| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 英文缩写词 | 第11-21页 |
| 第1章 绪论 | 第21-37页 |
| 1.1 神经病理性疼痛概述 | 第21-23页 |
| 1.2 神经病理疼痛机制研究 | 第23-28页 |
| 1.2.1 外周敏化 | 第23-24页 |
| 1.2.2 中枢敏化 | 第24-25页 |
| 1.2.3 离子通道表达和活性的改变 | 第25-26页 |
| 1.2.4 脊髓胶质细胞活化 | 第26-28页 |
| 1.3 疼痛的治疗策略 | 第28-33页 |
| 1.3.1 药物治疗 | 第28-29页 |
| 1.3.2 神经调节治疗 | 第29-30页 |
| 1.3.3 微创介入治疗 | 第30页 |
| 1.3.4 基因治疗 | 第30-33页 |
| 1.4 肝细胞生长因子概述 | 第33-35页 |
| 1.5 本文的研究内容与意义 | 第35-37页 |
| 第2章 重组质粒pUDK-HGF的制备及活性检测 | 第37-51页 |
| 2.1 实验材料 | 第37-40页 |
| 2.1.1 发酵菌种及细胞 | 第37页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第37-38页 |
| 2.1.3 溶液配制 | 第38-40页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第40页 |
| 2.2 实验方法 | 第40-44页 |
| 2.2.1 菌体发酵 | 第40-41页 |
| 2.2.2 连续碱裂解及超滤浓缩 | 第41-42页 |
| 2.2.3 三步层析纯化 | 第42页 |
| 2.2.4 浓缩与分装 | 第42页 |
| 2.2.5 超螺旋比例测定 | 第42-43页 |
| 2.2.6 HGF蛋白表达量检测 | 第43页 |
| 2.2.7 细胞迁移检测 | 第43-44页 |
| 2.3 实验结果 | 第44-48页 |
| 2.3.1 30L补料发酵 | 第44页 |
| 2.3.2 连续碱裂解及超滤浓缩 | 第44-45页 |
| 2.3.3 三步层析分离纯化 | 第45-47页 |
| 2.3.4 含量及超螺旋比例 | 第47页 |
| 2.3.5 目的基因表达量及生物活性 | 第47-48页 |
| 2.4 讨论 | 第48-50页 |
| 2.5 本章小结 | 第50-51页 |
| 第3章 重组质粒pUDK-HGF对疼痛动物行为学的影响 | 第51-67页 |
| 3.1 实验材料 | 第51-52页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第51-52页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第52页 |
| 3.1.3 溶液配制 | 第52页 |
| 3.1.4 实验仪器 | 第52页 |
| 3.2 实验方法 | 第52-57页 |
| 3.2.1 SD大鼠切口痛模型 | 第52-53页 |
| 3.2.2 SD大鼠皮肤/肌肉切口牵拉痛模型（SMIR） | 第53-54页 |
| 3.2.3 C57BL/6 小鼠坐骨神经分支损伤模型（SNI） | 第54页 |
| 3.2.4 鞘内给药 | 第54-55页 |
| 3.2.5 疼痛行为学测定 | 第55-56页 |
| 3.2.6 步态分析 | 第56-57页 |
| 3.2.7 统计学分析 | 第57页 |
| 3.3 实验结果 | 第57-64页 |
| 3.3.1 局部肌肉注射pUDK-HGF对大鼠切口痛行为学的影响 | 第57-59页 |
| 3.3.2 局部肌肉注射pUDK-HGF对大鼠SMIR疼痛行为学的影响 | 第59-60页 |
| 3.3.3 鞘内注射pUDK-HGF对大鼠SMIR疼痛行为学的影响 | 第60-61页 |
| 3.3.4 鞘内注射不同剂量pUDK-HGF对小鼠SNI行为学的影响 | 第61-62页 |
| 3.3.5 重复注射pUDK-HGF对小鼠SNI行为学的影响 | 第62-63页 |
| 3.3.6 质粒pUDK-HGF对坐骨神经功能指数的影响 | 第63-64页 |
