| 中文摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 1 引言 | 第10-24页 |
| ·SGC 的结构 | 第10页 |
| ·鸟苷酸环化酶的分类 | 第10-12页 |
| ·胞浆可溶性鸟苷酸环化酶 | 第11页 |
| ·结合型鸟苷酸环化酶 | 第11-12页 |
| ·SGC 的功能 | 第12-14页 |
| ·一氧化氮（NO） | 第14-17页 |
| ·一氧化氮的结构及作用 | 第14-15页 |
| ·NO 的生物合成 | 第15-17页 |
| ·一氧化氮合酶（NOS） | 第16页 |
| ·硝酸还原酶（NR） | 第16页 |
| ·不涉及酶反应的 NO 其他酶源 | 第16-17页 |
| ·SGC 的活性调节机理 | 第17-22页 |
| ·胞浆可溶性鸟苷酸环化酶 | 第19-21页 |
| ·膜结合型鸟苷酸环化酶 | 第21-22页 |
| ·鸟苷酸环化酶基因家族 | 第22页 |
| ·论文研究内容及意义 | 第22-24页 |
| 2. 材料与方法 | 第24-40页 |
| ·试材与试材处理 | 第24页 |
| ·仪器与试剂 | 第24-27页 |
| ·试验方法 | 第27-38页 |
| ·SGC 全长 CDNA 的克隆 | 第27-33页 |
| ·引物设计 | 第27-28页 |
| ·RNA 提取 | 第28页 |
| ·总浓度测定 | 第28页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第28-29页 |
| ·梯度 PCR | 第29页 |
| ·回收目的 DNA 片段 | 第29-30页 |
| ·克隆载体的构建及鉴定 | 第30-31页 |
| ·5′及 3′RACE | 第31-33页 |
| ·SGC 序列分析 | 第33-34页 |
| ·SGC 重组蛋白的表达 | 第34-36页 |
| ·表达载体的构建及鉴定 | 第34页 |
| ·含重组质粒的大肠杆菌的繁殖培养 | 第34页 |
| ·大肠杆菌的破碎和目的蛋白的获得 | 第34页 |
| ·考马斯亮蓝法测定蛋白质含量 | 第34-35页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第35-36页 |
| ·制备饱和一氧化氮 | 第36页 |
| ·电化学分析 | 第36-37页 |
| ·实时荧光定量 PCR | 第37-38页 |
| ·桃果实的处理 | 第37页 |
| ·提取 RNA | 第37页 |
| ·反转录 | 第37页 |
| ·定量 PCR 检测 | 第37-38页 |
| ·鸟苷酸环化酶活性的测定 | 第38-40页 |
| ·酶的分离与纯化 | 第38页 |
| ·酶活性测定 | 第38-39页 |
| ·动力学实验 | 第39-40页 |
| ·实验条件的优化 | 第39页 |
| ·一氧化氮对 sGC 蛋白活性的影响 | 第39-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-48页 |
| ·桃果实 RNA 的完整性 | 第40页 |
| ·SGC 全长 CDNA 的克隆 | 第40-41页 |
| ·SGC 全长基因的序列分析与功能预测 | 第41-43页 |
| ·序列开放阅读框分析 | 第41页 |
| ·肥城桃 SGC 蛋白的二级结构分析 | 第41-42页 |
| ·肥城桃 SGC 蛋白与其他物种的 SGC 蛋白相似比对 | 第42页 |
| ·SGC 蛋白的系统进化分析 | 第42-43页 |
| ·三级结构预测 | 第43页 |
| ·NO 对 SGC 及 SGC 蛋白的影响 | 第43-48页 |
| ·总 RNA 的提取及分析 | 第43-44页 |
| ·实时荧光定量分析 | 第44页 |
| ·电化学分析 | 第44-45页 |
| ·动力学研究 | 第45-47页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第45-46页 |
| ·底物浓度的影响 | 第46页 |
| ·温度的影响 | 第46-47页 |
| ·pH 的影响 | 第47页 |
| ·HPLC 测定 NO 对 SGC 蛋白活性的影响 | 第47-48页 |
| 4. 讨论 | 第48-50页 |
| ·可溶性鸟苷酸环化酶基因的克隆 | 第48页 |
| ·肥城桃鸟苷酸环化酶基因及蛋白的序列分析 | 第48-49页 |
| ·NO 对 SGC 及 SGC 蛋白的影响 | 第49-50页 |
| 5 结论 | 第50-51页 |
| 6 创新之处 | 第51-52页 |
| 7 参考文献 | 第52-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第66页 |