符号说明 | 第1-9页 |
中文摘要 | 第9-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
1 前言 | 第11-24页 |
·植物体内谷胱甘肽合成及生物学功能概述 | 第11-16页 |
·谷胱甘肽的生物合成 | 第11-12页 |
·谷胱甘肽合成的调节 | 第12页 |
·谷胱甘肽在植物中生长发育中的作用 | 第12-13页 |
·谷胱甘肽在植物生物胁迫下的作用 | 第13页 |
·谷胱甘肽在植物非生物胁迫下的作用 | 第13-15页 |
·过表达谷胱甘肽合成相关酶的研究进展 | 第15-16页 |
·镉胁迫的毒害机理概述 | 第16-18页 |
·镉对植物生长的影响 | 第16页 |
·镉在植物体内的吸收及其转运 | 第16-17页 |
·镉胁迫与活性氧代谢 | 第17-18页 |
·植物对镉胁迫的响应机制 | 第18页 |
·谷胱甘肽在重金属胁迫中的作用 | 第18-22页 |
·本试验研究目的及意义 | 第22-24页 |
2 材料与方法 | 第24-37页 |
·材料处理 | 第24-25页 |
·表达载体的构建 | 第25-29页 |
·总 RNA 的提取 | 第25-26页 |
·cDNA 第一链的合成 | 第26页 |
·PCR 扩增获得目的片段 | 第26-27页 |
·目的片段连接到克隆载体 | 第27页 |
·大肠杆菌的转化 | 第27页 |
·重组质粒的筛选与鉴定 | 第27-28页 |
·重组质粒插入片段方向的酶切鉴定 | 第28页 |
·目的片段连入表达载体 pBI121 | 第28-29页 |
·LeGSH1 基因的生物信息学分析 | 第29页 |
·LeGSH1 基因的时空表达和逆境响应 | 第29页 |
·农杆菌介导的番茄叶片的遗传转化 | 第29-34页 |
·农杆菌感受态细胞的制备 | 第29页 |
·农杆菌的转化 | 第29-30页 |
·农杆菌介导的番茄外源基因转化 | 第30-31页 |
·组培苗的检测 | 第31-34页 |
·镉胁迫下过表达 LeGSH1 转基因植株的指标测定 | 第34-36页 |
·干鲜重的测定 | 第34页 |
·叶片中叶绿素含量的测定 | 第34页 |
·叶片中 LeGSH1 基因表达量的测定 | 第34页 |
·叶片中谷胱甘肽含量的测定 | 第34-35页 |
·叶片中丙二醛含量的测定 | 第35页 |
·叶片中 H_2O_2和 O_2~(.-)含量的测定 | 第35页 |
·叶片中镉、钙、镁、铁和铜含量的测定 | 第35-36页 |
·统计分析 | 第36-37页 |
3 结果与分析 | 第37-49页 |
·目的基因片段的克隆与表达载体的构建 | 第37-41页 |
·目的基因的克隆 | 第37页 |
·表达载体的构建与检测 | 第37-38页 |
·番茄 LeGSH1 基因的生物信息学分析 | 第38-40页 |
·番茄 LeGSH1 基因的时空表达和逆境响应 | 第40-41页 |
·番茄的遗传转化及检测 | 第41-42页 |
·番茄的遗传转化 | 第41页 |
·转基因植株的 PCR 检测 | 第41-42页 |
·Southern blot 检测转基因植株 | 第42页 |
·镉胁迫对转基因番茄的影响 | 第42-49页 |
·番茄叶片的表观症状 | 第42-43页 |
·对番茄叶片 LeGSH1 表达量的影响 | 第43页 |
·对番茄叶片 GSH 含量的影响 | 第43-44页 |
·对番茄叶片叶绿素含量的影响 | 第44-45页 |
·对番茄植株干鲜重的影响 | 第45页 |
·对叶片中 O_2~(.-)和 H_2O_2含量的影响 | 第45-46页 |
·对叶中丙二醛含量的影响 | 第46-47页 |
·对叶中镉、镁、钙、铁、铜含量的影响 | 第47-49页 |
4 讨论 | 第49-52页 |
·番茄 LeGSH1 基因的时空表达和逆境响应 | 第49页 |
·LeGSH1 转基因番茄在镉胁迫下的响应 | 第49-52页 |
5 结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-74页 |
附录 | 第74-76页 |
致谢 | 第76-77页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第77页 |