摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-21页 |
1. 植物逆境生理 | 第10-13页 |
·干旱胁迫对植物的影响 | 第10-11页 |
·高温胁迫对植物的影响 | 第11-12页 |
·低温胁迫对植物的影响 | 第12-13页 |
·高盐胁迫对植物的影响 | 第13页 |
2 细胞凋亡 | 第13-17页 |
·活性氧在细胞凋亡中的作用 | 第14-15页 |
·细胞色素C对细胞凋亡的调节 | 第15-16页 |
·CaMBP对细胞凋亡的作用 | 第16页 |
·细菌在细胞凋亡中的作用 | 第16-17页 |
3 细胞程序性死亡 | 第17-18页 |
4 BI-1(Bax Inhibitor-1)基因 | 第18-20页 |
5 本研究的目的和意义 | 第20-21页 |
第二章 水稻OsBI-1的克隆与分析 | 第21-36页 |
1. 材料与方法 | 第21-31页 |
·植物材料、菌种和载体 | 第21页 |
·主要仪器设备 | 第21-22页 |
·主要试剂及培养基 | 第22-23页 |
·主要试剂 | 第22页 |
·主要培养基 | 第22-23页 |
·实验方法 | 第23-31页 |
·水稻日本晴的处理 | 第23-24页 |
·水稻幼苗RNA的提取与纯化 | 第24-25页 |
·RNA反转录 | 第25-26页 |
·OsBI-1基因的克隆 | 第26-29页 |
·半定量RT-PCR | 第29-31页 |
2. 结果与分析 | 第31-36页 |
·OsBI-1的克隆 | 第31页 |
·OsBI-1基因的序列分析 | 第31-33页 |
·OsBI-1结构与功能预测 | 第31-32页 |
·OsBI-1蛋白质结构的分析 | 第32-33页 |
·OsBI-1氨基酸序列分析及系统发育树的构建 | 第33页 |
·OsBI-1基因的表达分析 | 第33-36页 |
·OsBI-1基因不同时期水稻器官的表达分析 | 第33-34页 |
·OsBI-1基因在不同逆境下的表达 | 第34-36页 |
第三章 pCAMBIA1300-OsBI-1载体构建及OsBI-1植株获得与分析 | 第36-53页 |
1. 材料与方法 | 第36-47页 |
·植物材料、菌株及载体 | 第36页 |
·主要的培养基和试剂 | 第36-38页 |
·试剂 | 第36-37页 |
·主要培养基 | 第37-38页 |
·主要仪器 | 第38页 |
·实验方法 | 第38-47页 |
·pCAMBIA1300-OsBI-1超表达及反义抑制载体的构建 | 第38-41页 |
·pCAMBIA1300-OsBI-1-GFP载体的构建 | 第41-43页 |
·各转基因载体的遗传转化 | 第43-44页 |
·转基因水稻的制备 | 第44-46页 |
·转基因水稻的检测 | 第46-47页 |
2. 结果与分析 | 第47-53页 |
·pCAMBIA1300-OsBI-1超表达及反义抑制载体的构建 | 第47-48页 |
·pCAMBIA1300-OsBI-GFP载体的构建 | 第48-49页 |
·转基因植株的获得 | 第49-50页 |
·OsBI-1转基因水稻的检测 | 第50-53页 |
·转基因植株潮霉素抗性的快速检测 | 第50页 |
·PCR方法检测T0代转基因植株 | 第50-51页 |
·转基因T1代种子潮霉素发芽鉴定 | 第51-52页 |
·OsBI-1基因的定量分析 | 第52-53页 |
第四章 转基因后代在逆境条件下的抗性和表型变化 | 第53-62页 |
1. 材料与方法 | 第53-55页 |
·实验材料 | 第53页 |
·主要试剂和培养基 | 第53页 |
·处理方法 | 第53-55页 |
·NaCL处理 | 第53-54页 |
·4℃低温处理 | 第54页 |
·高温处理 | 第54页 |
·PEG处理 | 第54页 |
·水杨酸处理 | 第54-55页 |
·种子萌发 | 第55页 |
·高盐处理 | 第55页 |
·MeJA处理 | 第55页 |
2 结果与分析 | 第55-62页 |
·转基因苗子的逆境处理 | 第55-56页 |
·转基因种子的萌发实验 | 第56-62页 |
·盐处理 | 第56-58页 |
·ABA处理 | 第58-60页 |
·MeJA处理 | 第60-62页 |
第五章 融合蛋白和酵母双杂交载体的构建及转化 | 第62-71页 |
1 材料和方法 | 第62-68页 |
·菌株和质粒 | 第62-63页 |
·主要试剂和培养基 | 第63-64页 |
·主要试剂和主要仪器 | 第63-64页 |
·主要培养基 | 第64页 |
·实验方法 | 第64-68页 |
·pGBKT7:OsBI载体的构建 | 第64-65页 |
·含目的片段的酵母载体的转化 | 第65-66页 |
·融合蛋白表达载体的构建 | 第66-68页 |
2. 结果与分析 | 第68-71页 |
·酵母双杂交载体的构建及转化 | 第68-69页 |
·pGBKT7:OsBI载体的构建 | 第68-69页 |
·酵母转化 | 第69页 |
·融合蛋白的表达 | 第69-71页 |
·pET32a载体的构建 | 第69-70页 |
·pGEX-4T-2载体的构建 | 第70-71页 |
第六章 总结与讨论 | 第71-76页 |
1. 植物BI-1在ER依赖的PCD途径的作用 | 第71-72页 |
2. 植物BI-1的PCD的作用模式 | 第72-73页 |
3. OsBI-1功能初步分析 | 第73-74页 |
4. 展望 | 第74-76页 |
参考文献 | 第76-82页 |
致谢 | 第82-83页 |