| 3.4 讨论 | 第64-66页 |
| 3.5 本章小结 | 第66-67页 |
| 第4章 重组质粒pUDK-HGF外周镇痛作用机制 | 第67-91页 |
| 4.1 实验材料 | 第67-69页 |
| 4.1.1 实验动物 | 第67页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第67-68页 |
| 4.1.3 溶液配制 | 第68-69页 |
| 4.1.4 实验仪器 | 第69页 |
| 4.2 实验方法 | 第69-74页 |
| 4.2.1 疼痛动物模型 | 第69-70页 |
| 4.2.2 血流灌注量测定 | 第70页 |
| 4.2.3 取材及病理染色 | 第70-71页 |
| 4.2.4 肌肉活体成像 | 第71页 |
| 4.2.5 蛋白样品制备 | 第71页 |
| 4.2.6 免疫组织化学 | 第71-72页 |
| 4.2.7 酶联免疫吸附实验 | 第72页 |
| 4.2.8 蛋白免疫印迹实验 | 第72-73页 |
| 4.2.9 统计学分析 | 第73-74页 |
| 4.3 实验结果 | 第74-87页 |
| 4.3.1 肌肉活体成像 | 第74-75页 |
| 4.3.2 人HGF蛋白的表达 | 第75页 |
| 4.3.3 SMIR病理学观察 | 第75-78页 |
| 4.3.4 SNI病理学观察 | 第78-80页 |
| 4.3.5 SMIR血流灌注量 | 第80-81页 |
| 4.3.6 SNI血流灌注量 | 第81-82页 |
| 4.3.7 外周致痛物质表达变化 | 第82-84页 |
| 4.3.8 脊髓胶质细胞活化 | 第84-87页 |
| 4.4 讨论 | 第87-90页 |
| 4.5 本章小结 | 第90-91页 |
| 第5章 重组质粒pUDK-HGF脊髓中枢镇痛机制初步研究 | 第91-111页 |
| 5.1 实验材料 | 第91-93页 |
| 5.1.1 实验动物及细胞 | 第91页 |
| 5.1.2 实验试剂 | 第91-92页 |
| 5.1.3 溶液配制 | 第92页 |
| 5.1.4 实验仪器 | 第92-93页 |
| 5.2 实验方法 | 第93-97页 |
| 5.2.1 疼痛动物模型 | 第93页 |
| 5.2.2 鞘内活体成像 | 第93页 |
| 5.2.3 Western blot检测脊髓胶质细胞特异性标志物 | 第93-94页 |
| 5.2.4 BV2小胶质细胞的培养及鉴定 | 第94-95页 |
| 5.2.5 细胞活力测定 | 第95页 |
| 5.2.6 qRT-PCR检测炎性相关基因表达 | 第95-97页 |
| 5.2.7 统计学分析 | 第97页 |
| 5.3 实验结果 | 第97-106页 |
| 5.3.1 鞘内活体成像 | 第97页 |
| 5.3.2 脊髓内人HGF蛋白的表达 | 第97页 |
| 5.3.3 鞘内注射pUDK-HGF对脊髓胶质细胞的影响 | 第97-100页 |
| 5.3.4 BV2小胶质细胞鉴定及c-met受体检测 | 第100页 |
| 5.3.5 LPS对BV2细胞活力及形态的影响 | 第100-103页 |
| 5.3.6 rh-HGF蛋白对BV2细胞活力及形态的影响 | 第103页 |
| 5.3.7 LPS刺激BV2细胞炎性因子表达变化 | 第103-105页 |
| 5.3.8 rh-HGF蛋白对LPS诱导BV2细胞炎性因子表达的抑制作用 | 第105-106页 |
| 5.4 讨论 | 第106-109页 |
| 5.5 本章小结 | 第109-111页 |
| 结论 | 第111-113页 |
| 参考文献 | 第113-129页 |
| 附录 | 第129-149页 |
| 综述一 肝细胞生长因子对神经损伤的保护及镇痛作用研究进展 | 第129-137页 |
| 参考文献 | 第134-137页 |
| 综述二 聚酮类化合物异源表达研究进展 | 第137-149页 |
| 参考文献 | 第145-149页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第149-151页 |
| 致谢 | 第151页 |
