糖凝胶电泳 | 第15页 |
II. 细胞生物学实验方法 | 第15-19页 |
(一)哺乳动物细胞系的培养 | 第15页 |
(二)慢病毒包装 | 第15-16页 |
(三)荧光素酶报告基因检测 | 第16页 |
(四)挑细胞单克隆 | 第16页 |
(五)显微镜下细胞形态的观察 | 第16页 |
(六)MTT | 第16-17页 |
(七)流式细胞术 | 第17页 |
(八)裸鼠移植瘤模型建立 | 第17-19页 |
第三部分 实验结果与分析 | 第19-25页 |
一、稳定表达萤火虫荧光素酶的MDA-MB231Fluc细胞系的构建 | 第19-20页 |
二、MDA-MB231Fluc细胞系荧光素酶的基因整合验证 | 第20-21页 |
三、MDA-MB231Fluc细胞系荧光素酶的mRNA表达水平分析 | 第21-22页 |
四、MDA-MB231Fluc细胞系的细胞学活性分析 | 第22-23页 |
五、MDA-MB231Fluc细胞系在乳腺癌裸鼠成瘤模型的应用研究 | 第23-25页 |
第四部分 讨论 | 第25-26页 |
第五部分 结论与创新点 | 第26-27页 |
参考文献 | 第27-32页 |
致谢 | 第32页 |