中文摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
符号说明 | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-22页 |
1 天然反义RNA的研究进展 | 第10-14页 |
1.1 天然反义RNA | 第10-13页 |
1.1.1 天然反义RNA的定义 | 第10-11页 |
1.1.2 天然反义RNA的分类 | 第11页 |
1.1.3 天然反义RNA功能 | 第11-13页 |
1.2 天然反义RNA与人类疾病 | 第13-14页 |
1.2.1 天然反义RNA与肿瘤 | 第13-14页 |
2 DNA甲基化与肝癌 | 第14-16页 |
3 甲基化抑制剂5-Aza-dC的抗肿瘤作用 | 第16-18页 |
4 几个肿瘤相关基因的研究现状 | 第18-21页 |
4.1 肌细胞增强因子基因(MEF2D) | 第18-19页 |
4.2 细胞周期蛋白依赖性激酶16基因(CDK16) | 第19-20页 |
4.3 肌动蛋白依赖的染色质调控因子超家族A成员4基因(SMARCA4) | 第20-21页 |
5 本研究的立题依据及研究意义 | 第21-22页 |
第二章 MEF2D、CDK16、SMARCA4反义RNA验证及其与正义基因的关系 | 第22-38页 |
1 实验材料与主要试剂、设备 | 第22-25页 |
1.1 实验细胞 | 第22页 |
1.2 主要试剂和设备 | 第22-24页 |
1.3 主要试剂的配制 | 第24-25页 |
2 研究方法 | 第25-33页 |
3 结果与分析 | 第33-37页 |
4 讨论 | 第37-38页 |
第三章 MEF2D、CDK16、SMARCA4基因反义RNA的序列鉴定 | 第38-59页 |
1 实验材料与主要试剂、设备 | 第38-40页 |
1.1 实验细胞 | 第38页 |
1.2 主要试剂 | 第38-39页 |
1.3 主要设备 | 第39-40页 |
2 研究方法 | 第40-53页 |
2.1 引物的设计与合成 | 第40页 |
2.2 细胞处理 | 第40页 |
2.3 样品RNA的抽提 | 第40-41页 |
2.4 cDNA末端快速扩增技术(RapidAmplification of cDNA Ends,RACE) | 第41-45页 |
2.4.1 3'末端快速扩增技术 | 第41-43页 |
2.4.2 5'末端快速扩增技术 | 第43-45页 |
2.5 PCR产物分析 | 第45页 |
2.6 PCR扩增产物的回收与纯化 | 第45-46页 |
2.7 目的基因片段与载体连接 | 第46页 |
2.8 连接产物转化Ecoli.DH5a感受态细胞 | 第46-47页 |
2.9 菌液PCR | 第47页 |
2.10 PCR产物分析及测序 | 第47-48页 |
2.11 全长序列鉴定 | 第48-53页 |
3 结果与分析 | 第53-57页 |
4 讨论 | 第57-59页 |
第四章 讨论与结论 | 第59-61页 |
1. 讨论 | 第59-60页 |
2. 结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-70页 |
附表1 MEF2D-AS cDNA序列 | 第70-71页 |
致谢 | 第71-72页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第72-73页 |