中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-10页 |
1 引言 | 第10-25页 |
·猪流行性腹泻研究进展 | 第10-18页 |
·猪流行性腹泻的历史背景 | 第10页 |
·猪流行性腹泻病毒 | 第10-15页 |
·猪流行性腹泻的流行病学 | 第15页 |
·猪流行性腹泻的临床症状和病理变化 | 第15-16页 |
·猪流行性腹泻诊断方法 | 第16-18页 |
·PEDV S 蛋白研究进展 | 第18-19页 |
·噬菌体展示技术的研究进展 | 第19-24页 |
·噬菌体展示技术的基本原理 | 第19-20页 |
·噬菌体展示系统的类型 | 第20-22页 |
·噬菌体展示技术的应用 | 第22-24页 |
·研究的目的与意义 | 第24-25页 |
2 材料与方法 | 第25-41页 |
·实验材料 | 第25-28页 |
·实验动物 | 第25页 |
·菌种、载体及质粒 | 第25页 |
·工具酶、试剂盒和抗体试剂 | 第25页 |
·标准参照物 | 第25页 |
·实验试剂的配制 | 第25-27页 |
·仪器设备 | 第27-28页 |
·实验方法 | 第28-40页 |
·原核表达载体的构建 | 第28-31页 |
·重组质粒在大肠杆菌表达系统中的诱导表达 | 第31-32页 |
·重组蛋白的纯化、复性及活性鉴定 | 第32-33页 |
·多克隆抗血清的制备 | 第33-34页 |
·多克隆抗血清的鉴定及生物活性的检测 | 第34-35页 |
·噬菌体随机十二肽库对靶分子亲和配体的生物淘选 | 第35-37页 |
·结合克隆的特征鉴定 | 第37-39页 |
·所选多肽配体共有氨基酸序列的推导及合成 | 第39-40页 |
·所选多肽的生物活性鉴定 | 第40页 |
·噬菌体体内抗病毒活性 | 第40页 |
·数据处理 | 第40-41页 |
3 结果 | 第41-51页 |
·原核表达载体pET30a-S1 的构建 | 第41-42页 |
·S1 基因的亚克隆 | 第41页 |
·重组表达质粒的PCR 鉴定和限制性酶切鉴定 | 第41-42页 |
·重组蛋白的表达及活性鉴定 | 第42-44页 |
·重组蛋白的表达 | 第42页 |
·重组蛋白的纯化 | 第42-43页 |
·重组蛋白的活性鉴定 | 第43-44页 |
·S1 多克隆抗血清的制备及活性鉴定 | 第44-46页 |
·多克隆抗血清效价的测定 | 第44页 |
·多克隆抗血清的免疫荧光实验结果 | 第44-45页 |
·多克隆抗血清的病毒抑制试验结果 | 第45-46页 |
·噬菌体十二肽库对S1 重组蛋白亲和配体的生物淘选 | 第46-51页 |
·噬菌体十二肽库对靶分子的四轮淘洗结果 | 第46-48页 |
·所选多肽的生物活性检测结果 | 第48-49页 |
·小鼠外周血液抗PEDV IgG 抗体含量动态变化 | 第49页 |
·小鼠外周血液抗S1 蛋白IgG 抗体含量动态变化 | 第49-51页 |
4 讨论 | 第51-55页 |
·S1 基因在大肠杆菌中的表达 | 第51页 |
·S1 基因原核载体表达质粒的设计与构建 | 第51页 |
·S1 基因的原核表达及表达条件的优化 | 第51-52页 |
·重组蛋白的纯化与活性鉴定 | 第52-53页 |
·多克隆抗血清的制备及活性鉴定 | 第53页 |
·S1 蛋白亲和肽的筛选与鉴定 | 第53-54页 |
·噬菌体体内免疫试验 | 第54-55页 |
5 结论 | 第55-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-66页 |
附录 | 第66-68页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第68页 |