| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 英文符号说明 | 第9-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-28页 |
| ·模式生物果蝇 | 第13-14页 |
| ·果蝇顺式调控序列 | 第14-21页 |
| ·顺式调控序列简介 | 第15-16页 |
| ·顺式调控序列与果蝇刚毛 | 第16-18页 |
| ·顺式调控序列与果蝇色素沉积 | 第18-20页 |
| ·顺式调控序列与果蝇胚胎发育 | 第20-21页 |
| ·果蝇背板刚毛研究 | 第21-24页 |
| ·果蝇背板刚毛发育 | 第21-22页 |
| ·果蝇背板刚毛调控 | 第22-23页 |
| ·果蝇extramacrochaetae(emc)基因 | 第23-24页 |
| ·顺式调控序列研究方法 | 第24-27页 |
| ·荧光素酶报告基因分析 | 第25页 |
| ·增强子/报告基因(Enhancer/reporter)转基因果蝇 | 第25-27页 |
| ·研究的目的意义 | 第27-28页 |
| 2 材料与方法 | 第28-45页 |
| ·试验材料 | 第28-31页 |
| ·试验动物 | 第28页 |
| ·试验菌株、细胞和载体 | 第28页 |
| ·主要试验试剂及配制 | 第28-30页 |
| ·果蝇培养试剂 | 第28页 |
| ·核酸提取试剂 | 第28-29页 |
| ·电泳相关试剂 | 第29页 |
| ·载体构建及点突变试剂 | 第29-30页 |
| ·细胞实验相关试剂 | 第30页 |
| ·其它试剂 | 第30页 |
| ·主要仪器 | 第30-31页 |
| ·试验方法 | 第31-45页 |
| ·果蝇emc基因上游序列生物信息分析 | 第31-32页 |
| ·果蝇emc基因上游非编码序列的获取 | 第31-32页 |
| ·果蝇emc潜在的Pnr和lro-C结合元件和结合位点预测 | 第32页 |
| ·果蝇基因组DNA提取和检测 | 第32-33页 |
| ·荧光素酶报告基因载体构建 | 第33-39页 |
| ·引物设计 | 第34页 |
| ·PCR扩增 | 第34-35页 |
| ·PCR产物的鉴定和胶回收 | 第35页 |
| ·TA连接反应 | 第35页 |
| ·转化 | 第35-36页 |
| ·TA克隆鉴定 | 第36-37页 |
| ·酶切 | 第37页 |
| ·连接 | 第37页 |
| ·转化和pGL3-hsp promoter重组菌落筛选 | 第37-38页 |
| ·pGL3-hsp promoter-emc Enhancer重组载体构建 | 第38-39页 |
| ·定点突变荧光素酶报告载体构建 | 第39-41页 |
| ·反向PCR | 第39-40页 |
| ·Dpn I消化 | 第40页 |
| ·自身环化 | 第40页 |
| ·转化 | 第40-41页 |
| ·突变体鉴别 | 第41页 |
| ·细胞转染及荧光素酶检测 | 第41-43页 |
| ·HEK293T细胞复苏 | 第41页 |
| ·HEK293T细胞传代 | 第41-42页 |
| ·HEK293T细胞瞬时转染 | 第42-43页 |
| ·荧光素酶检测 | 第43页 |
| ·转基因果蝇品系构建及分析 | 第43-45页 |
| ·增强子-EGFP转基因载体构建 | 第43-44页 |
| ·显微注射及构建转基因果蝇 | 第44页 |
| ·转基因果蝇分析 | 第44-45页 |
| 3 试验结果与分析 | 第45-54页 |
| ·果蝇emc基因上游潜在的Pnr和Iro-C结合位点 | 第45-49页 |
| ·调控序列荧光素酶报告基因载体 | 第49-50页 |
| ·荧光素酶报告基因分析结果 | 第50-53页 |
| ·构建转基因果蝇 | 第53页 |
| ·转基因果蝇翅原基(wing disc)中EGFP表达模式分析 | 第53-54页 |
| 4 讨论 | 第54-58页 |
| ·果蝇emc基因上游保守非编码元件 | 第55页 |
| ·调控emc基因的顺式调控元件emcE6 | 第55-56页 |
| ·Pnr参与emc基因的调控 | 第56-57页 |
| ·emc与sc基因调控的协同进化 | 第57页 |
| ·Iro-C与emc基因 | 第57-58页 |
| 5 结论 | 第58页 |
| 6 创新点与展望 | 第58-60页 |
| ·本研究主要创新点 | 第58页 |
| ·展望 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第69页 |
