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黑曲霉SH-1高效展示CALB脂肪酶的构建与筛选

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-8页
缩略词第13-14页
第一章 绪论第14-27页
    1.1 丝状真菌表达系统简述第14-17页
        1.1.1 丝状真菌表达系统研究进展第14-15页
        1.1.2 丝状真菌的转化方法与筛选标记第15-16页
        1.1.3 丝状真菌表达系统中启动子的选择与应用第16-17页
    1.2 真核细胞表面展示系统的研究进展第17-19页
        1.2.1 酵母细胞表面展示技术第17-18页
        1.2.2 丝状真菌表面展示技术第18-19页
    1.3 南极假丝酵母脂肪酶B研究进展第19-22页
        1.3.1 脂肪酶简介及其特性第19-20页
        1.3.2 南极假丝酵母脂肪酶B的特性第20-21页
        1.3.3 南极假丝酵母脂肪酶B的应用第21-22页
    1.4 木质纤维素的水解与发酵应用第22-24页
        1.4.1 木质纤维素的特性第22-23页
        1.4.2 预处理与糖化第23-24页
        1.4.3 木质纤维素的发酵应用第24页
    1.5 本课题的研究意义及主要研究内容第24-27页
        1.5.1 本课题的研究意义第24-26页
        1.5.2 本课题的主要研究内容第26-27页
第二章 组成型启动子P_(GPDA)在黑曲霉表面展示CALB中的应用第27-56页
    2.1 引言第27-28页
    2.2 材料与方法第28-44页
        2.2.1 实验材料第28-32页
        2.2.2 仪器和设备第32-33页
        2.2.3 实验方法第33-44页
    2.3 结果与讨论第44-55页
        2.3.1 无孢黑曲SH-1 基因组的提取第44-45页
        2.3.2 P_(gpdA)启动子基因与SS_(glaA)信号肽基因的融合及表达载体的构建第45-48页
        2.3.3 无孢黑曲霉原生质体的制备与转化第48-50页
        2.3.4 重组无孢黑曲霉菌株的筛选第50-55页
    2.4 本章小结第55-56页
第三章 黑曲霉表面展示CALB脂肪酶的发酵特性研究第56-68页
    3.1 引言第56页
    3.2 材料与设备第56-58页
        3.2.1 菌种和质粒第56页
        3.2.2 主要仪器和设备第56-57页
        3.2.3 培养基配制第57-58页
    3.3 实验方法第58-59页
        3.3.1 菌种的活化与扩大培养第58页
        3.3.2 摇瓶发酵第58页
        3.3.3 2L发酵罐发酵第58-59页
        3.3.4 参数测定第59页
    3.4 结果与讨论第59-67页
        3.4.1 两种启动子用于展示CALB摇瓶水平发酵研究第59-64页
        3.4.2 两种启动子用于展示CALB发酵罐水平发酵研究第64-67页
    3.5 本章小结第67-68页
第四章 非葡萄糖类碳源在黑曲霉表面展示CALB体系的发酵应用第68-75页
    4.1 引言第68页
    4.2 材料与试剂第68-69页
        4.2.1 实验试剂第68-69页
    4.3 实验方法第69页
        4.3.1 菌种的活化与扩大培养第69页
        4.3.2 摇瓶发酵第69页
        4.3.3 参数测定第69页
    4.4 结果与讨论第69-74页
        4.4.1 木糖、果糖与葡萄糖为碳源对细胞生长的影响第69-72页
        4.4.2 木糖、果糖与葡萄糖为碳源对展示细胞产酶的影响第72-74页
    4.5 本章小结第74-75页
第五章 纤维素水解物为碳源发酵AN-GPDA-CALB-CWPA研究第75-86页
    5.1 引言第75-76页
    5.2 材料与试剂第76-77页
        5.2.1 实验仪器与试剂第76-77页
    5.3 实验方法第77-79页
        5.3.0 菌种的活化与扩大培养第77页
        5.3.1 纤维素水解物制备第77页
        5.3.2 摇瓶发酵第77-78页
        5.3.3 参数测定第78页
        5.3.4 全细胞催化剂酶粉的制备第78页
        5.3.5 酯交换催化反应方法第78页
        5.3.6 薄层层析(TLC)检测第78页
        5.3.7 高效液相色谱色谱(HPLC)检测第78-79页
    5.4 结果与讨论第79-85页
        5.4.1 混合复配碳源发酵AN-GpdA-CALB-CwpA第79-80页
        5.4.2 纤维素水解物碳源发酵AN-GpdA-CALB-CwpA第80-82页
        5.4.3 纤维素水解物作为碳源发酵菌丝形态第82-83页
        5.4.4 黑曲霉表面展示脂肪酶在酯交换反应中的应用第83-85页
    5.5 本章小结第85-86页
结论与展望第86-89页
    结论第86-87页
    创新之处第87页
    展望第87-89页
参考文献第89-97页
附录第97-100页
攻读硕士学位期间取得的研究成果第100-101页
致谢第101-102页
附件第102页

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