摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 绪论 | 第11-30页 |
1.1 非特异性免疫与巨噬细胞 | 第11-19页 |
1.1.1 非特异性免疫 | 第11页 |
1.1.2 巨噬细胞 | 第11-12页 |
1.1.3 参与非特异性免疫识别的Toll样受体(TLRs) | 第12-14页 |
1.1.3.1 Toll样受体家族 | 第12-13页 |
1.1.3.2 TLR2与TLR4 | 第13-14页 |
1.1.4 参与非特异性免疫应答的信号通路 | 第14-18页 |
1.1.4.1 NF-κB信号通路 | 第14-15页 |
1.1.4.2 MAPK信号通路 | 第15-17页 |
1.1.4.3 PI3k/Akt/mTOR信号通路 | 第17-18页 |
1.1.5 免疫介质 | 第18-19页 |
1.1.5.1 NO和诱导型一氧化氮合酶(iNOS) | 第18-19页 |
1.1.5.2 TNF-α | 第19页 |
1.1.5.3 其他免疫介质 | 第19页 |
1.2 天然产物的免疫调节作用机制 | 第19-23页 |
1.2.1 参与调节天然产物免疫调节活性的TLRs | 第19-21页 |
1.2.2 参与调解天然产物免疫调节活性的信号转导通路 | 第21-23页 |
1.3 褐藻胶寡糖 | 第23-27页 |
1.3.1 褐藻胶寡糖的来源 | 第23-24页 |
1.3.2 褐藻胶寡糖的制备方法 | 第24-25页 |
1.3.3 褐藻胶寡糖的生物活性 | 第25-27页 |
1.4 蛋白质组学的研究进展及应用 | 第27-29页 |
1.4.1 蛋白质组学的研究内容 | 第28页 |
1.4.2 蛋白质组学的研究技术 | 第28-29页 |
1.4.3 蛋白质组学在天然产物的研究 | 第29页 |
1.5 创新点 | 第29-30页 |
第二章 褐藻胶寡糖对小鼠巨噬细胞RAW264.7 表面TLR4的识别及激活其所介导的信号通路研究 | 第30-54页 |
2.1 实验试剂和仪器 | 第30-31页 |
2.1.1 实验试剂 | 第30页 |
2.1.2 实验仪器 | 第30-31页 |
2.2 实验方法 | 第31-36页 |
2.2.1 GOS的制备 | 第31页 |
2.2.2 FITC标记GOS及其TLC检测 | 第31-32页 |
2.2.3 细胞培养 | 第32页 |
2.2.4 一氧化氮(NO)检测 | 第32页 |
2.2.5 核蛋白提取 | 第32-33页 |
2.2.6 蛋白免疫印迹 (Western blot) | 第33-34页 |
2.2.7 ELISA技术检测TNF-α 生成量 | 第34页 |
2.2.8 载玻片和盖玻片的处理 | 第34页 |
2.2.9 FITC-GOS入胞观察 | 第34页 |
2.2.10 FITC-GOS与TLR4共定位观察 | 第34-35页 |
2.2.11 细胞骨架观察 | 第35页 |
2.2.12 动物实验 | 第35页 |
2.2.13 数据处理及统计学分析 | 第35-36页 |
2.3 实验结果 | 第36-49页 |
2.3.1 GOS中内毒素含量检测及入胞作用 | 第36-39页 |
2.3.2 GOS激活TLR4的表达及Akt/NF-κB和Akt/mTOR信号通路 | 第39-43页 |
2.3.3 TLR4对GOS所介导的Akt/NF-κB和Akt/mTOR信号通路的调节作用 | 第43-45页 |
2.3.4 TLR4对GOS所介导的MAPK信号通路调节作用 | 第45-47页 |
2.3.5 GOS对RAW264.7 细胞骨架的影响 | 第47-48页 |
2.3.6 GOS对小鼠腹腔巨噬细胞的诱导作用 | 第48-49页 |
2.4 讨论 | 第49-53页 |
2.5 结论 | 第53-54页 |
第三章 基于LC-MS技术对GOS作用于d THP-1 细胞差异蛋白质组学分析研究 | 第54-67页 |
3.1 实验试剂和仪器 | 第54页 |
3.1.1 实验试剂 | 第54页 |
3.1.2 实验仪器 | 第54页 |
3.2 实验方法 | 第54-56页 |
3.2.1 细胞培养 | 第54-55页 |
3.2.2 蛋白样品制备 | 第55页 |
3.2.3 iTRAQ标记蛋白样品 | 第55页 |
3.2.4 LC-MS对差异表达蛋白分析 | 第55-56页 |
3.2.5 数据分析 | 第56页 |
3.2.5.1 初步数据处理 | 第56页 |
3.2.5.2 GO功能富集分析与KEGG通路富集分析 | 第56页 |
3.3 实验结果 | 第56-64页 |
3.3.1 蛋白表达差异性分析 | 第56-58页 |
3.3.2 GO功能聚类分析 | 第58-62页 |
3.3.3 KEGG通路富集分析结果 | 第62-64页 |
3.4 讨论 | 第64-66页 |
3.5 结论 | 第66-67页 |
第四章 总结与展望 | 第67-69页 |
4.1 总结 | 第67页 |
4.2 展望 | 第67-69页 |
参考文献 | 第69-80页 |
致谢 | 第80-81页 |
攻读硕士学位期间的研究成果 | 第81页 |