| 缩略词 | 第8-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-18页 |
| 1 朱砂叶螨研究概况 | 第14页 |
| 2 害虫害螨对阿维菌素的抗性机理 | 第14-15页 |
| 3 害虫害螨对甲氰菊酯的抗性机理 | 第15页 |
| 4 邻位开环双加氧酶 | 第15-18页 |
| 4.1 邻位开环双加氧酶结构与功能 | 第15-16页 |
| 4.2 邻位开环双加氧酶代谢药剂的研究进展 | 第16-18页 |
| 引言 | 第18-20页 |
| 第二章 朱砂叶螨邻位开环双加氧酶ID-RCDs活性研究 | 第20-28页 |
| 1 材料与方法 | 第20-24页 |
| 1.1 供试朱砂叶螨 | 第20页 |
| 1.2 试验药剂与仪器 | 第20-22页 |
| 1.3 试剂配制 | 第22页 |
| 1.4 粗酶液制备 | 第22-23页 |
| 1.5 牛血清蛋白标准曲线制作 | 第23页 |
| 1.6 酶原蛋白含量测定 | 第23-24页 |
| 1.7 邻位开环双加氧酶活性测定 | 第24页 |
| 2 结果与分析 | 第24-25页 |
| 2.1 牛血清蛋白标准曲线绘制 | 第24-25页 |
| 2.2 邻位开环双加氧酶活性测定结果 | 第25页 |
| 3 讨论 | 第25-28页 |
| 第三章 朱砂叶螨TcID1基因全长克隆及表达模式分析 | 第28-44页 |
| 第1节 朱砂叶螨TcID1基因全长克隆 | 第28-37页 |
| 1 材料与方法 | 第28-33页 |
| 1.1 朱砂叶螨 | 第28页 |
| 1.2 主要试剂与仪器 | 第28-29页 |
| 1.3 扩增引物设计 | 第29页 |
| 1.4 朱砂叶螨总RNA的提取 | 第29-30页 |
| 1.5 朱砂叶螨cDNA第一链合成 | 第30-31页 |
| 1.6 目的片段克隆与测序 | 第31-32页 |
| 1.7 生物学分析方法 | 第32-33页 |
| 2 结果与分析 | 第33-37页 |
| 2.1 朱砂叶螨总RNA提取 | 第33页 |
| 2.2 朱砂叶螨TcID1基因扩增 | 第33-34页 |
| 2.3 朱砂叶螨TcID1基因生物学信息分析 | 第34-37页 |
| 3 讨论 | 第37页 |
| 第2节 朱砂叶螨TcID1基因mRNA表达模式研究 | 第37-44页 |
| 1 材料与方法 | 第37-39页 |
| 1.1 品系 | 第37页 |
| 1.2 主要试剂 | 第37页 |
| 1.3 试验仪器 | 第37-38页 |
| 1.4 各条件下螨的收集 | 第38页 |
| 1.5 总RNA的提取 | 第38页 |
| 1.6 cDNA合成 | 第38-39页 |
| 1.7 引物设计 | 第39页 |
| 1.8 定量PCR | 第39页 |
| 1.9 数据分析 | 第39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-43页 |
| 2.1 引物标准曲线扩增 | 第39-40页 |
| 2.2 朱砂叶螨TcID1基因在不同螨态的mRNA表达模式分析 | 第40-41页 |
| 2.3 朱砂叶螨TcID1基因在SS、FeR及AbR的mRNA表达模式分析 | 第41-42页 |
| 2.4 朱砂叶螨TcID1基因在药剂胁迫下的mRNA表达模式分析 | 第42-43页 |
| 3 讨论 | 第43-44页 |
| 第四章 RNAi验证TcID1基因在叶螨抗性的功能 | 第44-54页 |
| 1 材料与方法 | 第44-47页 |
| 1.1 品系 | 第44页 |
| 1.2 试剂 | 第44页 |
| 1.3 试验仪器 | 第44页 |
