| 中文摘要 | 第1-15页 |
| ABSTRACT | 第15-18页 |
| 1. 引言 | 第18-34页 |
| ·坦布苏病毒的研究进展 | 第18-27页 |
| ·坦布苏病毒感染的概况 | 第18-19页 |
| ·坦布苏病毒的分类及形态结构 | 第19页 |
| ·坦布苏病毒基因组结构和编码蛋白 | 第19-20页 |
| ·坦布苏病毒的理化特性和培养特点 | 第20页 |
| ·坦布苏病毒感染的流行病学 | 第20-21页 |
| ·坦布苏病毒的分离现状 | 第21-22页 |
| ·坦布苏病毒的致病性 | 第22-24页 |
| ·坦布苏病毒感染的检测 | 第24-26页 |
| ·坦布苏病毒疫苗的研究现状 | 第26-27页 |
| ·病毒反向遗传操作的研究进展 | 第27-30页 |
| ·反向遗传操作的概述 | 第27页 |
| ·黄病毒科病毒感染性克隆毒株的拯救 | 第27-30页 |
| ·黄病毒 3’非编码区功能研究进展 | 第30-33页 |
| ·黄病毒的复制特点 | 第30-31页 |
| ·CS序列的相关研究 | 第31-32页 |
| ·末端CU的相关研究 | 第32页 |
| ·SL结构的相关研究 | 第32-33页 |
| ·研究的目的和意义 | 第33-34页 |
| 2. 两株鸭、鹅源TMUV的分离鉴定和全基因组分析 | 第34-47页 |
| ·材料与方法 | 第35-39页 |
| ·样品来源和抗体 | 第35页 |
| ·鸭胚、细胞和菌株 | 第35页 |
| ·相关试剂 | 第35页 |
| ·主要仪器 | 第35页 |
| ·引物设计 | 第35-36页 |
| ·病毒的分离 | 第36-37页 |
| ·病毒的鉴定 | 第37页 |
| ·病毒的毒力和致病力 | 第37-38页 |
| ·坦布苏病毒ZC株全基因组测序 | 第38-39页 |
| ·结果与讨论 | 第39-47页 |
| ·两株TMUV分离株的分离 | 第39-40页 |
| ·两株TMUV分离株的致病性 | 第40-41页 |
| ·IFA结果 | 第41-42页 |
| ·两株TMUV全基因组序列测定与分析 | 第42-45页 |
| ·讨论 | 第45-47页 |
| 3. TMUV ZC株全长c DNA重组载体的构建 | 第47-57页 |
| ·材料与方法 | 第47-52页 |
| ·毒株与载体 | 第47页 |
| ·相关试剂 | 第47页 |
| ·载体多克隆位点改造 | 第47-48页 |
| ·引物设计 | 第48-49页 |
| ·目的基因的扩增 | 第49-50页 |
| ·ZC株c DNA全长片段的连接 | 第50-51页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第51-52页 |
| ·结果与分析 | 第52-57页 |
| ·TMUV ZC株RT-PCR结果 | 第52页 |
| ·p WSK29质粒改造 | 第52-53页 |
| ·全长c DNA的分段连接和初步鉴定 | 第53-54页 |
| ·重组质粒序列测定与分析 | 第54页 |
| ·讨论 | 第54-57页 |
| 4. TMUV ZC株全长c DNA感染性克隆毒株的拯救与鉴定 | 第57-70页 |
| ·材料与方法 | 第57-62页 |
| ·细胞与毒株 | 第57页 |
| ·相关试剂 | 第57-58页 |
| ·体外转录RNA的准备 | 第58-60页 |
| ·转染BHK-21细胞 | 第60-61页 |
| ·拯救毒株生长曲线的测定 | 第61-62页 |
| ·拯救毒株的间接免疫荧光鉴定 | 第62页 |
| ·RT-PCR基因组全长测定 | 第62页 |
| ·TCID50的测定 | 第62页 |
| ·鸭胚ELD50的测定 | 第62页 |
| ·雏鸭致病性试验 | 第62页 |
| ·结果与讨论 | 第62-70页 |
| ·体外转录结果 | 第62-63页 |
| ·RT-PCR初步检测 | 第63页 |
| ·病毒的一步生长曲线 | 第63-66页 |
| ·IFA结果 | 第66-67页 |
| ·拯救病毒RT-PCR检测 | 第67页 |
| ·细胞和鸭胚的致病性结果 | 第67页 |
| ·拯救毒株对雏鸭的致病性 | 第67-68页 |
| ·讨论 | 第68-70页 |
| ·’非编码区部分生物学功能的初步研究 | 第70-81页 |
| ·材料与方法 | 第70-75页 |
| ·载体和细胞 | 第70页 |
| ·主要试剂 | 第70-71页 |
| ·引物设计 | 第71-72页 |
| ·3’末端-CU 点突变 | 第72页 |
| ·3’非编码区 CS 序列突变 | 第72-74页 |
| ·突变衍生重组真核表达质粒的构建 | 第74页 |
| ·体外转录和转染BHK21细胞 | 第74-75页 |
| ·间接免疫荧光检测 | 第75页 |
| ·衍生毒株一步生长曲线的测定 | 第75页 |
| ·结果与讨论 | 第75-81页 |
| ·突变序列的扩增结果 | 第75-76页 |
| ·突变载体的构建和序列测定结果 | 第76页 |
| ·突变病毒的拯救结果 | 第76页 |
| ·RT-PCR检测 | 第76-77页 |
| ·IFA结果 | 第77-78页 |
| ·衍生病毒的一步生长曲线 | 第78页 |
| ·讨论 | 第78-81页 |
| 6. 结论 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-96页 |
| 附录 | 第96-106页 |
| 致谢 | 第106-107页 |
| 博士在读期间发表的论文 | 第107页 |
