| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-16页 |
| 1. 灰葡萄孢研究进展 | 第10-15页 |
| ·灰葡萄孢的分布和危害 | 第10页 |
| ·灰葡萄孢的分类地位及生物学特性 | 第10-11页 |
| ·灰霉病的病害循环 | 第11页 |
| ·灰葡萄孢的致病因子 | 第11-12页 |
| ·灰葡萄孢菌核形成相关因素 | 第12-13页 |
| ·灰霉病的防治 | 第13-14页 |
| ·灰葡萄孢遗传转化研究进展 | 第14-15页 |
| 2. 研究目的与意义 | 第15-16页 |
| 第二章 灰葡萄孢中基因敲除转化子的获得与验证 | 第16-33页 |
| 1. 试验材料 | 第16-18页 |
| ·菌株 | 第16页 |
| ·培养基 | 第16-17页 |
| ·载体 | 第17页 |
| ·实验试剂 | 第17-18页 |
| ·试验仪器 | 第18页 |
| 2. 实验方法 | 第18-26页 |
| ·基因的获得 | 第18页 |
| ·基因相对表达量测定 | 第18-21页 |
| ·总RNA提取 | 第18-19页 |
| ·cDNA合成 | 第19-20页 |
| ·qRT-PCR检测基因的相对表达量表达 | 第20-21页 |
| ·基因敲除 | 第21-26页 |
| ·同源重组原理 | 第21页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第21-22页 |
| ·转化用片段的扩增 | 第22-24页 |
| ·PEG介导的原生质体转化 | 第24-26页 |
| ·灰葡萄孢基因敲除转化子的验证 | 第26页 |
| ·基因敲除转化子的PCR验证 | 第26页 |
| 3. 试验结果与分析 | 第26-33页 |
| ·灰葡萄孢中BC1G_10330、BC1G_02018和BC1G_06890基因的序列分析 | 第26-27页 |
| ·基因表达差异验证 | 第27-28页 |
| ·基因敲除转化子的获得与验证 | 第28-31页 |
| ·灰葡萄孢基因BC1G_10330的敲除与验证 | 第28-29页 |
| ·灰葡萄孢基因BC1G_02018的敲除与验证 | 第29-30页 |
| ·灰葡萄孢基因BC1G_06890的敲除与验证 | 第30-31页 |
| ·小结与讨论 | 第31-33页 |
| 第三章 灰葡萄孢基因BC1G_10330、BC1G_02018和BC1G_06890的基因功能初步研究 | 第33-44页 |
| 1. 实验材料 | 第33页 |
| ·试验菌株 | 第33页 |
| ·培养基 | 第33页 |
| 2. 试验方法 | 第33-35页 |
| ·菌丝生长速度测定 | 第33页 |
| ·转化子菌丝尖端形态 | 第33-34页 |
| ·转化子产孢量测定 | 第34页 |
| ·转化子菌落形态观察 | 第34页 |
| ·转化子产酸能力测定 | 第34页 |
| ·转化子致病力测定 | 第34-35页 |
| ·转化子菌核形成过程及菌核分布形态情况 | 第35页 |
| ·转化子菌核生物学性状研究 | 第35页 |
| 3. 试验结果 | 第35-42页 |
| ·转化子的菌丝生长速度 | 第35-36页 |
| ·转化子菌丝尖端形态 | 第36页 |
| ·转化子产孢量测定 | 第36-37页 |
| ·转化子菌落形态观察 | 第37-38页 |
| ·转化子产酸能力测定 | 第38页 |
| ·转化子的致病力测定 | 第38-40页 |
| ·转化子菌核形成过程及菌核产生情况 | 第40-42页 |
| 4. 小结与讨论 | 第42-44页 |
| 第四章 总结与展望 | 第44-46页 |
| 参考文献 | 第46-51页 |
| 致谢 | 第51页 |