| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第1章 绪论 | 第10-20页 |
| 1.1 细菌耐药性概述 | 第10-11页 |
| 1.2 耐药性功能的承担者 | 第11-16页 |
| 1.2.1 研究细菌耐药性相关蛋白质 | 第11页 |
| 1.2.2 高效表达目的蛋白体系的构建 | 第11-12页 |
| 1.2.3 有效分离纯化蛋白质的系统 | 第12-15页 |
| 1.2.4 蛋白质空间结构的测定 | 第15-16页 |
| 1.3 耐药性功能的决定者 | 第16-17页 |
| 1.3.1 研究基因的表达水平 | 第16-17页 |
| 1.3.2 研究基因的表达调控 | 第17页 |
| 1.4 铜绿假单胞菌的耐药性问题 | 第17-19页 |
| 参考文献 | 第19-20页 |
| 第2章 NalD蛋白质的表达纯化及与PEG的相互作用 | 第20-44页 |
| 2.1 引言 | 第20-21页 |
| 2.2 实验仪器及实验试剂 | 第21-22页 |
| 2.2.1 实验仪器 | 第21页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第21-22页 |
| 2.3 NalD蛋白质表达与纯化 | 第22-24页 |
| 2.3.1 NalD蛋白质的诱导表达 | 第22页 |
| 2.3.2 NalD蛋白质的纯化 | 第22-24页 |
| 2.4 NalD蛋白质与PEG的相互作用 | 第24-28页 |
| 2.4.1 SDS-PAGE蛋白质凝胶电泳实验及MALDI-TOF实验 | 第24-27页 |
| 2.4.2 DLS动态激光光散射实验 | 第27页 |
| 2.4.3 分析型超速离心实验 | 第27-28页 |
| 2.4.4 NalD与PEG混合样品的黏度测定 | 第28页 |
| 2.5 实验结果及讨论 | 第28-40页 |
| 2.5.1 NalD蛋白质的纯化 | 第28-32页 |
| 2.5.2 NalD蛋白质与PEG相互作用的SDS-PAGE实验结果 | 第32-34页 |
| 2.5.3 NalD蛋白质与PEG相互作用的MALDI-TOF实验结果 | 第34-35页 |
| 2.5.4 不同浓度PEG样品液在20℃的粘度 | 第35-36页 |
| 2.5.5 NalD蛋白质与PEG相互作用的DLS实验结果 | 第36-37页 |
| 2.5.6 NalD蛋白质与PEG相互作用的分析型超速离心实验结果 | 第37-38页 |
| 2.5.7 蛋白质与PEG相互作用的一些直接证据 | 第38-40页 |
| 2.6 结论 | 第40-42页 |
| 参考文献 | 第42-44页 |
| 第3章 CzcR蛋白质的表达纯化以及其功能的研究 | 第44-68页 |
| 3.1 引言 | 第44-45页 |
| 3.2 实验仪器及实验试剂 | 第45-46页 |
| 3.2.1 实验仪器 | 第45页 |
| 3.2.2 实验试剂 | 第45-46页 |
| 3.3 CzcR蛋白质表达体系的构建 | 第46-47页 |
| 3.3.1 重组质粒CzcR-pET30a的构建 | 第46-47页 |
| 3.3.2 CzcR蛋白质表达体系的选择 | 第47页 |
| 3.4 CzcR蛋白质的纯化 | 第47-50页 |
| 3.4.1 CzcR蛋白质纯化过程使用的层析柱及原理 | 第47-49页 |
| 3.4.2 CzcR蛋白质纯化步骤 | 第49-50页 |
| 3.5 铜绿假单胞菌实时定量荧光PCR实验 | 第50-54页 |
| 3.5.1 实时荧光定量PCR的原理 | 第50页 |
| 3.5.2 酚氯仿抽提获得细菌总RNA | 第50-52页 |
| 3.5.3 变性琼脂糖凝胶电泳 | 第52页 |
| 3.5.4 逆转录合成cDNA | 第52-53页 |
| 3.5.5 PCR反应产物的熔解曲线 | 第53-54页 |
| 3.6 实验结果及讨论 | 第54-66页 |
| 3.6.1 CzcR蛋白质的诱导表达 | 第54页 |
| 3.6.2 CzcR蛋白质的纯化 | 第54-58页 |
| 3.6.3 RNA质量及RTPCR实验结果 | 第58-66页 |
| 3.7 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68-70页 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果 | 第70页 |
