摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
缩略词 | 第13-14页 |
第一章 绪论 | 第14-27页 |
1.1 丝状真菌表达系统简述 | 第14-17页 |
1.1.1 丝状真菌表达系统研究进展 | 第14-15页 |
1.1.2 丝状真菌的转化方法与筛选标记 | 第15-16页 |
1.1.3 丝状真菌表达系统中启动子的选择与应用 | 第16-17页 |
1.2 真核细胞表面展示系统的研究进展 | 第17-19页 |
1.2.1 酵母细胞表面展示技术 | 第17-18页 |
1.2.2 丝状真菌表面展示技术 | 第18-19页 |
1.3 南极假丝酵母脂肪酶B研究进展 | 第19-22页 |
1.3.1 脂肪酶简介及其特性 | 第19-20页 |
1.3.2 南极假丝酵母脂肪酶B的特性 | 第20-21页 |
1.3.3 南极假丝酵母脂肪酶B的应用 | 第21-22页 |
1.4 木质纤维素的水解与发酵应用 | 第22-24页 |
1.4.1 木质纤维素的特性 | 第22-23页 |
1.4.2 预处理与糖化 | 第23-24页 |
1.4.3 木质纤维素的发酵应用 | 第24页 |
1.5 本课题的研究意义及主要研究内容 | 第24-27页 |
1.5.1 本课题的研究意义 | 第24-26页 |
1.5.2 本课题的主要研究内容 | 第26-27页 |
第二章 组成型启动子P_(GPDA)在黑曲霉表面展示CALB中的应用 | 第27-56页 |
2.1 引言 | 第27-28页 |
2.2 材料与方法 | 第28-44页 |
2.2.1 实验材料 | 第28-32页 |
2.2.2 仪器和设备 | 第32-33页 |
2.2.3 实验方法 | 第33-44页 |
2.3 结果与讨论 | 第44-55页 |
2.3.1 无孢黑曲SH-1 基因组的提取 | 第44-45页 |
2.3.2 P_(gpdA)启动子基因与SS_(glaA)信号肽基因的融合及表达载体的构建 | 第45-48页 |
2.3.3 无孢黑曲霉原生质体的制备与转化 | 第48-50页 |
2.3.4 重组无孢黑曲霉菌株的筛选 | 第50-55页 |
2.4 本章小结 | 第55-56页 |
第三章 黑曲霉表面展示CALB脂肪酶的发酵特性研究 | 第56-68页 |
3.1 引言 | 第56页 |
3.2 材料与设备 | 第56-58页 |
3.2.1 菌种和质粒 | 第56页 |
3.2.2 主要仪器和设备 | 第56-57页 |
3.2.3 培养基配制 | 第57-58页 |
3.3 实验方法 | 第58-59页 |
3.3.1 菌种的活化与扩大培养 | 第58页 |
3.3.2 摇瓶发酵 | 第58页 |
3.3.3 2L发酵罐发酵 | 第58-59页 |
3.3.4 参数测定 | 第59页 |
3.4 结果与讨论 | 第59-67页 |
3.4.1 两种启动子用于展示CALB摇瓶水平发酵研究 | 第59-64页 |
3.4.2 两种启动子用于展示CALB发酵罐水平发酵研究 | 第64-67页 |
3.5 本章小结 | 第67-68页 |
第四章 非葡萄糖类碳源在黑曲霉表面展示CALB体系的发酵应用 | 第68-75页 |
4.1 引言 | 第68页 |
4.2 材料与试剂 | 第68-69页 |
4.2.1 实验试剂 | 第68-69页 |
4.3 实验方法 | 第69页 |
4.3.1 菌种的活化与扩大培养 | 第69页 |
4.3.2 摇瓶发酵 | 第69页 |
4.3.3 参数测定 | 第69页 |
4.4 结果与讨论 | 第69-74页 |
4.4.1 木糖、果糖与葡萄糖为碳源对细胞生长的影响 | 第69-72页 |
4.4.2 木糖、果糖与葡萄糖为碳源对展示细胞产酶的影响 | 第72-74页 |
4.5 本章小结 | 第74-75页 |
第五章 纤维素水解物为碳源发酵AN-GPDA-CALB-CWPA研究 | 第75-86页 |
5.1 引言 | 第75-76页 |
5.2 材料与试剂 | 第76-77页 |
5.2.1 实验仪器与试剂 | 第76-77页 |
5.3 实验方法 | 第77-79页 |
5.3.0 菌种的活化与扩大培养 | 第77页 |
5.3.1 纤维素水解物制备 | 第77页 |
5.3.2 摇瓶发酵 | 第77-78页 |
5.3.3 参数测定 | 第78页 |
5.3.4 全细胞催化剂酶粉的制备 | 第78页 |
5.3.5 酯交换催化反应方法 | 第78页 |
5.3.6 薄层层析(TLC)检测 | 第78页 |
5.3.7 高效液相色谱色谱(HPLC)检测 | 第78-79页 |
5.4 结果与讨论 | 第79-85页 |
5.4.1 混合复配碳源发酵AN-GpdA-CALB-CwpA | 第79-80页 |
5.4.2 纤维素水解物碳源发酵AN-GpdA-CALB-CwpA | 第80-82页 |
5.4.3 纤维素水解物作为碳源发酵菌丝形态 | 第82-83页 |
5.4.4 黑曲霉表面展示脂肪酶在酯交换反应中的应用 | 第83-85页 |
5.5 本章小结 | 第85-86页 |
结论与展望 | 第86-89页 |
结论 | 第86-87页 |
创新之处 | 第87页 |
展望 | 第87-89页 |
参考文献 | 第89-97页 |
附录 | 第97-100页 |
攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第100-101页 |
致谢 | 第101-102页 |
附件 | 第102页 |