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萝芙木MCT、HDS、SGD基因的克隆与遗传转化体系的建立

摘要第1-9页
Abstract第9-12页
第一章 文献综述第12-22页
   ·背景概况第12页
   ·萝芙木概况第12-13页
   ·萝芙木组织培养技术概况第13-15页
     ·器官发生途径第14页
     ·体细胞胚发生途径第14页
     ·农杆菌介导的遗传转化途径第14-15页
   ·萝芙木TIAs合成途径第15-16页
   ·萝芙木TIAs合成途径中的关键酶基因第16-20页
     ·1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸合成酶(DXS)第16-17页
     ·1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶(DXR)第17页
     ·2-C-甲基-D-赤藓醇-4-磷酸胱氨酰转移酶(MCT)第17页
     ·2-C-甲基赤藓醇-2,4-环焦磷酸合成酶(MECS)第17-18页
     ·羟甲基丁烯基-4-磷酸合成酶(HDS)第18页
     ·羟甲基丁烯基-4-磷酸还原酶(HDR)第18页
     ·色氨酸脱羧酶(TDC)第18-19页
     ·香叶醇-10-脱氢酶(G10H)第19页
     ·次番木鳖苷合成酶(SLS)第19-20页
     ·异胡豆苷合成酶(STR)第20页
     ·异胡豆苷-β-葡萄糖苷酶(SGD)第20页
   ·萜类吲哚生物碱的代谢工程第20-22页
第二章 绪论第22-24页
   ·研究目的和意义第22页
   ·研究范围和内容第22-23页
   ·技术路线第23-24页
第三章 材料与方法第24-40页
   ·植物材料第24页
   ·菌株和质粒第24页
   ·仪器和设备第24页
   ·试剂盒及试剂第24页
   ·自配试剂第24-25页
   ·常规方法介绍第25-27页
     ·RNA的提取第25-26页
     ·DNA产物的琼脂糖凝胶电泳第26页
     ·目的条带的回收第26页
     ·目的片段与克隆载体T连接第26-27页
     ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备(CaCl_2法)第27页
     ·连接反应物转化大肠杆菌感受态细胞第27页
   ·RvMCT、RvHDS和RvSGD基因的克隆与分析第27-35页
     ·从萝芙木总RNA合成第一链cDNA第28页
     ·RvMCT、RvHDS和RvSGD基因的克隆第28-33页
     ·RvMCT、RvHDS和RvSGD基因的生物信息学分析第33页
     ·RvMCT、RvHDS和RvSGD基因的组织表达谱分析第33-35页
   ·萝芙木高效再生体系的建立第35-36页
     ·萝芙木无菌苗快繁体系的建立第35页
     ·萝芙木愈伤组织的诱导第35页
     ·萝芙木悬浮细胞体系的建立第35页
     ·萝芙木愈伤组织的再生第35-36页
   ·萝芙木发根遗传体系的建立第36-40页
     ·发根农杆菌C58C1的活化第36页
     ·发根农杆菌C58C1转化萝芙木外植体第36页
     ·萝芙木发根的PCR鉴定第36-37页
     ·萝芙木发根中阿玛碱含量的检测第37-40页
第四章 结果与分析第40-62页
   ·RvMCT基因的获得和分析第40-45页
     ·RvMCT基因的获得第40-41页
     ·RvMCT基因的生物信息学分析第41-45页
     ·RvMCT基因的组织表达谱分析第45页
   ·RvHDS基因的获得和分析第45-51页
     ·RvHDS基因的获得第45-46页
     ·RvHDS基因的生物信息学分析第46-51页
     ·RvHDS基因的组织表达谱分析第51页
   ·RvSGD基因的获得和分析第51-55页
     ·RvSGD基因的获得第51-52页
     ·RvSGD基因的生物信息学分析第52-55页
     ·RvSGD基因的组织表达谱分析第55页
   ·萝芙木高效再生体系的建立第55-57页
     ·萝芙木无菌苗体系的建立第55页
     ·萝芙木愈伤组织的诱导第55-56页
     ·萝芙木愈伤组织的植株再生第56-57页
   ·萝芙木发根遗传体系的建立第57-60页
     ·萝芙木发根的诱导第57-59页
     ·萝芙木发根中阿玛碱含量的检测第59-60页
   ·结论与展望第60-62页
参考文献第62-68页
附录第68-72页
 缩略词表第68-70页
 攻读硕士学位期间发表的论文第70-72页
致谢第72-73页

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