| 1.4 引物设计 | 第44页 |
| 1.5 dsRNA合成及纯化 | 第44-46页 |
| 1.6 dsRNA饲喂干扰 | 第46页 |
| 1.7 抑制效率检测 | 第46页 |
| 1.8 药剂毒力测定 | 第46页 |
| 1.9 酶活检测 | 第46-47页 |
| 1.10 数据分析 | 第47页 |
| 2 结果与分析 | 第47-51页 |
| 2.1 朱砂叶螨TcID1-dsRNA抑制效率及粗酶活检测 | 第47-49页 |
| 2.2 朱砂叶螨各品系干扰后毒力测定结果与分析 | 第49-51页 |
| 3 讨论 | 第51-54页 |
| 第五章 朱砂叶螨TcID1基因原核表达及重组蛋白对阿维菌素的代谢研究 | 第54-70页 |
| 第1节 朱砂叶螨TcID1基因原核表达研究 | 第54-62页 |
| 1 材料与方法 | 第54-59页 |
| 1.1 供试朱砂叶螨 | 第54页 |
| 1.2 载体与菌株 | 第54页 |
| 1.3 试验试剂与仪器 | 第54页 |
| 1.4 常用储备液及培养基的制备 | 第54-55页 |
| 1.5 朱砂叶螨TcID1基因重组表达质粒的构建 | 第55-56页 |
| 1.6 重组质粒转化BL21(DE3)感受态细胞 | 第56页 |
| 1.7 朱砂叶螨TcID1基因的诱导表达 | 第56-57页 |
| 1.8 蛋白样品SDS-PAGE电泳检测 | 第57-58页 |
| 1.9 细胞粗提物的制备 | 第58页 |
| 1.10 朱砂叶螨TcID1蛋白的亲和纯化 | 第58页 |
| 1.11 Western Blot检测 | 第58-59页 |
| 2 结果与分析 | 第59-61页 |
| 2.1 TcID1基因重组质粒的构建 | 第59-60页 |
| 2.2 TcID1蛋白诱导及表达形式鉴定 | 第60-61页 |
| 2.3 TcID1蛋白纯化及Western Blot鉴定 | 第61页 |
| 3 讨论 | 第61-62页 |
| 第2节 TcID1重组蛋白生化特性研究 | 第62-66页 |
| 1 材料与方法 | 第62-64页 |
| 1.1 试剂及仪器 | 第62页 |
| 1.2 重组蛋白含量的测定 | 第62页 |
| 1.3 邻位开环双加氧酶活性测定 | 第62-63页 |
| 1.4 重组蛋白Km和Vmax测定 | 第63页 |
| 1.5 阿维菌素对重组蛋白酶活影响测定 | 第63页 |
| 1.6 甲氰菊酯对重组蛋白酶活影响测定 | 第63-64页 |
| 2 结果与分析 | 第64-65页 |
| 2.1 重组蛋白活性及动力学参数 | 第64页 |
| 2.2 阿维菌素对重组蛋白酶活影响分析 | 第64-65页 |
| 2.3 甲氰菊酯对重组蛋白酶活影响分析 | 第65页 |
| 3 讨论 | 第65-66页 |
| 第3节 朱砂叶螨TcID1基因重组蛋白对阿维菌素的作用研究 | 第66-70页 |
| 1 材料与方法 | 第66-67页 |
| 1.1 试剂 | 第66页 |
| 1.2 试验仪器 | 第66页 |
| 1.3 色谱条件 | 第66页 |
| 1.4 阿维菌素标准曲线制作 | 第66页 |
| 1.5 重组蛋白与阿维菌素反应 | 第66-67页 |
| 2 结果与分析 | 第67-69页 |
| 2.1 阿维菌素标准曲线 | 第67-68页 |
| 2.2 朱砂叶螨TcID1重组蛋白与阿维菌素反应结果 | 第68-69页 |
| 3 讨论 | 第69-70页 |
| 第六章 结论与展望 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-82页 |
| 在读期间发表的文章 | 第82-84页 |
| 致谢 | 第84页 |
