| 符号说明 | 第1-12页 |
| 中文摘要 | 第12-15页 |
| Abstract | 第15-18页 |
| 1. 前言 | 第18-37页 |
| ·β-内酰胺酶 | 第18-25页 |
| ·β-内酰胺酶耐药机制 | 第19-20页 |
| ·β-内酰胺酶的分类 | 第20-21页 |
| ·超广谱β内酰胺酶的定义及类型 | 第21-23页 |
| ·超广谱β内酰胺酶分布及流行 | 第23-24页 |
| ·检测方法 | 第24-25页 |
| ·产ESBL大肠杆菌的研究进展 | 第25-27页 |
| ·院内环境与社区环境中的产ESBL大肠杆菌 | 第25-26页 |
| ·畜牧养殖环境中的产ESBL大肠杆菌 | 第26-27页 |
| ·基因的转移 | 第27-31页 |
| ·细菌间耐药基因转移 | 第28-30页 |
| ·转移机制 | 第28-29页 |
| ·转移方式 | 第29-30页 |
| ·细菌接合转移机制 | 第30-31页 |
| ·ESBL基因的接合转移 | 第31页 |
| ·蛋白质组学 | 第31-37页 |
| ·蛋白质组学的功能与分类 | 第32-33页 |
| ·蛋白质组学技术 | 第33-35页 |
| ·差异蛋白质组学技术 | 第35-37页 |
| 2. 材料和方法 | 第37-64页 |
| ·实验材料 | 第37-40页 |
| ·实验所用菌株 | 第37页 |
| ·所用试剂盒 | 第37页 |
| ·所用培养基 | 第37-38页 |
| ·试剂的配制 | 第38-39页 |
| ·分子生物学试剂配制 | 第38页 |
| ·蛋白质组学试剂配制 | 第38-39页 |
| ·仪器设备 | 第39-40页 |
| ·试验方法 | 第40-64页 |
| ·山东地区养猪环境中产ESBL大肠杆菌的流行情况及分子特点的研究 | 第40-44页 |
| ·样品的采集 | 第40-41页 |
| ·大肠杆菌的分离与鉴定 | 第41页 |
| ·产ESBL大肠杆菌的筛选与确定 | 第41-42页 |
| ·药敏试验 | 第42页 |
| ·模板的制备 | 第42页 |
| ·耐药基因的检测 | 第42-43页 |
| ·统计分析 | 第43-44页 |
| ·养殖环境中产ESBL大肠杆菌对土壤的污染情况研究 | 第44-47页 |
| ·样品的采集 | 第44页 |
| ·产ESBL大肠杆菌的分离与鉴定 | 第44页 |
| ·ESBL确证实验 | 第44页 |
| ·药敏表型 | 第44-45页 |
| ·基因型的鉴定 | 第45-46页 |
| ·质粒复制子分析 | 第46页 |
| ·同源性分析 | 第46-47页 |
| ·饲料添加剂膨润土对ESBL耐药基因CTX-M-15耐药基因传播中的作用研究 | 第47-50页 |
| ·接合菌株的筛选与验证 | 第47页 |
| ·供体菌及受体菌最小抑菌浓度的测定 | 第47页 |
| ·膨润土存在条件下耐药基因的水平转移实验 | 第47-49页 |
| ·膨润土促进CTX-M转移的条件的优化 | 第49-50页 |
| ·膨润土刺激下CTX-M-15耐药基因水平传播的差异蛋白质组研究 | 第50-55页 |
| ·蛋白提取 | 第50页 |
| ·蛋白纯化 | 第50页 |
| ·蛋白浓度测定与验证 | 第50-51页 |
| ·水化 | 第51页 |
| ·等电聚焦 | 第51-52页 |
| ·双向电泳 | 第52-53页 |
| ·染色 | 第53-54页 |
| ·扫描及分析 | 第54页 |
| ·蛋白胶内酶解 | 第54页 |
| ·蛋白质质谱鉴定 | 第54-55页 |
| ·膨润土刺激条件下蛋白的转录水平及其作用研究 | 第55-64页 |
| ·膨润土刺激条件下基因转录水平表达量的变化 | 第55-58页 |
| ·克隆载体的构建pMD18-T-tolC/malE/mipA/ybiT | 第58-61页 |
| ·表达载体的构建 | 第61-63页 |
| ·不同蛋白对膨润土刺激条件下耐药基因水平传播实验 | 第63-64页 |
| 3. 实验结果 | 第64-85页 |
| ·山东地区养猪环境中产ESBL大肠杆菌的流行情况及分子特点的研究 | 第64-68页 |
| ·产ESBL大肠杆菌阳性样品的流行情况 | 第64页 |
| ·产ESBL大肠杆菌的流行情况 | 第64-65页 |
| ·产ESBL大肠杆菌的耐药性 | 第65-67页 |
| ·ESBL基因 | 第67-68页 |
| ·养殖场中产ESBL大肠杆菌对土壤的影响 | 第68-73页 |
| ·土壤和粪便中产ESBL大肠杆菌的分离 | 第68-69页 |
| ·耐药表型 | 第69-70页 |
| ·ESBL基因 | 第70-71页 |
| ·复制子 | 第71-73页 |
| ·同源性分析 | 第73页 |
| ·饲料添加剂膨润土对ESBL耐药基因CTX-M-15耐药基因传播中的作用研究 | 第73-75页 |
| ·接合菌株的筛选与验证 | 第73页 |
| ·接合实验的验证 | 第73-74页 |
| ·膨润土存在条件下耐药基因的水平转移实验 | 第74-75页 |
| ·膨润土促进CTX-M转移的条件的优化 | 第75页 |
| ·膨润土刺激下CTX-M-15耐药基因水平传播的差异蛋白质组研究 | 第75-79页 |
| ·双向电泳条件的摸索 | 第75-77页 |
| ·蛋白的提取及浓度测定 | 第75页 |
| ·双向电泳蛋白条件摸索 | 第75-77页 |
| ·膨润土存在条件下共培养菌株的双向电泳的图谱及差异蛋白分析 | 第77-79页 |
| ·膨润土刺激下CTX-M-15水平传播蛋白的转录水平及其作用研究 | 第79-85页 |
| ·引物特异性 | 第79-81页 |
| ·膨润土刺激条件下基因转录水平差异表达 | 第81-82页 |
| ·克隆载体的构建与验证 | 第82-83页 |
| ·表达载体的构建与验证 | 第83-84页 |
| ·不同蛋白对耐药基因水平传播的影响 | 第84-85页 |
| 4. 讨论 | 第85-92页 |
| ·山东地区产ESBL大肠杆菌的流行情况 | 第85-86页 |
| ·农田中粪便的使用有利于产ESBL大肠杆菌向环境的传播 | 第86-88页 |
| ·饲料添加剂膨润土对CTX-M-15基因转移的促进作用 | 第88-89页 |
| ·膨润土作用条件下接合转移过程中细菌的比较蛋白质组学研究 | 第89-91页 |
| ·通道蛋白及转运蛋白的转录水平研究及对接合转移的作用 | 第91-92页 |
| 5. 结论 | 第92-93页 |
| 6. 参考文献 | 第93-105页 |
| 7. 附录 | 第105-108页 |
| 8. 致谢 | 第108-109页 |
| 9. 攻读学位期间发表论文情况 | 第109页 |
