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大豆GmICE1基因的克隆与功能分析

摘要第1-4页
Abstract第4-6页
縮略词表第6-11页
第一章 前言第11-25页
   ·与植物抗寒相关的转录因子第11-15页
     ·低温冷诱导基因(COR)第11-12页
     ·调控植物基因表达的转录因子定义及其分类第12页
     ·植物转录因子的结构第12页
     ·转录因子的调控作用第12-13页
     ·植物中的抗逆转录因子信号转导途径第13-15页
     ·DRE/CRT元件的鉴定第15页
   ·与植物抗逆性相关的转录因子第15-21页
     ·EREBP/A P2类转录因子第16页
     ·DREB/CBF类转录因子第16-17页
     ·CBF/DREB转基因植物的耐逆性第17-18页
     ·拟南芥ICE1基因(CBF/DREB上游相关基因)的鉴定第18-20页
     ·大豆抗寒基因研究第20-21页
   ·植物抗寒基因工程的研究第21-23页
     ·导入抗寒调控基因的研究第21页
     ·导入抗寒功能基因的研究第21-23页
   ·研究目的意义及研究路线第23-25页
     ·研究目的意义第23-24页
     ·试验技术路线第24-25页
第二章 抗寒基因GMICE1的克隆与转化烟草的研究第25-47页
   ·材料第25-26页
     ·植物材料第25页
     ·菌种与质粒第25页
     ·试剂第25页
     ·抗生素第25页
     ·培养基第25-26页
   ·方法第26-39页
     ·克隆大豆GmICE1基因第26-28页
     ·构建植物表达载体pCAMBIA1304-35S-GmICE1-polyA第28-32页
     ·植物表达载体pCAMBIA1304-35S-GmICE1-polyA导入农杆菌第32-33页
     ·农杆菌介导法转化烟草第33-34页
     ·确定潮霉素筛选梯度第34页
     ·农杆菌重悬培养基对转化率影响的比较试验第34页
     ·确定除菌剂Cef使用浓度的试验第34页
     ·除菌方法对除菌效果和转化率的影响试验第34页
     ·共培养时间对农杆菌转化的影响第34页
     ·抗性植株的分子生物学检测第34-39页
   ·结果与分析第39-45页
     ·抗寒基因GmICE1的克隆第39页
     ·中间载体PRT107-35S-GmICE1-polyA的双酶切鉴定第39-40页
     ·植物表达载体pCAMBIA1304-35S-GmICE1-polyA的双酶切鉴定第40页
     ·植物表达载体pCAMBIA1304-35S-GmICE1-polyA导入农杆菌第40-41页
     ·潮霉素筛选压力的确定第41-42页
     ·农杆菌悬浮培养基对转化率的影响第42页
     ·农杆菌LBA4404对注射用头孢噻肟钠的敏感性第42-43页
     ·除菌方法对除菌效果和转化率的影响第43页
     ·共培养时间对农杆菌转化的影响第43-44页
     ·培养基渗透势对烟草愈伤组织分化的影响第44页
     ·农杆菌介导的遗传转化及植株再生第44页
     ·抗性植株的分子生物学检测第44-45页
   ·讨论第45-47页
     ·选择大豆GmICE1为抗寒目的基因第45-46页
     ·启动子的选择第46页
     ·抗性植株的PCR检测第46-47页
第三章 低温胁迫对转基因烟草生理的影响第47-55页
   ·材料与方法第47-48页
     ·材料第47页
     ·方法第47-48页
   ·结果与分析第48-53页
     ·抗寒性检测结果第48-49页
     ·脯氨酸含量分析结果第49-50页
     ·丙二醛的测定结果第50页
     ·SOD活性测定结果第50-51页
     ·CAT活性测定结果第51-52页
     ·POD活性测定结果第52-53页
   ·讨论第53-55页
     ·植物抗逆性与抗氧化酶的关系第53页
     ·低温胁迫对烟草抗氧化酶活性的影响第53-54页
     ·大豆GmICE1基因对烟草植株生长及抗氧化酶活性的影响第54-55页
第四章 结论第55-57页
参考文献第57-65页
致谢第65-66页
附录第66-69页
作者简历第69页

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