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家蚕血细胞特异性分子标记鉴定及造血调控机制研究

摘要第9-13页
ABSTRACT第13-18页
第一章 文献综述第19-31页
    1.1 概述第19页
    1.2 昆虫血细胞类型与功能第19-21页
    1.3 昆虫造血作用第21-23页
    1.4 血细胞分子标记和遗传工具第23-24页
    1.5 昆虫造血调控第24-27页
    1.6 家蚕造血与调控第27-31页
        1.6.1 家蚕第27-28页
        1.6.2 家蚕血细胞分类及功能第28-29页
        1.6.3 家蚕造血作用及调控第29-31页
第二章 引言第31-35页
    2.1 研究背景及目的意义第31页
    2.2 主要研究内容第31-33页
    2.3 技术路线第33-35页
第三章 基于RNA-seq研究家蚕不同造血谱系基因表达差异第35-59页
    3.1 材料和方法第35-36页
        3.1.1 实验材料第35页
        3.1.2 主要仪器设备第35页
        3.1.3 实验试剂第35-36页
        3.1.4 主要培养基及溶液配制第36页
        3.1.5 主要方法第36页
    3.2 结果与分析第36-56页
        3.2.1 家蚕血细胞分选第36-37页
        3.2.2 RNA质量检测第37页
        3.2.3 测序质量控制第37-38页
        3.2.4 基因表达注释第38-39页
        3.2.5 COG分析第39-40页
        3.2.6 PCA分析第40-41页
        3.2.7 差异基因表达分析第41-43页
        3.2.8 差异表达基因功能分析第43-48页
        3.2.9 颗粒细胞和浆细胞差异基因的基本代谢通路分析第48-51页
        3.2.10 免疫相关基因分析第51-54页
        3.2.11 黏着斑相关基因分析第54-55页
        3.2.12 差异表达转录因子分析第55-56页
        3.2.13 分子标记筛选第56页
    3.3 结论与讨论第56-59页
第四章 家蚕浆细胞分子标记鉴定及浆细胞发育研究第59-85页
    4.1 材料和方法第59-66页
        4.1.1 实验材料第59-60页
        4.1.2 主要仪器设备第60页
        4.1.3 实验试剂第60-61页
        4.1.4 主要培养基及溶液配制第61-62页
        4.1.5 主要方法第62-66页
    4.2 结果与分析第66-82页
        4.2.1 基因结构分析第66-69页
        4.2.2 蛋白同源序列比对第69-71页
        4.2.3 表达分析第71-72页
        4.2.4 原核表达与蛋白纯化第72-73页
        4.2.5 Integrin β2 和Integrin β3 在循环血细胞中的表达第73-75页
        4.2.6 家蚕浆细胞的胚胎起源第75-76页
        4.2.7 家蚕幼虫浆细胞发育与起源第76-79页
        4.2.8 造血器官对造血的贡献第79-82页
    4.3 结论与讨论第82-85页
第五章 家蚕Integrin β2 和 β3 在血细胞中的功能研究第85-103页
    5.1 材料和方法第85-89页
        5.1.1 实验材料第85-86页
        5.1.2 实验方法第86-89页
    5.2 实验结果第89-99页
        5.2.1 anti-Integrin β2 抗血清抑制浆细胞的粘附第89-90页
        5.2.2 病原菌诱导Integrin β2 和 β3 的表达第90-92页
        5.2.3 重组蛋白对病原菌的凝聚作用第92页
        5.2.4 重组蛋白与病原菌的结合第92-94页
        5.2.5 重组蛋白与PAMPs的结合第94页
        5.2.6 基因编辑系统质粒构建第94-95页
        5.2.7 细胞水平编辑效率检测第95-96页
        5.2.8 转基因注射与阳性个体筛选第96-97页
        5.2.9 Integrin β2 基因敲除个体的获得第97-98页
        5.2.10 功能检测第98-99页
    5.3 结论与讨论第99-103页
第六章 家蚕血细胞特异性启动子的鉴定与研究第103-121页
    6.1 材料和方法第103-111页
        6.1.1 实验材料第103页
        6.1.2 数据库、软件和在线工具第103页
        6.1.3 实验仪器第103页
        6.1.4 实验试剂第103-104页
        6.1.5 主要溶液及配制第104页
        6.1.6 实验方法第104-111页
    6.2 实验结果第111-119页
        6.2.1 血细胞特异表达基因的筛选第111页
        6.2.2 基因结构分析与启动子克隆第111-113页
        6.2.3 Ac NPV病毒系统检测启动子活性第113-115页
        6.2.4 转基因载体的构建第115-116页
        6.2.5 胚胎微量注射与阳性个体筛选第116页
        6.2.6 EGFP在转基因个体中的表达第116-119页
    6.3 结论与讨论第119-121页
第七章 家蚕造血调控机制解析第121-133页
    7.1 材料与方法第121-125页
        7.1.1 实验材料第121页
        7.1.2 主要仪器设备第121-122页
        7.1.3 主要试剂及耗材第122页
        7.1.4 主要培养基及溶液配制第122-124页
        7.1.5 主要方法第124-125页
    7.2 结果与分析第125-130页
        7.2.1 牛胰岛素促进造血器官造血第125-126页
        7.2.2 Ras/MAPK和PI3K/TOR通路对造血的调控第126-129页
        7.2.3 U0126与新生血细胞的维持第129-130页
    7.3 结论与讨论第130-133页
第八章 综合与结论第133-137页
    8.1 家蚕幼虫颗粒细胞和浆细胞差异基因表达分析第133页
    8.2 家蚕浆细胞特异性分子标记鉴定第133-134页
    8.3 家蚕浆细胞起源第134页
    8.4 Integrin β2 和Integrin β3 在血细胞中的功能研究第134-135页
    8.5 家血细胞特异表达基因的鉴定及血细胞特异性启动子研究第135页
    8.6 Insulin及其下游通路在家蚕造血中的调控功能研究第135-137页
论文创新点第137-139页
参考文献第139-149页
博士期间发表文章及课题参研情况第149-153页
致谢第153-155页
附录第155-174页

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