中文摘要 | 第1-15页 |
Abstract | 第15-18页 |
1 前言 | 第18-31页 |
·泛素/26S蛋白酶体系统 | 第18-24页 |
·泛素 | 第19-20页 |
·泛素活化酶 | 第20页 |
·泛素结合酶 | 第20页 |
·泛素连接酶 | 第20-23页 |
·26S蛋白酶体 | 第23-24页 |
·UPS与非生物胁迫耐性 | 第24-26页 |
·泛素(Ub)在非生物胁迫中的作用 | 第24页 |
·U-box与非生物胁迫耐性 | 第24-26页 |
·UPS与生物胁迫 | 第26-28页 |
·泛素与生物胁迫 | 第27页 |
·U-box与生物胁迫 | 第27-28页 |
·UPS与植物的生长发育 | 第28-30页 |
·泛素对植物生长发育的影响 | 第28页 |
·U-box蛋白与植物激素对植物生长发育的调控 | 第28-30页 |
·本研究的目的意义 | 第30-31页 |
2 材料与方法 | 第31-49页 |
·实验材料 | 第31-33页 |
·植物材料 | 第31页 |
·材料的培养和处理 | 第31页 |
·小麦的培养和处理 | 第31页 |
·烟草的培养及处理 | 第31页 |
·菌株和质粒 | 第31页 |
·酶与各种生化试剂 | 第31页 |
·PCR引物 | 第31-33页 |
·实验方法 | 第33-49页 |
·利用Trizol试剂盒提取RNA | 第33-34页 |
·反转录cDNA第一条链的合成 | 第34页 |
·CTAB法提取植物基因组DNA | 第34-35页 |
·3′RACE | 第35-37页 |
·真核表达载体的构建 | 第37页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第37-38页 |
·转化菌落PCR鉴定 | 第38页 |
·质粒的提取 | 第38页 |
·目的片段和质粒DNA的酶切鉴定 | 第38-39页 |
·目的片段与质粒DNA的连接 | 第39页 |
·根癌农杆菌LBA4404感受态细胞的制备和转化 | 第39-40页 |
·根癌农杆菌LBA4404感受态细胞的制备 | 第39页 |
·冻融法转化根癌农杆菌LBA4404 | 第39-40页 |
·TaPUB1::GFP融合蛋白亚细胞定位 | 第40-41页 |
·农杆菌介导的植物转化 | 第41-42页 |
·转基因植株的PCR检测 | 第42-43页 |
·荧光定量PCR检测基因的表达 | 第43页 |
·蛋白杂交分析 | 第43-46页 |
·生理指标的测定 | 第46-47页 |
·植物对病原菌抗性分析 | 第47-48页 |
·统计分析 | 第48-49页 |
3 结果与分析 | 第49-79页 |
·TaUb2过表达烟草对病原菌的抗性 | 第49-54页 |
·TaUb2过表达烟草对Pst DC3000抗性的表型观察 | 第49-50页 |
·TaUb2过表达改变了烟草叶片气孔对Pst DC3000的响应 | 第50-51页 |
·Pst DC3000感染对转基因烟草抗氧化方面的影响 | 第51-52页 |
·Pst DC3000使转基因烟草发生ROS迸发并诱导HR反应 | 第52-53页 |
·Pst DC3000感染诱发疾病相关基因的表达 | 第53-54页 |
·小麦U-box基因Ta PUB1的分离及序列特征分析 | 第54-57页 |
·小麦U-box基因TaPUB1的分离 | 第54-55页 |
·TaPUB1全长cDNA及编码蛋白质序列的特征分析 | 第55-56页 |
·TaPUB1序列系统发生分析 | 第56-57页 |
·TaPUB1的亚细胞定位 | 第57-58页 |
·TaPUB1基因在小麦中的表达模式分析 | 第58-60页 |
·TaPUB1基因在小麦不同器官中的表达模式 | 第58页 |
·小麦中TaPUB1基因表达水平对不同逆境胁迫处理的响应 | 第58-60页 |
·TaPUB1基因表达对激素的响应模式 | 第60页 |
·TaPUB1抗体制备 | 第60-62页 |
·原核表达载体pET-TaPUB1的构建 | 第60-61页 |
·TaPUB1蛋白表达及抗体获得 | 第61-62页 |
·TaPUB1基因在本生烟中的遗传转化 | 第62-64页 |
·35S::TaPUB1真核表达载体的构建 | 第62-63页 |
·转TaPUB1本生烟阳性植株的筛选 | 第63-64页 |
·过表达TaPUB1本生烟的耐盐性分析 | 第64-73页 |
·过表达TaPUB1对盐胁迫下本生烟种子萌发及幼苗生长的影响 | 第64-65页 |
·过表达TaPUB1对盐胁迫下成苗期本生烟耐盐性的影响 | 第65-68页 |
·盐胁迫对野生型和过表达本生烟渗透调节能力及Na+、K+的影响 | 第68-69页 |
·过量表达TaPUB1增强了转基因本生烟的抗氧化能力 | 第69-73页 |
·过表达TaPUB1转基因本生烟对其它逆境胁迫的耐性 | 第73-75页 |
·过表达TaPUB1转基因本生烟对水分胁迫的耐性 | 第73-74页 |
·过表达TaPUB1本生烟对重金属胁迫的耐性 | 第74-75页 |
·过表达TaPUB1本生烟对Pst DC3000感染的影响 | 第75页 |
·过表达TaPUB1对转基因植株生长发育的影响 | 第75-79页 |
4 讨论 | 第79-85页 |
·过表达TaUb2提高了转基因烟草对病原菌的抗性 | 第79-81页 |
·小麦TaPUB1的克隆及其在逆境胁迫耐性中的功能分析 | 第81-85页 |
5 结论 | 第85-86页 |
参考文献 | 第86-98页 |
致谢 | 第98-99页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第99页 |