| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第1章 绪论(miRNAs的功能及在肺癌中的研究进展) | 第10-33页 |
| ·引言 | 第10-11页 |
| ·肺癌的发生机制 | 第11-14页 |
| ·影响肺癌发生的主要风险因子 | 第11-13页 |
| ·肺癌发生过程中的分子改变 | 第13-14页 |
| ·miRNA背景介绍 | 第14-22页 |
| ·miRNA的发现 | 第14-16页 |
| ·miRNA的定义和命名 | 第16-17页 |
| ·miRNA的生物合成 | 第17-19页 |
| ·miRNA的生物学功能及作用机制 | 第19-22页 |
| ·miRNAs与肿瘤 | 第22-25页 |
| ·miRNAs发挥类似抑癌基因或癌基因的作用 | 第25-29页 |
| ·miRNA作为抑癌基因 | 第26-28页 |
| ·miRNA作为癌基因 | 第28-29页 |
| ·miRNAs与肺癌 | 第29-31页 |
| ·研究的目的和意义 | 第31-33页 |
| 第2章 实验材料和方法 | 第33-45页 |
| ·实验材料 | 第33-36页 |
| ·实验仪器 | 第33页 |
| ·组织标本,细胞株和裸鼠 | 第33-34页 |
| ·主要试剂和材料 | 第34-36页 |
| ·实验方法 | 第36-45页 |
| ·组织标本获取 | 第36-37页 |
| ·细胞培养 | 第37页 |
| ·总RNA提取 | 第37-38页 |
| ·RT-PCR | 第38页 |
| ·miRNA及siRNA转染 | 第38-39页 |
| ·CellTiter法测定细胞活性 | 第39页 |
| ·利用EdU检测细胞增殖 | 第39页 |
| ·流式细胞仪分析(Flow Cytometry Analysis,FACS) | 第39-40页 |
| ·细胞衰老检测 | 第40页 |
| ·载体构建 | 第40-41页 |
| ·大肠杆菌转化实验 | 第41页 |
| ·质粒小提 | 第41页 |
| ·双报告荧光素检测 | 第41-42页 |
| ·Western Blotting | 第42页 |
| ·裸鼠成瘤实验 | 第42-43页 |
| ·免疫组化(Immunohistochemistry,IHC) | 第43页 |
| ·流式检测细胞凋亡 | 第43页 |
| ·miRNA和质粒共转染 | 第43页 |
| ·miRNA靶基因预测软件 | 第43-44页 |
| ·统计分析 | 第44-45页 |
| 第3章 实验结果与讨论 | 第45-83页 |
| ·miR-449a在肺癌细胞中的功能和机制研究 | 第45-74页 |
| ·miR-449a在肺癌组织及细胞系中的表达 | 第45-48页 |
| ·miR-449a的表达与肺癌患者临床病理和预后相关性的研究 | 第48-51页 |
| ·miR-449a对肺癌细胞系细胞生长活力的影响 | 第51-52页 |
| ·miR-449a对细胞增殖的影响 | 第52-53页 |
| ·miR-449a对细胞周期的调控作用 | 第53-57页 |
| ·miR-449a促进细胞的衰老 | 第57-58页 |
| ·miR-449a促进细胞的凋亡 | 第58-59页 |
| ·miR-449a靶基因的预测和鉴定 | 第59-63页 |
| ·E2F3在miR-449a细胞调控功能中的作用 | 第63-70页 |
| ·miR-449a对肿瘤细胞体内成瘤细胞能力的影响 | 第70-72页 |
| ·CCND1和CDK6是miR-449a另外两个作用靶点 | 第72-74页 |
| ·实验结果讨论 | 第74-82页 |
| ·结论 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-99页 |
| 致谢 | 第99-100页 |
| 在读期间发表的论文和研究成果 | 第100页 |