| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 缩写词 | 第12-13页 |
| 1 前言 | 第13-22页 |
| 1.1 植物抗逆性基因研究进展 | 第13-15页 |
| 1.2 植物CONSTANS转录因子的研究进展 | 第15-17页 |
| 1.2.1 CO基因及其序列结构特征 | 第15页 |
| 1.2.2 CO基因的功能 | 第15-17页 |
| 1.3 NAC转录因子在植物抗逆研究中的研究进展 | 第17-18页 |
| 1.3.1 NAC转录因子的发现 | 第17页 |
| 1.3.2 NAC转录因子结构 | 第17页 |
| 1.3.3 NAC转录因子的功能 | 第17-18页 |
| 1.4 FOX hunting system在植物高通量基因克隆中的应用 | 第18-20页 |
| 1.4.1 FOX hunting system的首次提出 | 第18-19页 |
| 1.4.2 FOX hunting system的流程 | 第19页 |
| 1.4.3 FOX hunting system的应用 | 第19-20页 |
| 1.5 研究目的和意义 | 第20-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第22页 |
| 2.1.1 植物遗传转化材料 | 第22页 |
| 2.1.2 实验菌株与载体 | 第22页 |
| 2.2 实验药品与设备 | 第22-23页 |
| 2.2.1 实验药品 | 第22-23页 |
| 2.2.2 实验设备 | 第23页 |
| 2.3 实验用培养基与溶液 | 第23-26页 |
| 2.3.1 抗生素和激素 | 第23-24页 |
| 2.3.2 培养基 | 第24-25页 |
| 2.3.3 实验溶液 | 第25-26页 |
| 2.4 植物材料的培养与转化 | 第26-28页 |
| 2.4.1 拟南芥的培养与转化 | 第26页 |
| 2.4.2 油菜的培养与转化 | 第26-27页 |
| 2.4.3 油菜水培培养及胁迫处理 | 第27-28页 |
| 2.5 DNA、RNA提取与cDNA制备 | 第28-29页 |
| 2.5.1 油菜DNA的提取 | 第28页 |
| 2.5.2 油菜总RNA的提取 | 第28-29页 |
| 2.5.3 cDNA的制备 | 第29页 |
| 2.6 载体构建 | 第29-31页 |
| 2.6.1 引物设计 | 第29页 |
| 2.6.2 目标片段克隆与回收 | 第29-30页 |
| 2.6.3 载体构建 | 第30-31页 |
| 2.6.4 热激法转化大肠杆菌 | 第31页 |
| 2.6.5 电转法转化农杆菌 | 第31页 |
| 2.7 转录激活活性分析 | 第31页 |
| 2.8 GFP亚细胞定位 | 第31-32页 |
| 2.9 GUS活性检测 | 第32页 |
| 2.10 生理生化指标检测 | 第32-35页 |
| 2.10.1 拟南芥萌发及萌发后生长实验及相关指标统计方法 | 第32页 |
| 2.10.2 拟南芥根长测定 | 第32-33页 |
| 2.10.3 拟南芥叶温测定 | 第33页 |
| 2.10.4 拟南芥气孔密度测定 | 第33页 |
| 2.10.5 拟南芥离体叶片失水率测定 | 第33页 |
| 2.10.6 叶绿素含量测定 | 第33-35页 |
| 3 实验结果 | 第35-59页 |
| 3.1 油菜FOX拟南芥库的构建 | 第35-36页 |
| 3.2 油菜FOX拟南芥纯合系筛选 | 第36页 |
| 3.3 油菜FOX拟南芥纯合系表型验证 | 第36-38页 |
| 3.4 BnCOL2转录因子功能分析 | 第38-49页 |
| 3.4.1 BnCOL2序列分析 | 第38页 |
| 3.4.2 BnCOL2组织表达分析 | 第38-39页 |
| 3.4.3 BnCOL2诱导表达分析 | 第39-40页 |
| 3.4.4 BnCOL2的转录激活活性验证 | 第40页 |
| 3.4.5 BnCOL2蛋白的亚细胞定位 | 第40-41页 |
| 3.4.6 BnCOL2超表达拟南芥的基因表达分析 | 第41-42页 |
| 3.4.7 BnCOL2超表达拟南芥的抗逆性鉴定 | 第42-47页 |
| 3.4.8 BnCOL2超表达拟南芥生长表型 | 第47-49页 |
| 3.5 BnNAC1-1、BnNAC5-11、BnNAC18转录因子功能分析 | 第49-56页 |
| 3.5.1 BnNAC1-1、BnNAC5-11、BnNAC18序列分析 | 第49-50页 |
| 3.5.2 BnNAC1-1、BnNAC5-11、BnNAC18组织表达分析 | 第50-51页 |
| 3.5.3 BnNAC1-1、BnNAC5-11、BnNAC18的诱导表达分析 | 第51-53页 |
| 3.5.4 BnNAC1-1、BnNAC5-11、BnNAC18的转录激活活性验证 | 第53-55页 |
| 3.5.5 BnNAC1-1、BnNAC5-11、BnNAC18的亚细胞定位 | 第55-56页 |
| 3.6 油菜转化与鉴定 | 第56-59页 |
| 4 讨论 | 第59-63页 |
| 4.1 FOX hunting在油菜中的应用 | 第59页 |
| 4.2 油菜FOX拟南芥的表型分析 | 第59-60页 |
| 4.3 BnCOL2基因的功能分析 | 第60页 |
| 4.4 BnNAC1-1、BnNAC5-11、BnNAC18基因的功能分析 | 第60-61页 |
| 4.5 油菜的转化 | 第61-63页 |
| 5 结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-73页 |
| 附录A 实验用引物 | 第73-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
