摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-7页 |
目录 | 第7-10页 |
前言 | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-18页 |
·高等植物成花诱导光周期途径研究 | 第11-13页 |
·高等植物成花诱导 | 第11页 |
·高等植物的光周期现象 | 第11页 |
·高等植物成花光周期的信号转导 | 第11-13页 |
·蝴蝶兰成花诱导研究进展 | 第13-16页 |
·蝴蝶兰的商业价值 | 第13-14页 |
·蝴蝶兰的成花诱导研究 | 第14-16页 |
·CONSTANS(CO)的研究进展 | 第16-18页 |
第二章 DhCOL 基因的克隆 | 第18-37页 |
·试验材料 | 第18页 |
·植物材料 | 第18页 |
·主要试剂 | 第18页 |
·感受态菌种和连接载体 | 第18页 |
·主要试验器材 | 第18页 |
·试验方法 | 第18-25页 |
·采样和样品保存 | 第18-19页 |
·总 RNA 的提取 | 第19页 |
·基因组 DNA 的消化 | 第19-20页 |
·RNA 反转录为 cDNA | 第20-21页 |
·特异性引物设计 | 第21页 |
·RT-PCR 扩增 DhCOL 基因 | 第21-22页 |
·PCR 产物回收 | 第22页 |
·回收产物与载体连接 | 第22页 |
·制备大肠杆菌(TG1)感受态 | 第22-24页 |
·连接产物的转化及阳性克隆筛选 | 第24页 |
·菌检及测序 | 第24页 |
·基因序列生物学信息学分析 | 第24-25页 |
·结果与分析 | 第25-36页 |
·总 RNA 的提取结果 | 第25页 |
·DhCOL 基因的扩增结果 | 第25-26页 |
·基因序列分析 | 第26-27页 |
·蛋白质预测与分析 | 第27-32页 |
·聚类分析 | 第32-33页 |
·同源性分析 | 第33-36页 |
·讨论 | 第36-37页 |
第三章 不同光周期处理下朵丽蝶兰 DhCOL 和 DhGI1 基因的时空表达 | 第37-52页 |
·试验材料 | 第37页 |
·植物材料 | 第37页 |
·主要试剂 | 第37页 |
·主要试验器材 | 第37页 |
·试验方法 | 第37-42页 |
·采样和样品保存 | 第37-40页 |
·总 RNA 的提取 | 第40页 |
·DNA 消化与 cDNA 的合成 | 第40-41页 |
·引物设计 | 第41页 |
·荧光定量 RT-PCR | 第41-42页 |
·结果与分析 | 第42-49页 |
·不同光周期下 DhCOL 和 DhGI1 基因昼夜表达分析 | 第42-44页 |
·不同光周期下朵丽蝶兰不同组织中的 DhCOL 和 DhGI1 的表达 | 第44-45页 |
·不同光周期下花部各器官中 DhCOL 和 DhGI1 的表达 | 第45-46页 |
·不同光周期下朵丽蝶兰不同生长阶段顶叶中 DhCOL 和 DhGI1 的表达 | 第46-48页 |
·不同光周期处理下朵丽蝶兰不同大小花苞中 DhCOL 和 DhGI1 的表达 | 第48-49页 |
·讨论和结论 | 第49-52页 |
·不同光周期下 DhCOL 和 DhGI1 昼夜表达 | 第49-50页 |
·不同光周期下 DhCOL 和 DhGI1 在朵丽蝶兰不同生长阶段的表达 | 第50页 |
·不同光周期下 DhCOL 和 DhGI1 不同组织表达 | 第50页 |
·不同光周期下不同大小花苞中 DhCOL 和 DhGI1 的表达 | 第50-51页 |
·不同光周期下花部各器官中 DhCOL 和 DhGI1 的表达 | 第51-52页 |
第四章 DhCOL 基因植物表达载体的构建及农杆菌介导转化拟南芥 | 第52-67页 |
·试验材料 | 第52页 |
·菌种和载体 | 第52页 |
·主要试剂 | 第52页 |
·主要仪器设备 | 第52页 |
·试验方法 | 第52-61页 |
·质粒提取 | 第52-54页 |
·DhCOL 基因扩增 | 第54-55页 |
·载体及目的片段酶切 | 第55页 |
·酶切产物回收 | 第55页 |
·将载体酶切产物和基因片段酶切产物连接 | 第55-56页 |
·连接产物转化大肠杆菌及阳性克隆筛选 | 第56页 |
·表达载体第一轮酶切验证 | 第56页 |
·表达载体第二轮酶切验证 | 第56-58页 |
·菌检测序 | 第58页 |
·拟南芥种植与处理 | 第58-59页 |
·浸花法浸染拟南芥 | 第59页 |
·纯合子筛选 | 第59-60页 |
·转基因植株表型观察 | 第60页 |
·基因组水平上检测转基因植株 | 第60页 |
·转录水平上检测转基因植株 | 第60-61页 |
·结果与分析 | 第61-65页 |
·PCR 扩增结果 | 第61页 |
·目的基因片段和 pC1301 载体酶切 | 第61-62页 |
·表达载体酶切验证结果 | 第62-63页 |
·菌检测序 | 第63页 |
·农杆菌菌液保存 | 第63页 |
·转基因植株基因组水平上检测 | 第63-64页 |
·转基因植株在转录水平上检测 | 第64页 |
·DhCOL 转基因植株表型分析 | 第64-65页 |
·讨论 | 第65-67页 |
·pC1301-DhCOL 植物表达载体构建 | 第65页 |
·农杆菌介导转化拟南芥 | 第65-67页 |
第五章 结论与展望 | 第67-70页 |
·结论 | 第67-68页 |
·DhCOL 的克隆 | 第67页 |
·DhCOL 植物表达载体构建及转化拟南芥 | 第67页 |
·不同光周期处理下朵丽蝶兰中 DhCOL 和 DhGI1 基因的时空表达 | 第67-68页 |
·展望 | 第68-70页 |
参考文献 | 第70-77页 |
附录 | 第77-79页 |
个人简介 | 第79-81页 |
致谢 | 第81页 |