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褐藻胶寡糖对巨噬细胞信号转导的调节作用研究

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
第一章 绪论第11-30页
    1.1 非特异性免疫与巨噬细胞第11-19页
        1.1.1 非特异性免疫第11页
        1.1.2 巨噬细胞第11-12页
        1.1.3 参与非特异性免疫识别的Toll样受体(TLRs)第12-14页
            1.1.3.1 Toll样受体家族第12-13页
            1.1.3.2 TLR2与TLR4第13-14页
        1.1.4 参与非特异性免疫应答的信号通路第14-18页
            1.1.4.1 NF-κB信号通路第14-15页
            1.1.4.2 MAPK信号通路第15-17页
            1.1.4.3 PI3k/Akt/mTOR信号通路第17-18页
        1.1.5 免疫介质第18-19页
            1.1.5.1 NO和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)第18-19页
            1.1.5.2 TNF-α第19页
            1.1.5.3 其他免疫介质第19页
    1.2 天然产物的免疫调节作用机制第19-23页
        1.2.1 参与调节天然产物免疫调节活性的TLRs第19-21页
        1.2.2 参与调解天然产物免疫调节活性的信号转导通路第21-23页
    1.3 褐藻胶寡糖第23-27页
        1.3.1 褐藻胶寡糖的来源第23-24页
        1.3.2 褐藻胶寡糖的制备方法第24-25页
        1.3.3 褐藻胶寡糖的生物活性第25-27页
    1.4 蛋白质组学的研究进展及应用第27-29页
        1.4.1 蛋白质组学的研究内容第28页
        1.4.2 蛋白质组学的研究技术第28-29页
        1.4.3 蛋白质组学在天然产物的研究第29页
    1.5 创新点第29-30页
第二章 褐藻胶寡糖对小鼠巨噬细胞RAW264.7 表面TLR4的识别及激活其所介导的信号通路研究第30-54页
    2.1 实验试剂和仪器第30-31页
        2.1.1 实验试剂第30页
        2.1.2 实验仪器第30-31页
    2.2 实验方法第31-36页
        2.2.1 GOS的制备第31页
        2.2.2 FITC标记GOS及其TLC检测第31-32页
        2.2.3 细胞培养第32页
        2.2.4 一氧化氮(NO)检测第32页
        2.2.5 核蛋白提取第32-33页
        2.2.6 蛋白免疫印迹 (Western blot)第33-34页
        2.2.7 ELISA技术检测TNF-α 生成量第34页
        2.2.8 载玻片和盖玻片的处理第34页
        2.2.9 FITC-GOS入胞观察第34页
        2.2.10 FITC-GOS与TLR4共定位观察第34-35页
        2.2.11 细胞骨架观察第35页
        2.2.12 动物实验第35页
        2.2.13 数据处理及统计学分析第35-36页
    2.3 实验结果第36-49页
        2.3.1 GOS中内毒素含量检测及入胞作用第36-39页
        2.3.2 GOS激活TLR4的表达及Akt/NF-κB和Akt/mTOR信号通路第39-43页
        2.3.3 TLR4对GOS所介导的Akt/NF-κB和Akt/mTOR信号通路的调节作用第43-45页
        2.3.4 TLR4对GOS所介导的MAPK信号通路调节作用第45-47页
        2.3.5 GOS对RAW264.7 细胞骨架的影响第47-48页
        2.3.6 GOS对小鼠腹腔巨噬细胞的诱导作用第48-49页
    2.4 讨论第49-53页
    2.5 结论第53-54页
第三章 基于LC-MS技术对GOS作用于d THP-1 细胞差异蛋白质组学分析研究第54-67页
    3.1 实验试剂和仪器第54页
        3.1.1 实验试剂第54页
        3.1.2 实验仪器第54页
    3.2 实验方法第54-56页
        3.2.1 细胞培养第54-55页
        3.2.2 蛋白样品制备第55页
        3.2.3 iTRAQ标记蛋白样品第55页
        3.2.4 LC-MS对差异表达蛋白分析第55-56页
        3.2.5 数据分析第56页
            3.2.5.1 初步数据处理第56页
            3.2.5.2 GO功能富集分析与KEGG通路富集分析第56页
    3.3 实验结果第56-64页
        3.3.1 蛋白表达差异性分析第56-58页
        3.3.2 GO功能聚类分析第58-62页
        3.3.3 KEGG通路富集分析结果第62-64页
    3.4 讨论第64-66页
    3.5 结论第66-67页
第四章 总结与展望第67-69页
    4.1 总结第67页
    4.2 展望第67-69页
参考文献第69-80页
致谢第80-81页
攻读硕士学位期间的研究成果第81页

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