摘要 | 第9-13页 |
ABSTRACT | 第13-18页 |
第一章 文献综述 | 第19-31页 |
1.1 概述 | 第19页 |
1.2 昆虫血细胞类型与功能 | 第19-21页 |
1.3 昆虫造血作用 | 第21-23页 |
1.4 血细胞分子标记和遗传工具 | 第23-24页 |
1.5 昆虫造血调控 | 第24-27页 |
1.6 家蚕造血与调控 | 第27-31页 |
1.6.1 家蚕 | 第27-28页 |
1.6.2 家蚕血细胞分类及功能 | 第28-29页 |
1.6.3 家蚕造血作用及调控 | 第29-31页 |
第二章 引言 | 第31-35页 |
2.1 研究背景及目的意义 | 第31页 |
2.2 主要研究内容 | 第31-33页 |
2.3 技术路线 | 第33-35页 |
第三章 基于RNA-seq研究家蚕不同造血谱系基因表达差异 | 第35-59页 |
3.1 材料和方法 | 第35-36页 |
3.1.1 实验材料 | 第35页 |
3.1.2 主要仪器设备 | 第35页 |
3.1.3 实验试剂 | 第35-36页 |
3.1.4 主要培养基及溶液配制 | 第36页 |
3.1.5 主要方法 | 第36页 |
3.2 结果与分析 | 第36-56页 |
3.2.1 家蚕血细胞分选 | 第36-37页 |
3.2.2 RNA质量检测 | 第37页 |
3.2.3 测序质量控制 | 第37-38页 |
3.2.4 基因表达注释 | 第38-39页 |
3.2.5 COG分析 | 第39-40页 |
3.2.6 PCA分析 | 第40-41页 |
3.2.7 差异基因表达分析 | 第41-43页 |
3.2.8 差异表达基因功能分析 | 第43-48页 |
3.2.9 颗粒细胞和浆细胞差异基因的基本代谢通路分析 | 第48-51页 |
3.2.10 免疫相关基因分析 | 第51-54页 |
3.2.11 黏着斑相关基因分析 | 第54-55页 |
3.2.12 差异表达转录因子分析 | 第55-56页 |
3.2.13 分子标记筛选 | 第56页 |
3.3 结论与讨论 | 第56-59页 |
第四章 家蚕浆细胞分子标记鉴定及浆细胞发育研究 | 第59-85页 |
4.1 材料和方法 | 第59-66页 |
4.1.1 实验材料 | 第59-60页 |
4.1.2 主要仪器设备 | 第60页 |
4.1.3 实验试剂 | 第60-61页 |
4.1.4 主要培养基及溶液配制 | 第61-62页 |
4.1.5 主要方法 | 第62-66页 |
4.2 结果与分析 | 第66-82页 |
4.2.1 基因结构分析 | 第66-69页 |
4.2.2 蛋白同源序列比对 | 第69-71页 |
4.2.3 表达分析 | 第71-72页 |
4.2.4 原核表达与蛋白纯化 | 第72-73页 |
4.2.5 Integrin β2 和Integrin β3 在循环血细胞中的表达 | 第73-75页 |
4.2.6 家蚕浆细胞的胚胎起源 | 第75-76页 |
4.2.7 家蚕幼虫浆细胞发育与起源 | 第76-79页 |
4.2.8 造血器官对造血的贡献 | 第79-82页 |
4.3 结论与讨论 | 第82-85页 |
第五章 家蚕Integrin β2 和 β3 在血细胞中的功能研究 | 第85-103页 |
5.1 材料和方法 | 第85-89页 |
5.1.1 实验材料 | 第85-86页 |
5.1.2 实验方法 | 第86-89页 |
5.2 实验结果 | 第89-99页 |
5.2.1 anti-Integrin β2 抗血清抑制浆细胞的粘附 | 第89-90页 |
5.2.2 病原菌诱导Integrin β2 和 β3 的表达 | 第90-92页 |
5.2.3 重组蛋白对病原菌的凝聚作用 | 第92页 |
5.2.4 重组蛋白与病原菌的结合 | 第92-94页 |
5.2.5 重组蛋白与PAMPs的结合 | 第94页 |
5.2.6 基因编辑系统质粒构建 | 第94-95页 |
5.2.7 细胞水平编辑效率检测 | 第95-96页 |
5.2.8 转基因注射与阳性个体筛选 | 第96-97页 |
5.2.9 Integrin β2 基因敲除个体的获得 | 第97-98页 |
5.2.10 功能检测 | 第98-99页 |
5.3 结论与讨论 | 第99-103页 |
第六章 家蚕血细胞特异性启动子的鉴定与研究 | 第103-121页 |
6.1 材料和方法 | 第103-111页 |
6.1.1 实验材料 | 第103页 |
6.1.2 数据库、软件和在线工具 | 第103页 |
6.1.3 实验仪器 | 第103页 |
6.1.4 实验试剂 | 第103-104页 |
6.1.5 主要溶液及配制 | 第104页 |
6.1.6 实验方法 | 第104-111页 |
6.2 实验结果 | 第111-119页 |
6.2.1 血细胞特异表达基因的筛选 | 第111页 |
6.2.2 基因结构分析与启动子克隆 | 第111-113页 |
6.2.3 Ac NPV病毒系统检测启动子活性 | 第113-115页 |
6.2.4 转基因载体的构建 | 第115-116页 |
6.2.5 胚胎微量注射与阳性个体筛选 | 第116页 |
6.2.6 EGFP在转基因个体中的表达 | 第116-119页 |
6.3 结论与讨论 | 第119-121页 |
第七章 家蚕造血调控机制解析 | 第121-133页 |
7.1 材料与方法 | 第121-125页 |
7.1.1 实验材料 | 第121页 |
7.1.2 主要仪器设备 | 第121-122页 |
7.1.3 主要试剂及耗材 | 第122页 |
7.1.4 主要培养基及溶液配制 | 第122-124页 |
7.1.5 主要方法 | 第124-125页 |
7.2 结果与分析 | 第125-130页 |
7.2.1 牛胰岛素促进造血器官造血 | 第125-126页 |
7.2.2 Ras/MAPK和PI3K/TOR通路对造血的调控 | 第126-129页 |
7.2.3 U0126与新生血细胞的维持 | 第129-130页 |
7.3 结论与讨论 | 第130-133页 |
第八章 综合与结论 | 第133-137页 |
8.1 家蚕幼虫颗粒细胞和浆细胞差异基因表达分析 | 第133页 |
8.2 家蚕浆细胞特异性分子标记鉴定 | 第133-134页 |
8.3 家蚕浆细胞起源 | 第134页 |
8.4 Integrin β2 和Integrin β3 在血细胞中的功能研究 | 第134-135页 |
8.5 家血细胞特异表达基因的鉴定及血细胞特异性启动子研究 | 第135页 |
8.6 Insulin及其下游通路在家蚕造血中的调控功能研究 | 第135-137页 |
论文创新点 | 第137-139页 |
参考文献 | 第139-149页 |
博士期间发表文章及课题参研情况 | 第149-153页 |
致谢 | 第153-155页 |
附录 | 第155-174页 |