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猪流行性腹泻病毒S1蛋白亲和肽的筛选与鉴定

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-10页
1 引言第10-25页
   ·猪流行性腹泻研究进展第10-18页
     ·猪流行性腹泻的历史背景第10页
     ·猪流行性腹泻病毒第10-15页
     ·猪流行性腹泻的流行病学第15页
     ·猪流行性腹泻的临床症状和病理变化第15-16页
     ·猪流行性腹泻诊断方法第16-18页
   ·PEDV S 蛋白研究进展第18-19页
   ·噬菌体展示技术的研究进展第19-24页
     ·噬菌体展示技术的基本原理第19-20页
     ·噬菌体展示系统的类型第20-22页
     ·噬菌体展示技术的应用第22-24页
   ·研究的目的与意义第24-25页
2 材料与方法第25-41页
   ·实验材料第25-28页
     ·实验动物第25页
     ·菌种、载体及质粒第25页
     ·工具酶、试剂盒和抗体试剂第25页
     ·标准参照物第25页
     ·实验试剂的配制第25-27页
     ·仪器设备第27-28页
   ·实验方法第28-40页
     ·原核表达载体的构建第28-31页
     ·重组质粒在大肠杆菌表达系统中的诱导表达第31-32页
     ·重组蛋白的纯化、复性及活性鉴定第32-33页
     ·多克隆抗血清的制备第33-34页
     ·多克隆抗血清的鉴定及生物活性的检测第34-35页
     ·噬菌体随机十二肽库对靶分子亲和配体的生物淘选第35-37页
     ·结合克隆的特征鉴定第37-39页
     ·所选多肽配体共有氨基酸序列的推导及合成第39-40页
     ·所选多肽的生物活性鉴定第40页
     ·噬菌体体内抗病毒活性第40页
   ·数据处理第40-41页
3 结果第41-51页
   ·原核表达载体pET30a-S1 的构建第41-42页
     ·S1 基因的亚克隆第41页
     ·重组表达质粒的PCR 鉴定和限制性酶切鉴定第41-42页
   ·重组蛋白的表达及活性鉴定第42-44页
     ·重组蛋白的表达第42页
     ·重组蛋白的纯化第42-43页
     ·重组蛋白的活性鉴定第43-44页
   ·S1 多克隆抗血清的制备及活性鉴定第44-46页
     ·多克隆抗血清效价的测定第44页
     ·多克隆抗血清的免疫荧光实验结果第44-45页
     ·多克隆抗血清的病毒抑制试验结果第45-46页
   ·噬菌体十二肽库对S1 重组蛋白亲和配体的生物淘选第46-51页
     ·噬菌体十二肽库对靶分子的四轮淘洗结果第46-48页
     ·所选多肽的生物活性检测结果第48-49页
     ·小鼠外周血液抗PEDV IgG 抗体含量动态变化第49页
     ·小鼠外周血液抗S1 蛋白IgG 抗体含量动态变化第49-51页
4 讨论第51-55页
   ·S1 基因在大肠杆菌中的表达第51页
   ·S1 基因原核载体表达质粒的设计与构建第51页
   ·S1 基因的原核表达及表达条件的优化第51-52页
   ·重组蛋白的纯化与活性鉴定第52-53页
   ·多克隆抗血清的制备及活性鉴定第53页
   ·S1 蛋白亲和肽的筛选与鉴定第53-54页
   ·噬菌体体内免疫试验第54-55页
5 结论第55-56页
致谢第56-57页
参考文献第57-66页
附录第66-68页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第68页

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