| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 目录 | 第9-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-42页 |
| ·铜伴侣蛋白Atox1与细胞内的铜平衡 | 第12-22页 |
| ·引言 | 第12页 |
| ·铜的细胞摄取与平衡 | 第12-14页 |
| ·铜伴侣蛋白Atox1 | 第14-22页 |
| ·铜转运蛋白与铂类抗肿瘤药物 | 第22-31页 |
| ·引言 | 第22-23页 |
| ·DNA是顺铂的主要作用靶点 | 第23-24页 |
| ·蛋白质与铂类药物的作用 | 第24-25页 |
| ·铜转运蛋白与铂类药物的作用 | 第25-31页 |
| 参考文献 | 第31-42页 |
| 第二章 保守残基调节Atox1性质的结构和动力学研究 | 第42-78页 |
| ·引言 | 第42-43页 |
| ·实验材料和方法 | 第43-51页 |
| ·分子克隆、蛋白质的表达及纯化 | 第43-49页 |
| ·核磁共振谱图的采集、数据处理和结构计算 | 第49-50页 |
| ·氢氘交换实验及数据处理 | 第50页 |
| ·主链~(15)N弛豫分析 | 第50-51页 |
| ·核磁滴定实验 | 第51页 |
| ·实验结果和讨论 | 第51-73页 |
| ·Atox1 wild-type与突变体蛋白的~1H-~(15)N HSQC谱图比较 | 第51-53页 |
| ·K60A突变体蛋白的化学位移认证 | 第53页 |
| ·K60A突变体的结构计算 | 第53-55页 |
| ·K60A突变体的结构及其与野生型蛋白结构的比较 | 第55-57页 |
| ·K60A突变导致的化学位移扰动 | 第57-58页 |
| ·K60A突变体与野生型蛋白的氢氘交换动力学比较 | 第58-60页 |
| ·K60A突变体与野生型蛋白的~(15)N主链弛豫动力学比较 | 第60-63页 |
| ·K60A突变体的铜结合性质研究 | 第63-67页 |
| ·野生型蛋白与K60A突变体的铜转移性质比较 | 第67-71页 |
| ·讨论 | 第71-73页 |
| ·本章总结 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-78页 |
| 第三章 铜结合调节Atox1与铂类化合物的作用 | 第78-122页 |
| ·引言 | 第78-80页 |
| ·实验材料和方法 | 第80-83页 |
| ·铂类化合物的合成 | 第80页 |
| ·分子克隆、蛋白质的表达及纯化 | 第80页 |
| ·分子筛检测Atox1与铂类化合物的作用 | 第80-81页 |
| ·NMR实验 | 第81-82页 |
| ·电喷雾质谱(ESI-MS)实验 | 第82页 |
| ·Tricine-SDS-PAGE | 第82-83页 |
| ·实验结果和讨论 | 第83-116页 |
| ·Atox1与铂化合物反应的初步探索 | 第83-86页 |
| ·~1H-~(15)N HSQC方法监测顺铂与Atox1的作用 | 第86-90页 |
| ·ESI-MS方法研究顺铂与Atox1复合物的种类和转化过程 | 第90-92页 |
| ·酶解及串联质谱检测铜结合对顺铂结合位点的影响 | 第92-94页 |
| ·反式铂化合物与Atox1作用的NMR研究 | 第94-99页 |
| ·ESI-MS方法研究反式铂化合物与Atox1复合物的种类、转化过程及铂结合位点 | 第99-105页 |
| ·Tricine-SDS-PAGE方法研究铂化诱导的Atox1的聚集 | 第105-106页 |
| ·GSH存在下铂类化合物与Atox1的作用 | 第106-114页 |
| ·讨论 | 第114-116页 |
| ·本章总结 | 第116-117页 |
| 参考文献 | 第117-122页 |
| 致谢 | 第122-123页 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的研究成果 | 第123-124页 |
