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水稻BI-1基因的克隆与功能分析

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
第一章 文献综述第10-21页
 1. 植物逆境生理第10-13页
   ·干旱胁迫对植物的影响第10-11页
   ·高温胁迫对植物的影响第11-12页
   ·低温胁迫对植物的影响第12-13页
   ·高盐胁迫对植物的影响第13页
 2 细胞凋亡第13-17页
   ·活性氧在细胞凋亡中的作用第14-15页
   ·细胞色素C对细胞凋亡的调节第15-16页
   ·CaMBP对细胞凋亡的作用第16页
   ·细菌在细胞凋亡中的作用第16-17页
 3 细胞程序性死亡第17-18页
 4 BI-1(Bax Inhibitor-1)基因第18-20页
 5 本研究的目的和意义第20-21页
第二章 水稻OsBI-1的克隆与分析第21-36页
 1. 材料与方法第21-31页
   ·植物材料、菌种和载体第21页
   ·主要仪器设备第21-22页
   ·主要试剂及培养基第22-23页
     ·主要试剂第22页
     ·主要培养基第22-23页
   ·实验方法第23-31页
     ·水稻日本晴的处理第23-24页
     ·水稻幼苗RNA的提取与纯化第24-25页
     ·RNA反转录第25-26页
     ·OsBI-1基因的克隆第26-29页
     ·半定量RT-PCR第29-31页
 2. 结果与分析第31-36页
   ·OsBI-1的克隆第31页
   ·OsBI-1基因的序列分析第31-33页
     ·OsBI-1结构与功能预测第31-32页
     ·OsBI-1蛋白质结构的分析第32-33页
     ·OsBI-1氨基酸序列分析及系统发育树的构建第33页
   ·OsBI-1基因的表达分析第33-36页
     ·OsBI-1基因不同时期水稻器官的表达分析第33-34页
     ·OsBI-1基因在不同逆境下的表达第34-36页
第三章 pCAMBIA1300-OsBI-1载体构建及OsBI-1植株获得与分析第36-53页
 1. 材料与方法第36-47页
   ·植物材料、菌株及载体第36页
   ·主要的培养基和试剂第36-38页
     ·试剂第36-37页
     ·主要培养基第37-38页
   ·主要仪器第38页
   ·实验方法第38-47页
     ·pCAMBIA1300-OsBI-1超表达及反义抑制载体的构建第38-41页
     ·pCAMBIA1300-OsBI-1-GFP载体的构建第41-43页
     ·各转基因载体的遗传转化第43-44页
     ·转基因水稻的制备第44-46页
     ·转基因水稻的检测第46-47页
 2. 结果与分析第47-53页
   ·pCAMBIA1300-OsBI-1超表达及反义抑制载体的构建第47-48页
   ·pCAMBIA1300-OsBI-GFP载体的构建第48-49页
   ·转基因植株的获得第49-50页
   ·OsBI-1转基因水稻的检测第50-53页
     ·转基因植株潮霉素抗性的快速检测第50页
     ·PCR方法检测T0代转基因植株第50-51页
     ·转基因T1代种子潮霉素发芽鉴定第51-52页
     ·OsBI-1基因的定量分析第52-53页
第四章 转基因后代在逆境条件下的抗性和表型变化第53-62页
 1. 材料与方法第53-55页
   ·实验材料第53页
   ·主要试剂和培养基第53页
   ·处理方法第53-55页
     ·NaCL处理第53-54页
     ·4℃低温处理第54页
     ·高温处理第54页
     ·PEG处理第54页
     ·水杨酸处理第54-55页
   ·种子萌发第55页
     ·高盐处理第55页
     ·MeJA处理第55页
 2 结果与分析第55-62页
   ·转基因苗子的逆境处理第55-56页
   ·转基因种子的萌发实验第56-62页
     ·盐处理第56-58页
     ·ABA处理第58-60页
     ·MeJA处理第60-62页
第五章 融合蛋白和酵母双杂交载体的构建及转化第62-71页
 1 材料和方法第62-68页
   ·菌株和质粒第62-63页
   ·主要试剂和培养基第63-64页
     ·主要试剂和主要仪器第63-64页
     ·主要培养基第64页
   ·实验方法第64-68页
     ·pGBKT7:OsBI载体的构建第64-65页
     ·含目的片段的酵母载体的转化第65-66页
     ·融合蛋白表达载体的构建第66-68页
 2. 结果与分析第68-71页
   ·酵母双杂交载体的构建及转化第68-69页
     ·pGBKT7:OsBI载体的构建第68-69页
     ·酵母转化第69页
   ·融合蛋白的表达第69-71页
     ·pET32a载体的构建第69-70页
     ·pGEX-4T-2载体的构建第70-71页
第六章 总结与讨论第71-76页
 1. 植物BI-1在ER依赖的PCD途径的作用第71-72页
 2. 植物BI-1的PCD的作用模式第72-73页
 3. OsBI-1功能初步分析第73-74页
 4. 展望第74-76页
参考文献第76-82页
致谢第82-83页

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