| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-23页 |
| 1.1 植物脂肪酸和油脂合成 | 第11-12页 |
| 1.1.1 植物脂肪酸合成 | 第11-12页 |
| 1.1.2 植物油脂合成 | 第12页 |
| 1.2 乙酰辅酶A羧化酶(ACCase) | 第12-17页 |
| 1.2.1 ACCase的发现与鉴定 | 第13页 |
| 1.2.2 ACCase的结构与分类 | 第13-15页 |
| 1.2.3 ACCase的功能 | 第15页 |
| 1.2.4 植物中ACCase研究进展 | 第15-17页 |
| 1.3 植物基因组测序与基因家族进化 | 第17-20页 |
| 1.3.1 植物基因组测序进展 | 第17页 |
| 1.3.2 棉花基因组测序 | 第17-18页 |
| 1.3.3 基因家族扩增 | 第18-19页 |
| 1.3.4 基因家族发生复制后功能的分化 | 第19-20页 |
| 1.4 棉花作为油料作物的研究 | 第20-21页 |
| 1.4.1 棉籽油含量、组分及用途 | 第20-21页 |
| 1.4.2 棉籽油含量与产量、纤维品质性状的关系 | 第21页 |
| 1.5 研究目的和意义 | 第21-23页 |
| 第二章 材料与方法 | 第23-36页 |
| 2.1 材料 | 第23-24页 |
| 2.1.1 植株材料 | 第23页 |
| 2.1.2 实验所用载体与菌株 | 第23页 |
| 2.1.3 实验试剂、酶类及试剂盒 | 第23页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第23-24页 |
| 2.2 方法 | 第24-34页 |
| 2.2.1 生物信息学分析方法 | 第24-26页 |
| 2.2.2 植物材料处理方法 | 第26页 |
| 2.2.3 引物设计及合成 | 第26-28页 |
| 2.2.4 RNA提取及实时荧光定量PCR (qRT-PCR) | 第28-30页 |
| 2.2.5 GFP载体构建 | 第30-31页 |
| 2.2.6 GhBCCP1启动子表达载体构建及活性分析 | 第31-32页 |
| 2.2.7 转基因材料鉴定 | 第32-34页 |
| 2.3 田间农艺性状调查 | 第34页 |
| 2.4 棉籽油分含量测定 | 第34-35页 |
| 2.4.1 索氏提取法测定油分含量 | 第34-35页 |
| 2.4.2 近红外反射光谱模型(Near Infrared Reflectance Spectroscopy Model)测定棉籽油分 | 第35页 |
| 2.5 数据处理 | 第35-36页 |
| 第三章 结果与分析 | 第36-101页 |
| 3.1 全基因组鉴定棉花异BCCP、BC和CTα基因家族 | 第36-65页 |
| 3.1.1 全基因组鉴定棉花BCCP基因 | 第36-55页 |
| 3.1.2 全基因组鉴定棉花BC和CTα基因 | 第55-65页 |
| 3.2 GhBCCP1亚基的亚细胞定位 | 第65-67页 |
| 3.2.1 GhBCCP1基因ORF扩增及亚细胞载体的构建 | 第65-66页 |
| 3.2.2 GhBCCP1亚细胞定位 | 第66-67页 |
| 3.3 GhBCCP1启动子克隆及活性分析 | 第67-71页 |
| 3.3.1 GhBCCP1启动子片段克隆 | 第67页 |
| 3.3.2 GhBCCP1启动子片段的生物信息学分析 | 第67-68页 |
| 3.3.3 GhBCCP1启动子植物表达载体构建 | 第68-69页 |
| 3.3.4 GhBCCP1启动子瞬时表达 | 第69-70页 |
| 3.3.5 GhBCCP1启动子缺失系列载体的构建 | 第70页 |
| 3.3.6 GhBCCP1启动子缺失系列载体瞬时表达 | 第70-71页 |
| 3.4 不同油分含量材料中棉花异质型ACCase基因功能研究 | 第71-79页 |
| 3.4.1 8份棉花材料棉仁在不同发育时期的含水量变化 | 第71-72页 |
| 3.4.2 8份棉花材料不同发育时期幼胚形态及干重的变化 | 第72-74页 |
| 3.4.3 8份棉花材料棉仁不同发育时期油分含量的变化 | 第74-75页 |
| 3.4.4 异质型GhACCase基因在8份棉花材料幼胚中的表达分析 | 第75-77页 |
| 3.4.5 异质型GhACCase基因在棉花不同组织中的表达模式 | 第77-78页 |
| 3.4.6 不同非生物胁迫下异质型GhACCase基因的表达模式 | 第78-79页 |
| 3.5 过表达异质型GhACCase四亚基基因植株鉴定和功能研究 | 第79-101页 |
| 3.5.1 过表达异质型GhACCase四亚基基因植株鉴定 | 第79-82页 |
| 3.5.2 GhBCCP1、GhBC1、GhCTα2和GhCTβ基因功能验证 | 第82-92页 |
| 3.5.3 GhBCCP1、GhBC1、GhCTα2和GhCTβ聚合材料功能验证 | 第92-101页 |
| 第四章 讨论 | 第101-105页 |
| 4.1 异质型ACCse三个亚基家族的鉴定与进化分析 | 第101-102页 |
| 4.2 异质型ACCase对非生物胁迫的应答模式 | 第102-103页 |
| 4.3 异质型ACCase基因的表达模式与油分含量的关系 | 第103页 |
| 4.4 异质型ACCase四个亚基的表达对棉仁中油分含量的影响 | 第103-105页 |
| 第五章 结论 | 第105-106页 |
| 参考文献 | 第106-117页 |
| 致谢 | 第117-119页 |
| 附录 | 第119-133页 |
| 附图1 棉花BCCP蛋白的生物素domain序列 | 第119页 |
| 附图2 23个棉花BCCP蛋白在四个棉种中的进化关系 | 第119-120页 |
| 附图3 棉花BCCP蛋白预测的4个motif | 第120页 |
| 附图4 雷蒙德氏棉、亚洲棉、陆地棉和海岛棉BCCP蛋白的进化树 | 第120-122页 |
| 附图5 雷蒙德氏棉、亚洲棉、陆地棉和海岛棉BC蛋白的进化树 | 第122-124页 |
| 附图6 雷蒙德氏棉、亚洲棉、陆地棉和海岛棉CTα蛋白的进化树 | 第124-127页 |
| 附图7 8份非转基因材料棉仁不同发育时期GhBCCP1、GhBC1、GhCTα2和GhCTβ基因的表达水平 | 第127-128页 |
| 附图8 异质型GhACCase基因在不同组织中的表达模式 | 第128页 |
| 附图9 GhACCaseⅡ亚基编码基因T1转基因棉花拷贝数Southern杂交检测 | 第128-129页 |
| 附图10 转基因T_1代植株叶片PCR鉴定 | 第129-130页 |
| 附图11 过表达GhBC1基因棉花植株的southern blot分析 | 第130页 |
| 附图12 过表达GhBCCP1基因棉花植株的southern blot分析 | 第130页 |
| 附表1 GrBCCPs、GaBCCPs和GhBCCPs启动子区域的盐胁迫响应元件 | 第130-131页 |
| 附表2 其它植物中BC和CTα基因的信息 | 第131-132页 |
| 附表3 提取液中蛋白含量 | 第132-133页 |
| 个人简介 | 第133页 |
